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      大鯢感染虹彩病毒的診斷和治療

      2014-12-20 21:08賈秋紅
      河北漁業(yè) 2014年12期
      關(guān)鍵詞:診斷防治

      賈秋紅

      摘 要:2013年7月,陜西省漢中某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生以大鯢體表和四肢多處潰爛并伴有出血為特征的疾病,染病大鯢大量死亡。經(jīng)臨床觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),最后確診病原為大鯢虹彩病毒。通過(guò)采取綜合防治措施,養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢疫情得到有效控制。

      關(guān)鍵詞:大鯢虹彩病毒;診斷;防治

      大鯢(Andrias davidianus),俗稱娃娃魚,屬兩棲綱有尾目隱鰓鯢科,是我國(guó)特有的珍稀有尾兩棲動(dòng)物,為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物,有很重要的科研價(jià)值及藥用和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。近年來(lái),隨著大鯢人工養(yǎng)殖不斷發(fā)展,各種疾病也不斷暴發(fā),尤其是病毒性疾病,給養(yǎng)殖戶造成慘重的經(jīng)濟(jì)損失。2013年7月,陜西省商洛市洛南縣某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生了以大鯢體表和四肢多處潰爛、充血及出血為特征的疾病,經(jīng)過(guò)臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),診斷病原為大鯢虹彩病毒。現(xiàn)將診治結(jié)果報(bào)道如下。

      1 基本情況及臨床癥狀

      2013年7月,陜西省商洛某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢突發(fā)異常,行動(dòng)緩慢,攝食減少,前、后肢嚴(yán)重腫脹、潰爛且局部出血,采用肌肉注射青霉素和慶大霉素、頭孢噻吩以及中藥浸泡等治療措施均無(wú)效,并在治療過(guò)程中陸續(xù)死亡,且隨著時(shí)間的推移,死亡數(shù)量越來(lái)越大。

      2 病理剖檢

      對(duì)病死大鯢進(jìn)行病理剖檢,其結(jié)果如下:病死大鯢頭部、前、后肢、尾部嚴(yán)重潰爛、腫脹,頸部、腹部、下頜均有大量出血點(diǎn),腹腔內(nèi)有淡黃色的積水,肝臟腫大且松軟無(wú)彈性,膽囊充盈,脾臟、腎臟腫大有白點(diǎn)。

      3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

      3.1 患病大鯢虹彩病毒的細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè)

      取病死大鯢的肝、腎組織各0.5 g于研磨器中加入2 mL無(wú)菌水在低溫下研磨制成懸液,轉(zhuǎn)移至15 mL離心管,放入-80 ℃反復(fù)凍融3次,然后轉(zhuǎn)移至1.5 mL離心管中,12 000 r/min離心5 min,取上清液作為病毒提取液備用。取一瓶已培養(yǎng)了48 h的EPC細(xì)胞,棄去培養(yǎng)液,吸取0.2 mL病毒提取液接種到此培養(yǎng)瓶中,吸附1 h,加入含2%胎牛血清的MEM培養(yǎng)液于25 ℃培養(yǎng),同時(shí)做空白對(duì)照,24 h有CPE反應(yīng),72 h后CPE反應(yīng)強(qiáng)烈,細(xì)胞已完全脫落,確定患病大鯢為病毒感染,見圖1和圖2。

      3.2 患病大鯢虹彩病毒的PCR檢測(cè)

      取前面已經(jīng)制備的病毒提取液和陽(yáng)性對(duì)照病毒株(陽(yáng)性對(duì)照病毒株選用本實(shí)驗(yàn)室分離的大鯢虹彩病毒(Chinese giant salamander iridovirus,CGSIV))。按照病毒DNA小劑量抽提試劑盒的說(shuō)明書提取組織和細(xì)胞分離病毒的DNA。

      根據(jù)GenBank已發(fā)表的蛙病毒屬的代表種FV3主衣殼蛋白(MCP)基因高度保守區(qū)序列(登錄號(hào):AY548484)設(shè)計(jì)引物用于檢測(cè),引物由寶生物工程(大連)有限公司合成。序列如下:

