張姍姍, 劉 和
(江南大學(xué) 環(huán)境與土木工程學(xué)院,江蘇 無錫 214122)
夏季室外光生物反應(yīng)器培養(yǎng)Chlorella sorokiniana
張姍姍, 劉 和*
(江南大學(xué) 環(huán)境與土木工程學(xué)院,江蘇 無錫 214122)
搭建了一個6 L容積曝氣型垂直柱光生物反應(yīng)器,在6—8月期間置于室外屋頂運行,旨在考察夏季室外培養(yǎng)微藻Chlorella sorokiniana的可行性。室外培養(yǎng)時,若pH超過8.5,微藻會出現(xiàn)明顯絮凝沉淀現(xiàn)象。太陽光入射到反應(yīng)器的高達(1 700±137)μmol/(m2·s)的光照強度帶來的光抑制作用及隨之引起的超過48℃的高溫,對微藻細胞的損傷造成了室外培養(yǎng)的抑制現(xiàn)象。當培養(yǎng)液溫度超過40℃時,Chlorella sorokiniana幾乎不能生長。在反應(yīng)器周圍放置金屬鍍層反射隔熱膜反射板,可以減少(42.21±4.7)%的光照強度,使培養(yǎng)液溫度下降2~4℃,但晴天時光照強度仍然可達900 μmol/(m2·s)以上,光抑制作用不能很好被解除。為實現(xiàn)微藻在室外反應(yīng)器中可持續(xù)地快速增長,仍需進一步采取措施減弱光照強度。
微藻;光生物反應(yīng)器;室外培養(yǎng);光照強度;溫度
近些年來,以可固定CO2的微藻為原料生產(chǎn)環(huán)境友好型第三代生物燃料的研發(fā)引起廣泛關(guān)注,目前大多數(shù)研究仍停留在實驗階段,其商業(yè)化生產(chǎn)面臨的最突出的瓶頸是培養(yǎng)成本過高[1]。Norsker等指出[2],約有7%~11%的微藻培養(yǎng)成本來自于化學(xué)藥品的使用,其中氮磷是微藻培養(yǎng)所需的主要化學(xué)藥品,占到80%~85%。大量研究表明,利用富含氮磷的廢水培養(yǎng)微藻不但可以減少微藻培養(yǎng)營養(yǎng)鹽投入,而且能在用生物法處理廢水的同時,生產(chǎn)可轉(zhuǎn)變?yōu)樯锶剂系奈⒃迳镔|(zhì)[3-4]。若在該生物處理法運行過程中,利用免費且持續(xù)存在的太陽光作為替代光源,將會有效地進一步減少微藻產(chǎn)生物燃料的總體投入[5]。有很多研究已經(jīng)嘗試在室外培養(yǎng)微藻,常用的培養(yǎng)裝置主要分為兩類:開放的跑道式培養(yǎng)池及封閉的光生物反應(yīng)器。后者又包括垂直曝氣柱狀、管狀及平板式光生物反應(yīng)器等。
不論使用何種設(shè)計的反應(yīng)器,在培養(yǎng)過程中都必須考慮以下幾個影響微藻生長的環(huán)境因素:營養(yǎng)鹽供應(yīng)、pH、混勻、氣體交換、溫度及光照。其中,前四者可通過化學(xué)或物理的方法進行有效控制,如Huang等[6]為平板式光生物反應(yīng)器專門設(shè)計了3種特殊攪拌器,以提高光暗循環(huán)及提高微藻生長速率。然而在室外培養(yǎng)時,入射至反應(yīng)器的單位面積光照強度及培養(yǎng)液溫度很大程度上取決于當?shù)氐奶鞖?、季?jié)及時間,因此有較大的波動。本文作者在6~8月期間研究夏季陽光充裕時進行微藻室外培養(yǎng)的可行性及可能遇到的主要瓶頸,所用反應(yīng)器為6 L容積曝氣型垂直柱狀光生物反應(yīng)器,微藻培養(yǎng)模式是光合自養(yǎng)型。封閉光生物反應(yīng)器可以避免雜菌的污染,減少水分的損失且較容易控制反應(yīng)器內(nèi)運行條件[7]。
1.1 微藻的接種培養(yǎng)
