孫學(xué)亮+于宏+陳成勛+毛海濤+季延濱+邢克智+尤宏爭
摘 要:實驗測定了黃金鯽血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、過氧化氫酶(CAT)、堿性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總膽紅素(T-Bil)、直接膽紅素(D-Bil)。結(jié)果顯示:黃金鯽血清中丙二醛含量為(4.68±1.20)nmol/mL,血清堿性磷酸酶(24.54 ±0.485)nmol/L,血清酸性磷酸酶(1.40±0.138)U/L,血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(4.36±1.51)U/L,血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(45.39±29.29)U/L,血清總膽紅素(7.19±3.54)nmol/L,血清直接膽紅素(3.23±1.90)nmol/L,血清超氧化物歧化酶(82.57±1.69)U/L ,血清過氧化氫酶(10.28±3.62)U/mL。
關(guān)鍵詞:黃金鯽;血液;生化指標
黃金鯽屬鯉形目、鯉科、鯉亞科、鯉屬和鯽屬的鯉、鯽雜交種。黃金鯽是以散鱗鏡鯉為母本,以具有觀賞和食用價值于一體的紅鯽魚為父本進行雜交而獲得的優(yōu)勢雜交品種。其具有生長速度超快,耐低氧,抗病力強,耐低溫,耐長途運輸,飼料轉(zhuǎn)化率較高,肉味鮮美,營養(yǎng)價值高等特點。
血液是在動物體內(nèi)流動的一種組織,其是體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)的重要組成部分,主要功能是完成體內(nèi)的物質(zhì)運輸,其次還具有許多的生理調(diào)節(jié)和免疫等重要功能。國內(nèi)外許多研究者把血液指標作為評價魚類的健康、營養(yǎng)以及對環(huán)境適應(yīng)情況的重要指標,而且它也是重要的病理、生理及毒理學(xué)指標[1-4]。但國內(nèi)學(xué)者對于研究黃金鯽血液生化指標的變化情況尚未見報道?;谝陨锨闆r,本試驗通過研究黃金鯽血液生化指標的變化情況,并與其他魚類進行分析比較,這樣能夠使人們對于黃金鯽血液的生化特性具有更加充分的了解,進而希望能夠為黃金鯽的健康養(yǎng)殖和疾病防治等提供理論數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。
1 材料與方法
1.1 試驗魚
黃金鯽為同一批苗種,由寧河鑫三角河蟹養(yǎng)殖場提供。選擇健康體壯的黃金鯽,平均體重75.15 g±12.34 g,平均體長 12.56 cm±2.33 cm,共30 尾。在天津農(nóng)學(xué)院循環(huán)水養(yǎng)殖實驗室中暫養(yǎng),溫度25.5 ℃±0.5 ℃,pH 值7.0 ,溶氧5 mg/L以上。試驗前禁食24 h。
1.2 藥品
超氧化物歧化酶(SOD)測試盒、過氧化氫酶(CAT)測試盒、總膽紅素測試盒、直接膽紅素測試盒、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)測試盒、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)測試盒、丙二酮(MDA)測試盒、堿性磷酸酶(AKP)測試盒、酸性磷酸酶(ACP)測試盒均為南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒。
1.3 血清樣品
用未加肝素鈉的注射器從魚的尾柄處采集血液,將所采血液用低速離心機離心30 min(4 000 r/min,4 ℃),收集上清液,其即為血清樣品用于后續(xù)生化指標的測定。
1.4 數(shù)據(jù)處理
所有數(shù)據(jù)均用平均數(shù)±標準方差表示,用SPSS18.0軟件作t檢驗分析。
2 結(jié)果
根據(jù)上述試驗步驟對30尾黃金鯽血清的測定,結(jié)果如表1所示。
3 討論
動物血液的生化參數(shù)是動物機體健康狀況的主要指標,也是其疾病診斷和測定的依據(jù)之一,魚類血液生化指標雖然受諸多因素的影響,但仍然能夠反映該魚類的健康狀況和生理狀況,因此對魚類血液指標的研究具有重要意義。魚類血液的生化指標具有重要的應(yīng)用價值,根據(jù)其血液生化指標的變化情況,就能夠判斷魚體的生理變化情況,這對于魚類疾病的診斷和魚類生長環(huán)境的監(jiān)測具有重要意義。
3.1 超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、丙二醛(MDA)