      CGS-T-F:5′-GACTTGGCCACTTATGAC-3′;

      CGS-T-R:5′-GTCTCTGGAGAAGAAGAA-3′;

      總體積為25 μL的反應(yīng)體系為:0.25 μL TaKaRa Ex Taq(5U/μL),2.5 μL 10×Ex Taq Buffer(Mg2+ Plus),0.25 nmol/L dNTPs 1 μL,引物 (50 pmol/L)各0.5 μL,DNA模板3 μL,反應(yīng)條件為:95 ℃預(yù)處理3 min,進(jìn)行30個(gè)循環(huán),每個(gè)循環(huán)反應(yīng)包括 95 ℃ 30 s,52 ℃ 30 s,72 ℃ 1.5 min,循環(huán)完成后,72 ℃充分延伸10 min。

      PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%的瓊脂糖凝膠電泳,用Gene-Genius凝膠成像系統(tǒng)拍照,病鯢病毒提取液檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性,確定患病大鯢為虹彩病毒(CGSIV)感染,見圖3。

      經(jīng)過(guò)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生的以大鯢體表和四肢腫大、多處潰爛、充血、出血為特征的疾病,診斷為大鯢虹彩病毒(CGSIV)感染的病毒病。

      1:標(biāo)準(zhǔn)病毒擴(kuò)增結(jié)果;2:陰性對(duì)照;3:病鯢病毒提取液擴(kuò)增結(jié)果。4 診斷結(jié)果圖3 結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)病毒株P(guān)CR檢測(cè)對(duì)比

      5 防治措施

      確診后,將患病大鯢與健康大鯢進(jìn)行嚴(yán)格隔離,對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)殖水體及養(yǎng)殖用具等用聚維酮碘和高錳酸鉀徹底消毒。對(duì)餌料魚用高錳酸鉀進(jìn)行浸泡,對(duì)未患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗0.2 mL/kg,每隔2周注射一次,連續(xù)注射3次。對(duì)患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗,注射量為0.2 mL/kg·次,每隔2周注射一次,連續(xù)注射3次,期間再注射我們自制的中西藥結(jié)合的抗病毒藥物,注射量為2 mL/kg·次,連續(xù)注射三天。用藥一周后死亡數(shù)量逐漸減少。兩周后,已無(wú)死亡現(xiàn)象,發(fā)病的大鯢部分開始攝食,疫情得到了有效的遏制。

      6 討論

      該養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢被確診為大鯢虹彩病毒感染,大鯢虹彩病毒(CGS1V)是虹彩病毒科Iridoviridae蛙病毒屬Ranavirus中的一種,為雙鏈DNA 病毒,其感染率和死亡率都很高;一旦發(fā)病,只能通過(guò)注射一些增強(qiáng)免疫和消炎的藥物,治標(biāo)不治本,往往會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)巨大的損失。要想遏制病毒病的發(fā)生最有效的方法是提前注射疫苗。目前我們已經(jīng)研制成功針對(duì)大鯢虹彩病毒的滅活疫苗。通過(guò)注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗,可以有效預(yù)防大鯢虹彩病毒病的發(fā)生,降低養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。

      在對(duì)該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病大鯢進(jìn)行病毒檢測(cè)時(shí),我們選用的檢測(cè)方法有細(xì)胞擴(kuò)增和PCR檢測(cè)兩種。通過(guò)細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè),即使很微量的病毒量也可以檢測(cè)出,但此方法只能確定是病毒感染而不能確定是那種病毒感染,而PCR檢測(cè)方法通過(guò)與已知標(biāo)準(zhǔn)病毒進(jìn)行對(duì)照,可以確定感染病毒的具體種類,但此方法由于檢測(cè)過(guò)程較為繁瑣,常會(huì)出現(xiàn)“假陽(yáng)性”或“假陰性”結(jié)果。通過(guò)兩種方法的結(jié)合使用,揚(yáng)長(zhǎng)辟短可以大大提高檢測(cè)虹彩病毒的準(zhǔn)確性。