所用微藻Chlorella sorokiniana 211/8k,購買于英國劍橋的藻類及原生生物培養(yǎng)中心。所用培養(yǎng)基是BG11培養(yǎng)基。微藻的接種培養(yǎng)在8個250 mL容積經(jīng)過滅菌處理的藍蓋試劑瓶中進行,每個瓶子配有一個自制的插入通氣管的培養(yǎng)棉塞,以10 mL/ min(0.05 L/(L·min))的速率持續(xù)通入質(zhì)量分數(shù)5%的CO2[8]。培養(yǎng)燈光來自于3個40 W熒光燈,光照強度為(62.1±3.2)μmol/(m2·s),光照時間為24 h。培養(yǎng)溫度為(27±2)℃。
1.2 培養(yǎng)裝置的搭建
圖1為一個3層的帶萬向輪的不銹鋼支架,最上面放置光生物反應(yīng)器;中間為輔助設(shè)施,如CO2氣瓶,進料蠕動泵(Cole-Parmer,L/S 07553-77分體式驅(qū)動器,L/S Easy-Load II 77200-62泵頭,美國制),空氣泵(HIBLOW,C-5F,菲律賓制),調(diào)控CO2及空氣比例的氣體流量計 (Dwyer,RMC-101-SSV,美國制)等;下面放置新進料及微藻收獲液;旁邊配置了防雨電源廂。此外,使用的蠕動泵、空氣泵雖是防水的,但為了保護這些易耗損的裝置,試驗后期仍為中間層安裝了防雨亞克力塑料廂。
圖1 室外微藻培養(yǎng)系統(tǒng)Fig.1 Outdoor microalgae cultivation system
1.3 微藻培養(yǎng)液的準備
首先將按1.1所述方法培養(yǎng)得到的處于對數(shù)生長期的藻液在3 500 r/min轉(zhuǎn)速下離心5 min進行濃縮,用蒸餾水洗兩遍后,加一定體積的濃縮藻液到已經(jīng)調(diào)節(jié)pH于6.5~7.5之間的新鮮配置的5 L BG11培養(yǎng)液中,用蠕動泵將混合均勻后的微藻培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至經(jīng)121℃、20 min高壓滅菌的反應(yīng)器中,于室內(nèi)培養(yǎng)。質(zhì)量分數(shù)5%CO2以600 mL/min(0.1 L/(L·min))的速率從反應(yīng)器中心通過一個氣體分散器連續(xù)通入。反應(yīng)器周圍以合理的間隔放置12個LED燈,提供連續(xù)24 h光照,正對著LED燈的反應(yīng)器表面及其余地方光照強度分別為 (133.2± 9.3)μmol/(m2·s)及(78.4±5.5)μmol/(m2·s),培養(yǎng)溫度為(27±2)℃。用2 mol/L HCl調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pH至6.5~7.5。微藻進入對數(shù)生長期時,轉(zhuǎn)移2.5 L容積室內(nèi)反應(yīng)器中的培養(yǎng)液至室外6 L容積光生物反應(yīng)器中,并同時向室內(nèi)室外反應(yīng)器中添加2.5 L新的BG11培養(yǎng)液。
1.4室內(nèi)溫度調(diào)控對微藻生長的影響
將處于對數(shù)生長期微藻接種液以3 500 r/min離心5 min后得到微藻濃縮液,用蒸餾水洗兩遍后,取相同體積的濃縮藻液至已調(diào)節(jié)pH的新鮮配置的4份200 mL BG11培養(yǎng)液中,培養(yǎng)器為250 mL的錐形瓶,將這4個錐形瓶放置于水浴搖床,調(diào)節(jié)初始溫度為35℃。培養(yǎng)8 d后,收獲所有的培養(yǎng)液,以3 500 r/min離心5 min后得到微藻濃縮液。向錐形瓶中加入200 mL已調(diào)節(jié)pH的新鮮配置的BG11,接種相同體積的35℃培養(yǎng)溫度下收獲的濃縮藻液,調(diào)控水浴搖床溫度為38℃,培養(yǎng)8 d。以相同的方式,繼續(xù)做兩個溫度梯度,40℃及42℃。整個培養(yǎng)過程中,搖床速度控制在150 r/min左右,所有培養(yǎng)液中以10 mL/min(0.05 L/(L·min))的速率持續(xù)通入質(zhì)量分數(shù)5%的CO2,光照12 h,光照由固定在放置于水浴搖床上方支架上的4個LED燈提供,光照強度為(43.1±2.6)μmol/(m2·s)。
