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      硒與川芎嗪配伍對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用

      2014-12-06 07:44:14遼寧衛(wèi)生職業(yè)技術學院衛(wèi)檢教研室110101徐國鋒馬月嬌
      遼寧醫(yī)學雜志 2014年5期
      關鍵詞:過氧化物川芎嗪過氧化

      遼寧衛(wèi)生職業(yè)技術學院衛(wèi)檢教研室(110101)范 穎 董 瑤 徐國鋒 馬月嬌

      在缺血性疾病搶救和治療過程中,目前發(fā)現(xiàn)對組織造成損傷的主要因素不是缺血本身,而是恢復血液供應后出現(xiàn)了更加嚴重的腦機能障礙。腦缺血再灌注損傷發(fā)生機制十分復雜,與自由基的生成、細胞內(nèi)鈣超載、興奮性氨基酸毒性、白細胞高度聚集和高能磷酸化合物的缺乏等有關。多項實驗研究證明,這種病理生理變化存在一定的藥物干預性[1,2]。本實驗從硒與川芎嗪配伍對腦缺血再灌注損傷保護機制的研究,探討中藥復方制劑對其防治作用的可行性。

      1 材料與方法

      1.1 動物 SD大鼠50只,雌雄各半,體重(200±20)g,由遼寧長生生物技術有限公司提供。

      1.2 藥物與試劑 亞硒酸鈉由沈陽市第五試劑廠生產(chǎn),批號1304151,臨用時用生理鹽水配制。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)試劑盒,均購于南京建成生物工程研究所。

      1.3 方法

      1.3.1 大鼠腦缺血再灌注損傷模型 參考文獻方法[3],取健康大鼠腹腔注射3%戊巴比妥后固定于手術臺上。沿頸中線剪開頸部皮膚,分離雙側(cè)頸總動脈。用小動脈夾夾閉雙側(cè)頸總動脈30分鐘后,松開雙側(cè)小動脈夾再灌注60分鐘,縫合頸部皮膚。其他組麻醉后頸部切開,分離雙側(cè)頸總動脈,不夾閉。

      1.3.2 分組及給藥 50只大鼠隨機分成5組。即假手術組、缺血再灌注組、硒組、川芎嗪組、硒加川芎嗪組。1)假手術組:只繞頸總動脈穿線,不結(jié)扎。2)缺血再灌注組:術后4周生理鹽水灌胃處理。3)硒組、川芎嗪組、硒加川芎嗪組:術后4周分別以亞硒酸鈉生理鹽水溶液0.625mL/100g、川芎嗪注射液1.25mL/100g、硒與川芎嗪配伍液1.875mL/100g灌胃處理。

      1.3.3 指標檢測 抗凝頸總動脈血以3000r/min離心10分鐘,取上清液分別測定GSH-Px、MDA和SOD含量。測定時按照試劑盒說明書嚴格操作。

      2 結(jié)果

      缺血再灌注組與假手術組相比,MDA含量明顯高于假手術組(P<0.05),SOD、GSH-Px含量明顯低于假手術組(P<0.05)。硒組、川芎嗪組、硒加川芎嗪組與缺血再灌注組相比,MDA含量明顯低于缺血再灌注組(P<0.05),SOD、GSH-Px含量明顯高于缺血再灌注組(P<0.05)。硒加川芎嗪組分別與硒組、川芎嗪組相比,MDA含量低于硒組、川芎嗪組(P<0.05),SOD、GSH-Px含量高于硒組、川芎嗪組(P<0.05)。見表1。

      表1 硒與川芎嗪配伍對大鼠腦缺血再灌注損傷血漿中SOD、GSH-Px、MDA含量()

      表1 硒與川芎嗪配伍對大鼠腦缺血再灌注損傷血漿中SOD、GSH-Px、MDA含量()

      注:缺血再灌注組與假手術組比較,*P<0.05;硒組、川芎嗪組、硒加川芎嗪組與缺血再灌注組比較,#P<0.05。硒加川芎嗪組分別與硒組、川芎嗪組比較,△P<0.05。

      3 討論

      大量自由基產(chǎn)生及其導致的質(zhì)膜、細胞器膜脂質(zhì)過氧化反應是腦缺血再灌注損傷的重要致病機制[4]。有效地自由基清除對腦缺血再灌注損傷可以起到重要的保護作用[5]。

      MDA是體內(nèi)重要的氧自由基代謝產(chǎn)物,能較好地反應組織過氧化程度。其含量是反映機體抗氧化潛在能力的重要參數(shù),可以反應機體脂質(zhì)過氧化速率和強度,也能間接反映組織過氧化損傷程度。缺氧可使腦組織生成大量氧自由基,氧自由基作用于細胞膜上的不飽和脂肪酸使膜脂質(zhì)產(chǎn)生過氧化反應,進而導致細胞的損傷,并形成脂質(zhì)過氧化物。本實驗中,硒與川芎嗪配伍能顯著降低大鼠腦缺血再灌注損傷時MDA含量,從而減少脂質(zhì)過氧化反應。

      SOD能專一性清除體內(nèi)有害自由基,解除因自由基氧化體內(nèi)某些組成成分而造成的機體損害。正常細胞內(nèi)有自由基清除劑SOD,使氧自由基轉(zhuǎn)變?yōu)檫^氧化氫,后者又通過觸酶及GSH-Px的作用還原為水和分子氧,故小量氧自由基并不造成損傷。再灌注時產(chǎn)生了大量的氧自由基,造成內(nèi)源性自由基清除系統(tǒng)活性降低[6]。GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸,其活力大小可以反映機體硒水平。硒是GSH-Px酶系的組成成分,它能催化GSH變?yōu)镚SSG,使有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物,從而保護細胞膜的結(jié)構及功能不受過氧化物的干擾及損害。本實驗中,硒組、川芎嗪組、硒加川芎嗪組均能能明顯增加缺血再灌注組血漿中SOD和GSH-Px的含量,而硒加川芎嗪組比硒組、川芎嗪組增加血漿中SOD和GSH-Px的含量更為明顯。

      實驗結(jié)果表明,硒與川芎嗪配伍能明顯抑制腦缺血組織中SoD、GSH的降低以及MDA的增高。硒與川芎嗪聯(lián)合用藥比單獨用藥更能增強缺血腦組織清除氧自由基的能力。

      [1]學海,楊永舉,曹奕豐,等.干預前后腦血管血液動力學指標對比分析[J].中國公共衛(wèi)生,2003,19(6):664

      [2]孟慶年.川芎嗪注射液加補陽還五湯治療急性腦梗塞38例[J].中西醫(yī)結(jié)合實用臨床急救,1999,6(1):12.

      [3]汪遠金,申國明,王欽茂.川芎嗪對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用[J].安徽中醫(yī)學院學報,2000,19(1):44

      [4]陳玉敏,陳濤平,馮浩樓.腦缺血再灌注損傷機制與治療現(xiàn)狀[J].醫(yī)學研究與教育,2012,29(6):47

      [5]劉忠民,李向群,何麗婭,等.自由基在大鼠腦缺血再灌注損傷時的作用及藥物防護[J].數(shù)理醫(yī)藥學雜志,1997,10(4):347

      [6]Dimagl U,Lindauer U,Them A.Global cerebral ischemiain the rat:online monitoring of oxygen free radical productionusing chemiluminescence in vivo[J].J Cereb Blood Flow Metab,1995,15(6):925

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