      摘 要:2013年7月,陜西省漢中某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生以大鯢體表和四肢多處潰爛并伴有出血為特征的疾病,染病大鯢大量死亡。經(jīng)臨床觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),最后確診病原為大鯢虹彩病毒。通過(guò)采取綜合防治措施,養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢疫情得到有效控制。

      關(guān)鍵詞:大鯢虹彩病毒;診斷;防治

      大鯢(Andrias davidianus),俗稱娃娃魚,屬兩棲綱有尾目隱鰓鯢科,是我國(guó)特有的珍稀有尾兩棲動(dòng)物,為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物,有很重要的科研價(jià)值及藥用和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。近年來(lái),隨著大鯢人工養(yǎng)殖不斷發(fā)展,各種疾病也不斷暴發(fā),尤其是病毒性疾病,給養(yǎng)殖戶造成慘重的經(jīng)濟(jì)損失。2013年7月,陜西省商洛市洛南縣某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生了以大鯢體表和四肢多處潰爛、充血及出血為特征的疾病,經(jīng)過(guò)臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),診斷病原為大鯢虹彩病毒?,F(xiàn)將診治結(jié)果報(bào)道如下。

      1 基本情況及臨床癥狀

      2013年7月,陜西省商洛某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢突發(fā)異常,行動(dòng)緩慢,攝食減少,前、后肢嚴(yán)重腫脹、潰爛且局部出血,采用肌肉注射青霉素和慶大霉素、頭孢噻吩以及中藥浸泡等治療措施均無(wú)效,并在治療過(guò)程中陸續(xù)死亡,且隨著時(shí)間的推移,死亡數(shù)量越來(lái)越大。

      2 病理剖檢

      對(duì)病死大鯢進(jìn)行病理剖檢,其結(jié)果如下:病死大鯢頭部、前、后肢、尾部嚴(yán)重潰爛、腫脹,頸部、腹部、下頜均有大量出血點(diǎn),腹腔內(nèi)有淡黃色的積水,肝臟腫大且松軟無(wú)彈性,膽囊充盈,脾臟、腎臟腫大有白點(diǎn)。

      3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

      3.1 患病大鯢虹彩病毒的細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè)

      取病死大鯢的肝、腎組織各0.5 g于研磨器中加入2 mL無(wú)菌水在低溫下研磨制成懸液,轉(zhuǎn)移至15 mL離心管,放入-80 ℃反復(fù)凍融3次,然后轉(zhuǎn)移至1.5 mL離心管中,12 000 r/min離心5 min,取上清液作為病毒提取液備用。取一瓶已培養(yǎng)了48 h的EPC細(xì)胞,棄去培養(yǎng)液,吸取0.2 mL病毒提取液接種到此培養(yǎng)瓶中,吸附1 h,加入含2%胎牛血清的MEM培養(yǎng)液于25 ℃培養(yǎng),同時(shí)做空白對(duì)照,24 h有CPE反應(yīng),72 h后CPE反應(yīng)強(qiáng)烈,細(xì)胞已完全脫落,確定患病大鯢為病毒感染,見圖1和圖2。

      3.2 患病大鯢虹彩病毒的PCR檢測(cè)

      取前面已經(jīng)制備的病毒提取液和陽(yáng)性對(duì)照病毒株(陽(yáng)性對(duì)照病毒株選用本實(shí)驗(yàn)室分離的大鯢虹彩病毒(Chinese giant salamander iridovirus,CGSIV))。按照病毒DNA小劑量抽提試劑盒的說(shuō)明書提取組織和細(xì)胞分離病毒的DNA。

      根據(jù)GenBank已發(fā)表的蛙病毒屬的代表種FV3主衣殼蛋白(MCP)基因高度保守區(qū)序列(登錄號(hào):AY548484)設(shè)計(jì)引物用于檢測(cè),引物由寶生物工程(大連)有限公司合成。序列如下:

      CGS-T-F:5′-GACTTGGCCACTTATGAC-3′;

