梅毒不同檢測方法的比較

盧光祥等

【摘 要】目的：通過與梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗（TP-ELISA）的比較，評價其他不同梅毒檢測方法的符合率。 方法：用TP-ELISA法檢測3220人份標(biāo)本，將陽性88例血清標(biāo)本分別用梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA），梅毒螺旋體特異抗體凝集試驗（TPPA）法進(jìn)行復(fù)檢比較。結(jié)果：TPHA與TP-ELISA符合率為93.18（82/88）%；TPPA與TP-ELISA符合率為93.18（82/88）%；TPHA與TPPA符合率100%（82/82）。結(jié)論：ELISA法方法簡便、經(jīng)濟(jì)，可實現(xiàn)操作自動化、客觀化，便于質(zhì)量控制，但假陽性率高，只可用來初篩梅毒，不能作為梅毒確認(rèn)試驗。TPHA與TPPA兩種方法都不能實現(xiàn)操作自動化，不便于質(zhì)量控制和結(jié)果儲存，但符合率高，可作為梅毒確認(rèn)試驗方法。

【關(guān)鍵詞】梅毒；梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗；梅毒螺旋體血凝試驗；梅毒螺旋體特異抗體凝集試驗；符合率

【文章編號】1004-7484（2014）06-3526-01

近年來，我國梅毒發(fā)病率有居高不下趨勢，梅毒血清學(xué)檢驗已列入獻(xiàn)血員、臨床患者輸血前后、孕婦、公務(wù)員體檢及各種創(chuàng)傷性疾病檢查前常規(guī)檢測項目[1]。我院為公務(wù)員體檢單位，選擇比較恰當(dāng)?shù)臋z測方法對公務(wù)員進(jìn)行體檢至關(guān)重要，檢測梅毒的方法有十多種，為探討梅毒檢測有一個好的組合方法，我們將TP-ELISA法篩選出的88例陽性標(biāo)本，分別用梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA）、梅毒螺旋體特異抗體凝集試驗（TPPA）兩種不同方法進(jìn)行復(fù)檢比較，評價這三種檢測方法的符合程度，進(jìn)行檢測方法組合，現(xiàn)報告如下。

1 對象和方法

1.1 研究對象 收集我院2013年門診、體檢中心和病房送檢的經(jīng)TP-ELISA檢測3220人中陽性標(biāo)本88份作為檢測評價對象。

1.2 材料和方法

1.2.1 試劑和儀器 試劑TP-ELISA試劑盒為北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司產(chǎn)品，TP-TPHA試劑盒為美國美德科學(xué)技術(shù)公司產(chǎn)品，TP-TPPA試劑盒為日本富士株式會社產(chǎn)品。儀器DNM-9602全自動酶標(biāo)分析儀由北京普朗新技術(shù)有限公司生產(chǎn)，全自動快速立式洗板機由鄭州基波新科技技術(shù)有限公司生產(chǎn)，ESCD-CLASSIIBSC生物安全柜由新加坡生產(chǎn)。

1.2.2 方法 試驗方法采取空腹靜脈血3-4ml，分離血清。試驗中設(shè)計陽性對照、陰性對照、空白對照，同步進(jìn)行各項目室內(nèi)質(zhì)控物監(jiān)測，TP-ELISA、TPHA、TPPA的檢測均嚴(yán)格按使用說明書操作。

2 結(jié)果

3 討論

3.1梅毒是由蒼白螺旋體引起的一種性傳播疾病。梅毒螺旋體是引起人類梅毒的病原體，人是梅毒的唯一傳染源。梅毒有先天性和獲得型兩種，其傳播途徑有三種，先天性梅毒螺旋體通過胎盤由母體傳染胎兒，獲得性梅毒主要經(jīng)性接觸和血液傳播，輸血感染是血液傳播的方式之一。近年來，我國梅毒的發(fā)病人數(shù)呈急劇上升趨勢[2]，嚴(yán)重危害了人類和社會的健康。梅毒的防治主要在于早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療。因此選擇敏感性及特異性均高、快速的梅毒檢測方法至關(guān)重要。