1.5 自制反射光裝置的安裝
運行后期,兩塊貼有金屬鍍層反射隔熱膜(美國3 M)的自制反射板分別放置在光生物反應(yīng)器兩側(cè)(見圖1),用于減弱太陽光直射,緩解反應(yīng)器表面光照強度及下調(diào)培養(yǎng)液溫度。
1.6 分析指標及方法
pH用Mettler Toledo G20型Compact滴定儀的pH探針DG115-SC進行測量;光密度OD750用紫外分光光度計(Varian,Cary 50型,美國制)測量;所有樣品經(jīng)0.45 μm濾膜過濾后用Hach試劑盒TNT系列進行硝態(tài)氮、總磷的測定,由Hach DR/2800型分光光度計讀取最終濃度;光照強度通過帶有LI-192SA水下量子傳感器的LI-250A測光計 (LICOR,美國制)測量所得;溫度由插入到反應(yīng)器中的內(nèi)置式溫度計自動讀?。灰設(shè)D750為生長指標,微藻比生長速率的計算依據(jù)OD750自然對數(shù)相對于培養(yǎng)時間的線性回歸方程計算。
2.1 微藻在室內(nèi)外光生物反應(yīng)器中的生長狀況
圖2以O(shè)D750為生長指標,繪制了微藻在未添加反射裝置前室內(nèi)外6 L容積光生物反應(yīng)器中的生長趨勢??梢钥闯?,室內(nèi)微藻生長明顯優(yōu)于室外。在初始2 d,處于對數(shù)生長期的微藻在室內(nèi)光生物反應(yīng)器中仍保持增長趨勢,OD750從 1.710增長至3.604,最大生長速率為0.619 d-1,在第3天開始出現(xiàn)輕微下降,微藻進入穩(wěn)定期,接下來是衰亡期。
圖2 室內(nèi)外光生物反應(yīng)器中微藻的生長Fig.2 Microalgalgrowth in indoor and outdoor photobioreactors
前3 d內(nèi)樓頂反應(yīng)器中微藻卻呈持續(xù)下降趨勢,甚至第3天時,微藻出現(xiàn)大量絮凝沉淀,致使培養(yǎng)液OD750僅為0.181,培養(yǎng)液顏色經(jīng)歷了深綠、淺綠至淺黃的改變。然而,在第4天下過雨后,室外反應(yīng)器中微藻開始出現(xiàn)再次生長的現(xiàn)象,OD750有微小回升,繼續(xù)放置3 d后,OD750增加至1.194,3 d內(nèi)的增長速率為0.511 d-1,其生長曲線類似于微藻的對數(shù)增長期,第7天后OD750緩慢增長至1.571后開始快速下降。室外反應(yīng)器中微藻的生長在整體上并不樂觀,中間甚至經(jīng)歷了大多數(shù)微藻嚴重附著于反應(yīng)器壁上,同時也有大量微藻沉在反應(yīng)器底部。分析可能的原因有3個:培養(yǎng)液中pH上升致使微藻與培養(yǎng)液中鎂、鈣、磷等元素發(fā)生絮凝沉淀;長時間地接受直接陽光照射使微藻光合機制受到損傷;培養(yǎng)液溫度升高超過了微藻可以忍耐的溫度。
2.2 pH變化對微藻生長的影響