      CGS-T-R:5′-GTCTCTGGAGAAGAAGAA-3′;

      總體積為25 μL的反應(yīng)體系為:0.25 μL TaKaRa Ex Taq(5U/μL),2.5 μL 10×Ex Taq Buffer(Mg2+ Plus),0.25 nmol/L dNTPs 1 μL,引物 (50 pmol/L)各0.5 μL,DNA模板3 μL,反應(yīng)條件為:95 ℃預(yù)處理3 min,進(jìn)行30個(gè)循環(huán),每個(gè)循環(huán)反應(yīng)包括 95 ℃ 30 s,52 ℃ 30 s,72 ℃ 1.5 min,循環(huán)完成后,72 ℃充分延伸10 min。

      PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%的瓊脂糖凝膠電泳,用Gene-Genius凝膠成像系統(tǒng)拍照,病鯢病毒提取液檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性,確定患病大鯢為虹彩病毒(CGSIV)感染,見圖3。

      經(jīng)過(guò)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生的以大鯢體表和四肢腫大、多處潰爛、充血、出血為特征的疾病,診斷為大鯢虹彩病毒(CGSIV)感染的病毒病。

      1:標(biāo)準(zhǔn)病毒擴(kuò)增結(jié)果;2:陰性對(duì)照;3:病鯢病毒提取液擴(kuò)增結(jié)果。4 診斷結(jié)果圖3 結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)病毒株P(guān)CR檢測(cè)對(duì)比

      5 防治措施

      確診后,將患病大鯢與健康大鯢進(jìn)行嚴(yán)格隔離,對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)殖水體及養(yǎng)殖用具等用聚維酮碘和高錳酸鉀徹底消毒。對(duì)餌料魚用高錳酸鉀進(jìn)行浸泡,對(duì)未患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗0.2 mL/kg,每隔2周注射一次,連續(xù)注射3次。對(duì)患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗,注射量為0.2 mL/kg·次,每隔2周注射一次,連續(xù)注射3次,期間再注射我們自制的中西藥結(jié)合的抗病毒藥物,注射量為2 mL/kg·次,連續(xù)注射三天。用藥一周后死亡數(shù)量逐漸減少。兩周后,已無(wú)死亡現(xiàn)象,發(fā)病的大鯢部分開始攝食,疫情得到了有效的遏制。

      6 討論

      該養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢被確診為大鯢虹彩病毒感染,大鯢虹彩病毒(CGS1V)是虹彩病毒科Iridoviridae蛙病毒屬Ranavirus中的一種,為雙鏈DNA 病毒,其感染率和死亡率都很高;一旦發(fā)病,只能通過(guò)注射一些增強(qiáng)免疫和消炎的藥物,治標(biāo)不治本,往往會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)巨大的損失。要想遏制病毒病的發(fā)生最有效的方法是提前注射疫苗。目前我們已經(jīng)研制成功針對(duì)大鯢虹彩病毒的滅活疫苗。通過(guò)注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗,可以有效預(yù)防大鯢虹彩病毒病的發(fā)生,降低養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。

      在對(duì)該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病大鯢進(jìn)行病毒檢測(cè)時(shí),我們選用的檢測(cè)方法有細(xì)胞擴(kuò)增和PCR檢測(cè)兩種。通過(guò)細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè),即使很微量的病毒量也可以檢測(cè)出,但此方法只能確定是病毒感染而不能確定是那種病毒感染,而PCR檢測(cè)方法通過(guò)與已知標(biāo)準(zhǔn)病毒進(jìn)行對(duì)照,可以確定感染病毒的具體種類,但此方法由于檢測(cè)過(guò)程較為繁瑣,常會(huì)出現(xiàn)“假陽(yáng)性”或“假陰性”結(jié)果。通過(guò)兩種方法的結(jié)合使用,揚(yáng)長(zhǎng)辟短可以大大提高檢測(cè)虹彩病毒的準(zhǔn)確性。