3.2現(xiàn)階段實驗室檢測梅毒的方法有病原學(xué)、血清學(xué)、基因診斷和腦脊液檢查。其中病原學(xué)檢查方法可靠，但易受條件制約，適于科研或教學(xué)使用；血清學(xué)檢查方法分非特異性抗體檢測試驗和特異性抗體檢測試驗，前者方法簡便，適于早期篩查，后者敏感性強、特異度高，現(xiàn)為梅毒診斷的標(biāo)準(zhǔn)實驗方法，熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS），是所有螺旋體試驗中最敏感的方法，特異性也很高，被認(rèn)為是檢測梅毒的“金標(biāo)準(zhǔn)”，缺點是不適合療效觀察，且價格昂貴；基因診斷為新檢測手段，具有高靈敏度，但目前國內(nèi)試劑質(zhì)量有待改進(jìn)；腦脊液檢查取樣技術(shù)較難，病人難以接受，送檢率低[3]。

3.3梅毒檢測分病原學(xué)檢測、非特異性梅毒血清學(xué)試驗和特異性梅毒血清學(xué)試驗等。梅毒的病原學(xué)檢測有暗視野顯微鏡檢查法、鍍銀染色法、直接免疫熒光法（DFA）、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）等。目前最常用的檢測方法仍是血清學(xué)檢測，多為非特異性抗體與特異性抗體聯(lián)合檢測[4]。梅毒非特異性抗體實驗：可用性病研究實驗室試驗（VDRL）、不加熱血清反應(yīng)素試驗（USR）、梅毒甲苯胺紅不加熱血清學(xué)試驗（TRUST）、快速血漿反應(yīng)素試驗（RPR）等檢測。梅毒特異性抗體實驗：可用熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）、梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）、梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗（TP-ELISA）、梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA）、梅毒快速診斷試驗（TP-RT）、梅毒螺旋體化學(xué)發(fā)光免疫測定（TP-CLIA）、梅毒螺旋體抗體免疫印跡試驗等檢測。盡管檢測方法多樣，不同的檢測方法對于梅毒都有其特殊的臨床診斷價值，但也有其自身局限性。任華愛等[5] 研究表明在梅毒感染的不同時期TRUST 檢出率差別較大。RPR試驗在抗體含量過高時，易出現(xiàn)假陰性反應(yīng)，即前帶現(xiàn)象（prozone phenomenon），RPR試驗亦存在生物學(xué)假陽性反應(yīng)[6]；TP-ELISA 法優(yōu)點是可以直接檢測抗梅毒特異抗體IgM，IgG，能對抗體分型，能提示梅毒感染的各階段，具有高特異性和高敏感性，對診斷治療均有益處，缺點是敏感性過高，容易誤診疾病，在患者血清中梅毒特異性抗體低于其試劑檢測限時，就有可能出現(xiàn)假陰性，同時該法也存在著假陽性[7]；TPPA試劑價格較高，檢測時需要將標(biāo)本倍比稀釋，不利于大批量樣本檢測，且以肉眼判斷結(jié)果，原始數(shù)據(jù)無法保存 [8]；TPHA試劑價格比較高， 不利于大批量樣本檢測，且以肉眼判斷結(jié)果，原始數(shù)據(jù)無法保存， 不便于質(zhì)量控制。

3.4國家公務(wù)員局規(guī)定，把TPHA作為公務(wù)員體檢方法，我們通過三種方法進(jìn)行實驗比對，TP-ELISA法只能作為篩查試驗，TPHA、TPPA法聯(lián)合檢測可作為診斷梅毒的確認(rèn)試驗。聯(lián)合檢測可為臨床提供準(zhǔn)確、及時的診斷依據(jù)，可避免誤診、漏診而產(chǎn)生醫(yī)患糾紛；聯(lián)合檢測還可為預(yù)防控制梅毒提供依據(jù)，也可為臨床診斷梅毒提供可靠診斷數(shù)據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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[8] 馬永娟、王彬、孟慶敏，梅毒四種血清學(xué)方法檢測的比較，職業(yè)與健康，2010，15（26）：1719.