徐華強，薛 明，趙海朋，劉艷艷

(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院，山東泰安 271018)

赤眼蜂Trichogramma spp.是目前國內(nèi)外人工繁育和利用最成功的害蟲天敵之一，并在防治農(nóng)林害蟲中廣泛使用。赤眼蜂在全國各地均有分布，可寄生鱗翅目、雙翅目、鞘翅目、廣翅目、脈翅目、膜翅目和半翅目等64種農(nóng)業(yè)和林業(yè)害蟲(顧金金，2013)。目前，赤眼蜂商品化生產(chǎn)已經(jīng)成為發(fā)展趨勢，其廣闊的應(yīng)用前景必將為我國的農(nóng)產(chǎn)品安全生產(chǎn)做出巨大貢獻(向玉勇等，2011)。

殺菌劑嘧菌酯是一類作用機制獨特、極具發(fā)展?jié)摿褪袌龌盍Φ男滦娃r(nóng)用殺菌劑(劉長令等，2002;程根武等，2005)，對四大類致病真菌:子囊菌(如白粉病)、擔子菌(如銹病)、半知菌(如早疫病)和卵菌(如霜霉病)均有效(康立娟等，2004)。因嘧菌酯高效且使用范圍廣，已在100 多個國家登記，用于超過120種農(nóng)作物如谷物、水稻、花生，應(yīng)對如霜霉病和銹病等真菌病害(王麗等，2008)。隨著環(huán)保觀念的加強和可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略的實施，高效、低毒、高活性、低殘留已成為農(nóng)藥發(fā)展的必然趨勢(孫天山等，2013)。為了提高嘧菌酯防病效果，降低使用成本，延緩病原菌抗藥性的產(chǎn)生，延長內(nèi)吸性殺菌劑品種的使用壽命，嘧菌酯與其他藥劑的混配已成為發(fā)展趨勢(陳瑾等，2013)。至2013年3月，國內(nèi)有大量廠家進行了嘧菌酯復(fù)配產(chǎn)品的生產(chǎn)與推廣(華乃震，2013)。

在植物病蟲害綜合防治過程中，殺菌劑在防治植物病害的過程中也可能會殺傷天敵，降低天敵的自然控害作用(陳建明等，1999)。如何協(xié)調(diào)化學(xué)防治和生物防治的關(guān)系一直是害蟲綜合治理中需要解決的關(guān)鍵問題，因此明確化學(xué)藥劑對天敵昆蟲的毒性對指導(dǎo)田間合理用藥、保護天敵具有重要的意義(王彥華等，2012)。以往有關(guān)殺蟲劑對赤眼蜂安全性的研究多有報道，但殺菌劑對赤眼蜂的研究較少，如研究發(fā)現(xiàn)三唑酮對玉米螟赤眼蜂和松毛蟲赤眼蜂均是高風(fēng)險性，咪酰胺對玉米螟赤眼蜂是高風(fēng)險，肟菌酯和申嗪霉素對玉米螟赤眼蜂和松毛蟲赤眼蜂均是安全的(金嘯等，2011)，其他的研究表明:氟嗎啉和烯肟菌酯對松毛蟲赤眼蜂毒性為“低毒”。啶菌惡唑?qū)λ擅x赤眼蜂的急性接觸毒性為“中毒”(李肇麗等，2009)。醚菌酯、福美雙、助壯素水劑不影響短管赤眼蜂的寄生率，但對F1 代的成蜂有影響(Bastos et al.，2006)，而現(xiàn)階段只有相關(guān)殺蟲劑的混配制劑對蜜蜂(王成菊等，2006;何志偉等，2012)、家蠶(石緒根等，2009)以及其他害蟲(曾益良等，2002;韓先國等，2006)的毒性評價，殺菌劑的混配制劑對赤眼蜂的影響并無報道。

本研究采用管測藥膜法(中華人民共和國環(huán)保部，1990)測定了嘧菌酯等殺菌劑及其混配制劑對玉米螟赤眼蜂的毒性，并進行安全性評價，不僅為新農(nóng)藥登記提供依據(jù)，也為嘧菌酯等殺菌劑及其混配制劑的合理使用和赤眼蜂的保護以及協(xié)調(diào)生物防治和化學(xué)防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

見表1。

1.2 供試昆蟲

供試赤眼蜂為玉米螟赤眼蜂Trichogramma ostriniae Pang et Chen，購于河北省農(nóng)科院衡水旱作物研究所，用麥蛾卵繁蜂。溫度27±1 ℃、濕度60%-80%的條件下培養(yǎng)。

1.3 試驗方法

參照國家環(huán)境保護局頒布的《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則》(中華人民共和國環(huán)保部，1990)，采用管測藥膜法，在預(yù)試試驗確定的濃度范圍內(nèi)，設(shè)置5個試驗濃度，以丙酮處理做空白對照。選擇54.6 cm2指形管，每管加入0.500 mL丙酮藥液，滾動指形管制備藥膜，對照管內(nèi)只加丙酮。每指形管接入100±10 頭成蜂，每個濃度組重復(fù)3 次。讓其在藥膜管中爬行1 h 后，轉(zhuǎn)入到無藥管中，并飼喂10%蜂蜜水，用黑布封緊管口。處理和對照同時進行，放入溫度26±1 ℃，濕度60%-80%的培養(yǎng)箱中。于藥劑處理后24 h 檢查并記錄管中存活和死亡的成蜂數(shù)量(日光照射下輕敲試管不動即為死亡蜂)。試驗用赤眼蜂空白對照組死亡率不超過10%。