      摘 要:2013年7月,陜西省漢中某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生以大鯢體表和四肢多處潰爛并伴有出血為特征的疾病,染病大鯢大量死亡。經(jīng)臨床觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),最后確診病原為大鯢虹彩病毒。通過(guò)采取綜合防治措施,養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢疫情得到有效控制。

      關(guān)鍵詞:大鯢虹彩病毒;診斷;防治

      大鯢(Andrias davidianus),俗稱娃娃魚,屬兩棲綱有尾目隱鰓鯢科,是我國(guó)特有的珍稀有尾兩棲動(dòng)物,為國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物,有很重要的科研價(jià)值及藥用和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。近年來(lái),隨著大鯢人工養(yǎng)殖不斷發(fā)展,各種疾病也不斷暴發(fā),尤其是病毒性疾病,給養(yǎng)殖戶造成慘重的經(jīng)濟(jì)損失。2013年7月,陜西省商洛市洛南縣某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生了以大鯢體表和四肢多處潰爛、充血及出血為特征的疾病,經(jīng)過(guò)臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),診斷病原為大鯢虹彩病毒?,F(xiàn)將診治結(jié)果報(bào)道如下。

      1 基本情況及臨床癥狀

      2013年7月,陜西省商洛某大鯢養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢突發(fā)異常,行動(dòng)緩慢,攝食減少,前、后肢嚴(yán)重腫脹、潰爛且局部出血,采用肌肉注射青霉素和慶大霉素、頭孢噻吩以及中藥浸泡等治療措施均無(wú)效,并在治療過(guò)程中陸續(xù)死亡,且隨著時(shí)間的推移,死亡數(shù)量越來(lái)越大。

      2 病理剖檢

      對(duì)病死大鯢進(jìn)行病理剖檢,其結(jié)果如下:病死大鯢頭部、前、后肢、尾部嚴(yán)重潰爛、腫脹,頸部、腹部、下頜均有大量出血點(diǎn),腹腔內(nèi)有淡黃色的積水,肝臟腫大且松軟無(wú)彈性,膽囊充盈,脾臟、腎臟腫大有白點(diǎn)。

      3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

      3.1 患病大鯢虹彩病毒的細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè)

      取病死大鯢的肝、腎組織各0.5 g于研磨器中加入2 mL無(wú)菌水在低溫下研磨制成懸液,轉(zhuǎn)移至15 mL離心管,放入-80 ℃反復(fù)凍融3次,然后轉(zhuǎn)移至1.5 mL離心管中,12 000 r/min離心5 min,取上清液作為病毒提取液備用。取一瓶已培養(yǎng)了48 h的EPC細(xì)胞,棄去培養(yǎng)液,吸取0.2 mL病毒提取液接種到此培養(yǎng)瓶中,吸附1 h,加入含2%胎牛血清的MEM培養(yǎng)液于25 ℃培養(yǎng),同時(shí)做空白對(duì)照,24 h有CPE反應(yīng),72 h后CPE反應(yīng)強(qiáng)烈,細(xì)胞已完全脫落,確定患病大鯢為病毒感染,見圖1和圖2。

      3.2 患病大鯢虹彩病毒的PCR檢測(cè)

      取前面已經(jīng)制備的病毒提取液和陽(yáng)性對(duì)照病毒株(陽(yáng)性對(duì)照病毒株選用本實(shí)驗(yàn)室分離的大鯢虹彩病毒(Chinese giant salamander iridovirus,CGSIV))。按照病毒DNA小劑量抽提試劑盒的說(shuō)明書提取組織和細(xì)胞分離病毒的DNA。

      根據(jù)GenBank已發(fā)表的蛙病毒屬的代表種FV3主衣殼蛋白(MCP)基因高度保守區(qū)序列(登錄號(hào):AY548484)設(shè)計(jì)引物用于檢測(cè),引物由寶生物工程(大連)有限公司合成。序列如下:

      CGS-T-F:5′-GACTTGGCCACTTATGAC-3′;

      CGS-T-R:5′-GTCTCTGGAGAAGAAGAA-3′;

