冉 鑫 趙明惠 李春曉 趙彤言**

(1. 安徽醫(yī)科大學，合肥 230032；2. 軍事醫(yī)學科學院微生物流行病研究所，病原微生物生物安全國家重點實驗室，北京100071)

致倦庫蚊Culexpipiensquinquefasciatus是廣東省和海南省常見的優(yōu)勢蚊種，與人的關系密切，是夜晚入侵室內騷擾吸血的主要衛(wèi)生害蟲(曾林海等，2008)；并且是我國班氏絲蟲病和淋巴絲蟲病的主要傳播媒介，而且是乙型腦炎的傳播媒介之一，因此是病媒生物預防控制的主要靶標生物(吳中華等，2009；張金光和霍新北，2011)。殺蟲劑的化學防控是蚊蟲防控的主要措施之一，有機磷類，氨基甲酸酯類和擬除蟲菊酯類殺蟲劑目前在生產生活中仍在大量使用。這些殺蟲劑的使用導致蚊蟲抗藥性的產生和持續(xù)發(fā)展(Pimenteletal.， 1992；孟鳳霞等，2011)。為了解我國廣東省和海南省不同地區(qū)致倦庫蚊對常用殺蟲劑的抗藥性水平，指導殺蟲劑的合理使用，筆者于2013年8～9月對廣東省和海南省4個不同城市致倦庫蚊對常用殺蟲劑毒死蜱和克百威的抗性水平進行了測定，現(xiàn)將測定結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1供試蚊蟲：敏感品系蚊蟲選用采自廣東廣州，在實驗室常規(guī)飼養(yǎng)10年以上，未接觸任何殺蟲劑的致倦庫蚊。

自然種群致倦庫蚊于2013年8月和9月分別采自廣東省湛江市(E110°23′53.05″, N21°11′30.19″)和雷州市(E110°5′48.30″, N20°54′51.40″)以及海南省海口市(E110°21′8.66″, N20°3′17.23″)和陵水市(E110°2′15.01″, N18°30′21.77″)。采集方法選用幼蟲勺舀法，采集Ⅲ齡末Ⅳ齡初幼蟲用于后續(xù)的實驗。

1.1.2實驗用藥：殺蟲劑選用常用的有機磷類殺蟲劑毒死蜱和氨基甲酸酯類殺蟲劑克百威，殺蟲劑原藥(濃度99%)購自北京世紀奧科生物技術有限公司。丙酮為分析純，由軍事醫(yī)學科學院微生物流行病研究所媒介生物學與防治實驗室提供。

1.2 實驗方法

采用WHO幼蟲浸漬法(Cetinetal.，2005)，具體操作步驟：首先將殺蟲劑原液用丙酮配制成5至10個濃度梯度。每個容器(紙杯)中加99 mL過夜脫氯水，之后加1 mL不同濃度梯度的藥液，對照組加入1 mL丙酮。其次，挑選30條Ⅲ齡末Ⅳ齡初幼蟲，連同脫氯水共量取100 mL加入藥液杯中。最后，將蚊蟲放到溫度(26±1)℃，相對濕度75%的實驗室中。實驗重復3次。

1.3 結果處理

24 h后觀察實驗結果，并且記錄死亡數(shù)(以幼蟲不能逃避機械刺激為死亡)。如果對照組死亡率>20%時，則實驗失敗。結果用SPSS軟件進行數(shù)據(jù)分析，獲得致死中濃度LC50值和95% 置信區(qū)間。

2 結果

不同地理株致倦庫蚊幼蟲對毒死蜱和克百威抗性檢測結果見表1和圖1。通過表1和圖1可以看出，四個城市致倦庫蚊對毒死蜱和克百威均產生了一定程度的抗性，對毒死蜱抗性倍數(shù)差異比較顯著，和實驗室株相比，由1.91到5.40倍不等；對克百威的抗性倍數(shù)差異比較小，由1.12到1.95倍不等。

表1 致倦庫蚊對毒死蜱和克百威的抗性水平Tab.1 Levels of chlorpyrifos and carbofuran resistance in Cx. pipiens quinquefasciatus

1SL：實驗室; GZ：廣東湛江; GL：廣東雷州; HH：海南?？? HL：海南陵水。

1SL：Lab; GZ：Zhanjiang, Guangdong; GL：Leizhou, Guangdong; HH：Haikou; Hainan; HL：Lingshui; Hainan.

圖1 不同地區(qū)致倦庫蚊對毒死蜱和克百威的抗性水平對比Fig.1 Resistance spectrum of Cx. pipiens quinquefasciatus to chlorpyrifos and carbofuran insecticides in four cities

3 討論

本次抗性調查發(fā)現(xiàn)，廣東省和海南省不同城市致倦庫蚊對常用殺蟲劑毒死蜱和克百威均產生了一定程度的抗性。其中，對毒死蜱抗性最高，達到5.40倍。對克百威抗性只有1到2倍之間。蚊蟲對殺蟲劑產生抗性的原因主要是由于殺蟲劑的選擇壓力而形成的。而抗性發(fā)展的速度及程度則受到諸多因素的影響，如昆蟲本身的遺傳特性，這些是人類難以控制的。但是一些其他因素，如殺蟲劑的輪用、換用、停用、混用、鑲嵌式使用、間斷使用等等是可以延緩抗性發(fā)展的(任樟堯等，2003)。Zhao等(2014)研究發(fā)現(xiàn)廣東和海南兩省市致倦庫蚊對有機磷類殺蟲劑敵敵畏和氨基甲酸酯類殺蟲劑殘殺威的抗性均分別達到17倍和11倍。說明這兩種殺蟲劑在當?shù)匾呀泴е挛孟x抗性的大幅度增加。而毒死蜱是農業(yè)部推薦的用于稻飛虱防治的重要殺蟲劑之一，田間抗性檢測表明，灰飛虱對毒死蜱已產生了低到中等水平的抗性(張月亮等，2013)。另外，2006年起，農業(yè)部將丁硫克百威作為防治棉蚜的高毒農藥替代在我國推廣使用(王娜，2013)。本研究表明，致倦庫蚊對這兩種殺蟲劑的抗性水平均屬于低水平抗性。因此，在此地的病媒生物防制工作中，要充分考慮各種因素，選擇適宜的殺蟲劑種類、劑型和劑量及準確的使用方法。同時加強對抗性機制的探索研究，加強新型殺蟲劑及劑型的開發(fā)，以延緩抗藥性的進一步發(fā)展(宋麗華等，2012)。