SOD 是清除氧自由基發(fā)揮關(guān)鍵性作用的抗氧化物,同時又是高度誘導(dǎo)性酶,能催化不均衡 O2-產(chǎn)生 H2O2和 O2的酶,從而阻止 O2-在需氧生物物體內(nèi)聚積并阻斷其轉(zhuǎn)化為-OH 維持細胞內(nèi)的氧自由基處于低量無害狀態(tài)[5]。過氧化氫酶(CAT)能夠與超氧化物歧化酶(SOD)歧化O2-產(chǎn)生的過氧化氫(H2O2)發(fā)生發(fā)應(yīng),并促使其分解成水和分子氧,從而使細胞免受H2O2的傷害,是生物體的抗氧化防御系統(tǒng)中的關(guān)鍵酶之一[6]。MDA是一種過氧化脂質(zhì)降解的產(chǎn)物,已經(jīng)被用來反映機體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度的指示物[7]。MDA的高低可以反映出機體或組織的脂質(zhì)過氧化水平的高低,也能間接地反映出機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度[8]。機體細胞內(nèi)相關(guān)抗氧化酶活性的變化(升高或降低)能表明細胞內(nèi)活性氧的變化情況。不正常的活性氧含量都能夠嚴重影響生物體抗氧化防御系統(tǒng)的正常功能。結(jié)果表明,黃金鯽SOD、CAT活力處于正常范圍,且MDA含量較低。
3.2 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)
谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST) 在機體蛋白質(zhì)代謝中起重要作用并且是廣泛存在于動物線粒體中的重要的氨基酸轉(zhuǎn)氨酶。在魚體中,通常把ALT和AST的活性作為監(jiān)測水質(zhì)污染情況的重要指標。生物體在正常情況下,其血清中的轉(zhuǎn)氨酶活性值會比較小,但當生物體遭受病害使組織發(fā)生病變或者其受損傷范圍較大時,就可能會導(dǎo)致血清中ALT和AST含量升高或者活性突然性、持續(xù)性的增強。ALT和AST的含量是反映肝細胞受損程度最靈敏的生化指標之一,即使非常小的劑量變化,也能夠?qū)Ω蔚恼9δ茉斐善茐腫9]。黃金鯽AST活力小于長絲鱸[3]和加州鱸魚[10],高于斜帶石斑魚[11]和歐洲鰻鱺[12]。黃金鯽ALT活力均小于長絲鱸、加州鱸魚、斜帶石斑魚、歐洲鰻鱺。
3.3 酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)
對于高等動物來說,酸性磷酸酶是其體內(nèi)巨噬細胞中溶酶體的標志性酶,具有免疫防御和消化物質(zhì)的雙重作用,生物體細胞攻擊異物的主要機制之一就是ACP的水解作用,其主要分布于肝臟、腸胃和血液中。堿性磷酸酶是魚類溶酶體的重要組成部分,在機體免疫防御系統(tǒng)中發(fā)揮作用。但到目前為止,國內(nèi)外對于黃金鯽血液生化指標的研究資料較少,尤其是關(guān)于黃金鯽血清中酸性磷酸酶和堿性磷酸酶的正常值范圍還未見報道。
3.4 總膽紅素(T-Bli)、直接膽紅素(D-Bli)
血清膽紅素是體內(nèi)衰老紅細胞裂解而釋放出的血紅蛋白而產(chǎn)生的,膽紅素包括總膽紅素,直接膽紅素和間接膽紅素。前者是后二者之和。膽汁淤積引起的黃疸以直接膽紅素升高為主,肝臟疾病時膽紅素濃度明顯升高,這也反映出肝細胞受到了較嚴重的損害。膽汁淤積性黃疸時,由于直接膽紅素不能通過肝細胞和膽管排出,從而導(dǎo)致血清中直接膽紅素含量的明顯升高,且其在總膽紅素中所占比值也顯著升高;而發(fā)生肝細胞性黃疸時,由于同時還伴有肝細胞的攝取、結(jié)合以及排泄障礙,從而使血清直接膽紅素和總膽紅素之間比值升高。血清膽紅素的變化可以反應(yīng)魚體的健康情況。
本試驗結(jié)果能夠為黃金鯽的生態(tài)健康養(yǎng)殖技術(shù)提供理論基礎(chǔ),為黃金鯽疾病診治提供了新的思路。本研究既可以為以后黃金鯽各項生理機能的深入研究提供理論參考,還可以為黃金鯽的健康養(yǎng)殖、疾病防御等方面提供數(shù)據(jù)支持。
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3.4 總膽紅素(T-Bli)、直接膽紅素(D-Bli)
血清膽紅素是體內(nèi)衰老紅細胞裂解而釋放出的血紅蛋白而產(chǎn)生的,膽紅素包括總膽紅素,直接膽紅素和間接膽紅素。前者是后二者之和。膽汁淤積引起的黃疸以直接膽紅素升高為主,肝臟疾病時膽紅素濃度明顯升高,這也反映出肝細胞受到了較嚴重的損害。膽汁淤積性黃疸時,由于直接膽紅素不能通過肝細胞和膽管排出,從而導(dǎo)致血清中直接膽紅素含量的明顯升高,且其在總膽紅素中所占比值也顯著升高;而發(fā)生肝細胞性黃疸時,由于同時還伴有肝細胞的攝取、結(jié)合以及排泄障礙,從而使血清直接膽紅素和總膽紅素之間比值升高。血清膽紅素的變化可以反應(yīng)魚體的健康情況。
本試驗結(jié)果能夠為黃金鯽的生態(tài)健康養(yǎng)殖技術(shù)提供理論基礎(chǔ),為黃金鯽疾病診治提供了新的思路。本研究既可以為以后黃金鯽各項生理機能的深入研究提供理論參考,還可以為黃金鯽的健康養(yǎng)殖、疾病防御等方面提供數(shù)據(jù)支持。
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