      總體積為25 μL的反應(yīng)體系為:0.25 μL TaKaRa Ex Taq(5U/μL),2.5 μL 10×Ex Taq Buffer(Mg2+ Plus),0.25 nmol/L dNTPs 1 μL,引物 (50 pmol/L)各0.5 μL,DNA模板3 μL,反應(yīng)條件為:95 ℃預(yù)處理3 min,進(jìn)行30個(gè)循環(huán),每個(gè)循環(huán)反應(yīng)包括 95 ℃ 30 s,52 ℃ 30 s,72 ℃ 1.5 min,循環(huán)完成后,72 ℃充分延伸10 min。

      PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%的瓊脂糖凝膠電泳,用Gene-Genius凝膠成像系統(tǒng)拍照,病鯢病毒提取液檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性,確定患病大鯢為虹彩病毒(CGSIV)感染,見圖3。

      經(jīng)過(guò)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理解剖及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生的以大鯢體表和四肢腫大、多處潰爛、充血、出血為特征的疾病,診斷為大鯢虹彩病毒(CGSIV)感染的病毒病。

      1:標(biāo)準(zhǔn)病毒擴(kuò)增結(jié)果;2:陰性對(duì)照;3:病鯢病毒提取液擴(kuò)增結(jié)果。4 診斷結(jié)果圖3 結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)病毒株P(guān)CR檢測(cè)對(duì)比

      5 防治措施

      確診后,將患病大鯢與健康大鯢進(jìn)行嚴(yán)格隔離,對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)殖水體及養(yǎng)殖用具等用聚維酮碘和高錳酸鉀徹底消毒。對(duì)餌料魚用高錳酸鉀進(jìn)行浸泡,對(duì)未患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗0.2 mL/kg,每隔2周注射一次,連續(xù)注射3次。對(duì)患病大鯢注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗,注射量為0.2 mL/kg·次,每隔2周注射一次,連續(xù)注射3次,期間再注射我們自制的中西藥結(jié)合的抗病毒藥物,注射量為2 mL/kg·次,連續(xù)注射三天。用藥一周后死亡數(shù)量逐漸減少。兩周后,已無(wú)死亡現(xiàn)象,發(fā)病的大鯢部分開始攝食,疫情得到了有效的遏制。

      6 討論

      該養(yǎng)殖場(chǎng)大鯢被確診為大鯢虹彩病毒感染,大鯢虹彩病毒(CGS1V)是虹彩病毒科Iridoviridae蛙病毒屬Ranavirus中的一種,為雙鏈DNA 病毒,其感染率和死亡率都很高;一旦發(fā)病,只能通過(guò)注射一些增強(qiáng)免疫和消炎的藥物,治標(biāo)不治本,往往會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)巨大的損失。要想遏制病毒病的發(fā)生最有效的方法是提前注射疫苗。目前我們已經(jīng)研制成功針對(duì)大鯢虹彩病毒的滅活疫苗。通過(guò)注射大鯢虹彩病毒滅活疫苗,可以有效預(yù)防大鯢虹彩病毒病的發(fā)生,降低養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。

      在對(duì)該養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病大鯢進(jìn)行病毒檢測(cè)時(shí),我們選用的檢測(cè)方法有細(xì)胞擴(kuò)增和PCR檢測(cè)兩種。通過(guò)細(xì)胞擴(kuò)增檢測(cè),即使很微量的病毒量也可以檢測(cè)出,但此方法只能確定是病毒感染而不能確定是那種病毒感染,而PCR檢測(cè)方法通過(guò)與已知標(biāo)準(zhǔn)病毒進(jìn)行對(duì)照,可以確定感染病毒的具體種類,但此方法由于檢測(cè)過(guò)程較為繁瑣,常會(huì)出現(xiàn)“假陽(yáng)性”或“假陰性”結(jié)果。通過(guò)兩種方法的結(jié)合使用,揚(yáng)長(zhǎng)辟短可以大大提高檢測(cè)虹彩病毒的準(zhǔn)確性。

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