如圖3所示,室內(nèi)反應(yīng)器中前2 d的pH持續(xù)增長,這是由于用以硝酸鈉為氮源的BG11培養(yǎng)基作為微藻培養(yǎng)液時,隨著微藻的增長,硝態(tài)氮的消耗會使培養(yǎng)液中pH呈上升趨勢。而在室外反應(yīng)器中,前2 d pH維持在7左右,培養(yǎng)液中硝酸鈉質(zhì)量濃度僅消耗15 mg/L,這與圖2中表現(xiàn)出的微藻下降趨勢相符。第4天時,pH突然增長至9.57,主要原因是CO2被用完,微藻OD750的下降趨勢比第一兩天更快,降至0.181,微藻出現(xiàn)大量絮凝沉淀。Sukenik等[9]報道了不同pH條件下室外培養(yǎng)液中發(fā)生絮凝沉淀后微藻生物量的去除率,在pH 5.0~7.5之間,微藻不會發(fā)生絮凝沉淀,但pH超過8.5時,開始呈現(xiàn)明顯絮凝沉淀現(xiàn)象,甚至有98%的微藻生物量會從培養(yǎng)液中被去除。
圖3 室內(nèi)外光生物反應(yīng)器中的pH變化Fig. 3 pH variations of indoor and outdoor photobioreactors
然而,第4天微藻出現(xiàn)大量絮凝沉淀后的3 d內(nèi),由于沒有及時更換新的CO2氣瓶,pH繼續(xù)維持上升至11.102,微藻卻呈現(xiàn)再次生長的趨勢。與室內(nèi)反應(yīng)器的運行進行對比,雖然Gordon等[10]指出,室內(nèi)培養(yǎng)時,當曝氣且pH緩沖能力較差的培養(yǎng)液pH>10時,培養(yǎng)液中微藻會與鈣、鎂、磷等元素發(fā)生絮凝沉淀。但結(jié)合圖2知,pH在10左右的室內(nèi)培養(yǎng)液中并沒有出現(xiàn)嚴重的微藻附著現(xiàn)象,只表現(xiàn)出輕微的OD750下降趨勢。因此,室外培養(yǎng)時,pH升高可能是引起微藻發(fā)生絮凝沉淀的原因,但并不是關(guān)鍵因素。
2.3 光照強度及培養(yǎng)液溫度對微藻生長的影響
光照是微藻自養(yǎng)培養(yǎng)光合作用所必需的,光照強度、波長范圍、光照時間是優(yōu)化微藻產(chǎn)率主要考慮的三大因素。其中,光照強度是最重要因素,低于最優(yōu)點時,它會成為一個限制因素。營養(yǎng)物充足時,提高光照強度會促進微藻光合作用,一旦超過該飽和點,繼續(xù)增加會破壞微藻光受體、降低光合活性,該現(xiàn)象被稱為光抑制。太陽光是室外光合自養(yǎng)系統(tǒng)的主要光來源,它包含全部光譜,可以通過過濾為特定種屬微藻的培養(yǎng)提供合適波長的光和輻射,但光照強度卻是一個不可調(diào)控的因素。微藻生長的最佳光照強度一般低于200 μmol/(m2·s)。然而,太陽光所能提供的光照強度一般都遠遠大于最佳值,到達地面的光強在1 800 μmol/(m2·s)以上,晴天時甚至?xí)^2 000 μmol/(m2·s)。這比建議的最佳光照強度高出10倍[11]。長時間直接入射這樣光照強度的陽光,會損傷反應(yīng)器中微藻光合色素,從而破壞光合機制,致使培養(yǎng)中微藻延遲生長或失去活性,發(fā)生絮凝沉淀[12]。
圖4(a)為室外培養(yǎng)過程中早上10:00至下午17:00之間每半個小時在反應(yīng)器表面隨機取5個點測得的平均光照強度,圖4(b)為同一時間培養(yǎng)液溫度。 Li等[13]研究了不同光照強度對綠藻Pseudochlorococcum sp.生長的影響,結(jié)果顯示,光照強度在20~300 μmol/(m2·s)沒有出現(xiàn)光抑制現(xiàn)象,在600 μmol/(m2·s)時開始出現(xiàn)輕微的光抑制現(xiàn)象,隨著光照強度升高至800 μmol/(m2·s),光抑制現(xiàn)象越來越嚴重。在本研究中,1~3 d內(nèi)光照強度平均為(1 700±137)μmol/(m2·s),微藻經(jīng)歷了嚴重的光抑制。