表1 供試藥劑Table 1 Selected fungicides

1.4 安全性等級劃分方法

安全系數(shù)計算公式:安全系數(shù)=LR50(a.i.mg/cm2)÷田間推薦施用劑量(a.i.mg/cm2)。

依據(jù)中華人民共和國國家環(huán)境保護總局《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準則》(中華人民共和國環(huán)保部，1990)，農(nóng)藥對赤眼蜂成蜂的風(fēng)險性分級標準按安全系數(shù)的大小劃分為四個等級:安全系數(shù)＞5 為低風(fēng)險性，0.5＜安全系數(shù)≤5 為中等風(fēng)險性，0.05＜安全系數(shù)≤0.5 為高風(fēng)險性，安全系數(shù)≤0.05 為極高風(fēng)險性。

1.5 數(shù)據(jù)分析

所有試驗數(shù)據(jù)均由SPSS16.0 統(tǒng)計軟件進行處理，計算各藥劑對玉米螟赤眼蜂24 h 的毒力回歸方程、半致死劑量值(LR50)和95%置信限。

2 結(jié)果與分析

2.1 嘧菌酯等殺菌劑及其混配制劑對玉米螟赤眼蜂的毒性

由表2 可以看出，不同殺菌劑對玉米螟赤眼蜂的毒性不同。嘧菌酯對玉米螟赤眼蜂的毒性最高，LR50是1.31×10-4a.i.mg/cm2，其次為百菌清，LR50是9.59×10-4a.i.mg/cm2;丙環(huán)唑、苯醚甲環(huán)唑和己唑醇對玉米螟赤眼蜂的毒性較低，LR50分別是2.34×10-3、4.83×10-3和2.60×10-3a.i.mg/cm2;戊唑醇和烯酰嗎啉的毒性最低，未對玉米螟赤眼蜂造成傷害。

由表3 可以看出，只有嘧菌酯·百菌清和嘧菌酯·己唑醇對玉米螟赤眼蜂傷害較大，LR50分別是1.85×10-3和8.96×10-4a.i.mg/cm2，毒性較高;嘧菌酯·烯酰嗎啉和嘧菌酯·苯醚甲環(huán)唑?qū)τ衩酌嘌鄯涞腖R50分別是3.17×10-3和1.65×10-2a.i.mg/cm2，較前者毒性降低。嘧菌酯·丙環(huán)唑和嘧菌酯·戊唑醇均對玉米螟赤眼蜂毒性較小。所有的混配制劑的毒性均低于嘧菌酯的毒性，毒力指數(shù)最小的為嘧菌酯·己唑醇(6.82)，毒力指數(shù)最大的為嘧菌酯·丙環(huán)唑(＞350)。

表2 殺菌劑單劑對玉米螟赤眼蜂的毒性Table 2 Toxicity of selected fungicides to Trichogramma ostriniae

表3 嘧菌酯及其混配制劑對玉米螟赤眼蜂的毒性Table 3 Toxicity of Azoxystrobin andit，s mixtures to Trichogramma ostriniae

2.2 嘧菌酯等殺菌劑及其混配制劑對玉米螟赤眼蜂的安全性評價

本研究中幾種殺菌劑及其混配制劑對玉米螟赤眼蜂的風(fēng)險性評價結(jié)果詳見表4。由表4 可以看出，在供試殺菌劑單劑中，以嘧菌酯和百菌清對玉米螟赤眼蜂的危害較大，安全系數(shù)分別為0.0728 和0.0697，安全性評價為高風(fēng)險性藥劑;丙環(huán)唑、苯醚甲環(huán)唑和己唑醇為中等風(fēng)險性藥劑;戊唑醇和烯酰嗎啉對玉米螟赤眼蜂為低風(fēng)險性。在混配殺菌劑中，以嘧菌酯·百菌清的安全性系數(shù)最小(0.22)，安全性評價為高風(fēng)險性藥劑，其次為嘧菌酯·己唑醇，安全系數(shù)為0.452，也是高風(fēng)險性藥劑;嘧菌酯·烯酰嗎啉的安全性系數(shù)較前兩者大，為1.81，風(fēng)險性評價為中等風(fēng)險性藥劑;嘧菌酯·苯醚甲環(huán)唑、嘧菌酯·戊唑醇和嘧菌酯·丙環(huán)唑?qū)τ衩酌嘌鄯渚踩?，安全性評價為低風(fēng)險性藥劑。

表4 殺菌劑及其混配制劑對玉米螟赤眼蜂成蜂的安全性評價Table 4 Risk evaluation of fungicides and it's mixtures against Trichogramma ostriniae(adult)

3 結(jié)論與討論

本研究的結(jié)果表明:不同的殺菌劑對赤眼蜂有不同的毒性。在供試殺菌劑單劑中，嘧菌酯對玉米螟赤眼蜂的毒性是最高的，LR50是1.31×10-4a.i.mg/cm2。其他殺菌劑單劑毒性由大到小分別是百菌清、丙環(huán)唑、己唑醇、苯醚甲環(huán)唑、戊唑醇和烯酰嗎啉，其中百菌清的毒性也是較高的，屬于高風(fēng)險性藥劑，丙環(huán)唑、己唑醇和苯醚甲環(huán)唑的毒性較低，屬于中等風(fēng)險性藥劑，戊唑醇和烯酰嗎啉的毒性最低，屬于低風(fēng)險藥劑。因此，殺菌劑中存在對赤眼蜂高毒的藥劑。之前的報道也證明了殺菌劑對赤眼蜂的不安全性(Bastos et al.，2006;李肇麗等，2009;金嘯等，2011)，與前人的研究結(jié)果相似。也有研究發(fā)現(xiàn)，嘧菌酯對短管赤眼蜂安全，沒有不利影響(Bueno et al.，2008)，與本試驗的結(jié)果存在差異，分析原因，可能與不同的赤眼蜂蜂種有關(guān)。在殺菌劑混配制劑中，以嘧菌酯·己唑醇對赤眼蜂的毒性最高，LR50是8.96×10-4a.i.mg/cm2，其次為嘧菌酯·百菌清，這兩種殺菌劑均屬于高風(fēng)險性藥劑。嘧菌酯·烯酰嗎啉的毒性較前兩者的毒性低，安全性評價為中等風(fēng)險性。嘧菌酯·苯醚甲環(huán)唑、嘧菌酯·戊唑醇和嘧菌酯·丙環(huán)唑的毒性都比較低，風(fēng)險性評價為低風(fēng)險性。因此，殺菌劑中存在對赤眼蜂安全的藥劑，如戊唑醇、烯酰嗎啉，同時也存在對赤眼蜂高毒的藥劑，如嘧菌酯、百菌清，且殺菌劑的混配制劑對赤眼蜂也不安全，如嘧菌酯·百菌清和嘧菌酯·己唑醇。

王成菊等(2006)研究了阿維菌素及其混配制劑對蜜蜂的毒性，發(fā)現(xiàn)與阿維菌素混配的殺蟲劑自身對混劑毒性有影響。本試驗的結(jié)果可以看出，與嘧菌酯混配的殺菌劑自身對混劑毒性的大小也是有影響的。嘧菌酯單劑對玉米螟赤眼蜂為高毒，且為所有供試殺菌劑中毒性最高的藥劑?；炫渲苿┑亩拘远急揉拙蝿┑亩拘缘停遗c嘧菌酯混配的殺菌劑不同，混配制劑毒性的降低程度不同，如嘧菌酯·烯酰嗎啉和嘧菌酯·丙環(huán)唑相比，烯酰嗎啉單劑的毒性較低，丙環(huán)唑單劑的毒性較高，兩者與嘧菌酯混配，混配制劑的毒性都降低，但是嘧菌酯·烯酰嗎啉的毒性降低的程度較小，嘧菌酯·丙環(huán)唑的毒性降低的程度較大。其次，混配制劑的毒性也可能與劑型有關(guān)，嘧菌酯·烯酰嗎啉是水分散粒劑，而嘧菌酯·丙環(huán)唑則是懸浮劑。水分散粒劑是在可濕性粉劑和懸浮劑的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新劑型，它具有分散性好，懸浮率高、穩(wěn)定性好、使用方便等特點，避開了可濕性粉劑產(chǎn)生粉塵，懸浮劑包裝運輸不便，貯藏易產(chǎn)生沉淀、結(jié)塊、流動性差、粘壁等缺點(路福綏2000;華乃震2006)。因此，在本文中，前者的毒性高于后者的毒性。殺菌劑的混配引起了混配制劑毒性的升高或者降低，殺菌劑的混配制劑對赤眼蜂也存在著高毒的藥劑，如嘧菌酯·百菌清，在使用過程中，應(yīng)避免其與赤眼蜂接觸。

本試驗通過管測藥膜法測定了嘧菌酯等殺菌劑及其混配制劑對赤眼蜂的毒性，并且與農(nóng)藥的大田推薦劑量比較，對農(nóng)藥的安全性進行了評價。由于農(nóng)藥的性質(zhì)和田間應(yīng)用時受外界環(huán)境條件如:溫度、濕度、光照、作物和用藥方法等多種因素的影響(朱九生等，2009)，試驗的評價結(jié)果與田間的實際情況會存在一定差異，所以管測藥膜法的測定結(jié)果只能作為農(nóng)藥對赤眼蜂毒性的一個參考，但是，在大田釋放赤眼蜂時，應(yīng)盡量避開高風(fēng)險藥劑的施藥期，協(xié)調(diào)化學(xué)防治與生物防治。

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