此外,由圖4(b)知,1~3 d內(nèi)培養(yǎng)液溫度持續(xù)上升,最高溫度達48.3℃。Wu等[14]的研究表明,微藻Monoraphidium sp.SB2可以在25~35℃下生長良好,在40℃時出現(xiàn)衰退。Park等[15]指出,雖然微藻生長的最佳溫度取決于藻種及培養(yǎng)液中營養(yǎng)物濃度,但大多數(shù)藻種適宜生長的溫度均在28~35℃之間,突然的溫度變化會大幅度降低微藻的產(chǎn)率。1~3 d內(nèi)光照強度及溫度的變化合理解釋了圖2中初始3 d室外微藻OD750的持續(xù)下降。由于連續(xù)3 d的降雨,第4—7天光照強度突然下降,低至244 μmol/(m2·s),溫度下降至28℃以下,室外微藻OD750開始回升。第8天轉(zhuǎn)晴后,隨著光照強度的增加,培養(yǎng)液溫度逐漸回升,室外微藻OD750維持3 d后(見圖2)再次出現(xiàn)快速下降。這充分證明,到達反應(yīng)器表面的光照強度及培養(yǎng)液溫度是影響微藻室外培養(yǎng)的限制性因素。
圖4 室外反應(yīng)器表面光照強度及培養(yǎng)液溫度Fig.4 Light intensity on the surface of outdoor photobioreactor and temperature of culture
2.4 溫度影響微藻生長的室內(nèi)驗證
大多數(shù)工業(yè)用微藻都是嗜中溫型的,最佳生存溫度在20~30℃之間。然而,室外培養(yǎng)系統(tǒng)受溫度及光照影響很大,其中光照又是培養(yǎng)液熱度的主要來源。Quinn等[16]指出,微藻培養(yǎng)液可以100%吸收入射太陽光的所有光譜,但僅有5%甚至更少被轉(zhuǎn)換為生化能,其余能量就貢獻給了培養(yǎng)液的熱度,單獨依靠反應(yīng)器外的熱對流不能有效降低培養(yǎng)液溫度,在晴天時反應(yīng)器中溫度甚至可能超過55℃,這是需要被避免的。
為了找出Chlorella sorokiniana可以承受的最高溫度,在實驗室水浴搖床內(nèi)進行了一批逐漸升溫的馴化培養(yǎng)試驗,溫度分別為27、35、38、40℃及42℃。微藻在這幾組溫度下的生長狀況見圖5??梢悦黠@看出,27℃及35℃下的微藻生長良好且前者可以較快地進入穩(wěn)定期,最大比生長速率分別為(0.735±0.02)d-1和(0.278±0.008)d-1;當溫度在38℃及40℃,微藻生長非常緩慢,最大比生長速率僅為(0.148±0.004)d-1;在42℃時,微藻完全不可以生長。因此,認為本課題研究中所用藻種培養(yǎng)溫度不適宜超過40℃,結(jié)合圖2及圖4(b),合理解釋了室外反應(yīng)器中第2天后微藻OD750的加速下降。de-Bashan等也證明小球藻Chlorella sorokiniana在經(jīng)歷5 d的適應(yīng)期后可以在40℃下生長[17]。
圖5 室內(nèi)不同溫度下微藻的生長Fig.5 Microalgal growth under different indoor temperatures
2.5 反射光裝置的安裝對室外培養(yǎng)系統(tǒng)的影響
通過分析總結(jié)得知,室外培養(yǎng)時,微藻培養(yǎng)液可以吸收除了微藻進行光合作用所需的波長400~700 nm外的其它光譜,這加大了培養(yǎng)液的熱度負荷。因此,限制微藻在室外光生物反應(yīng)器中生長的主要因素是太陽光入射到反應(yīng)器的高光照強度及隨之引起的培養(yǎng)液高溫度?;谶@個原因,在反應(yīng)器左右兩邊分別放置了貼有金屬鍍層反射隔熱膜(美國3 M)的反射板。表1列出了安裝反射膜前后室外培養(yǎng)系統(tǒng)中光照強度、培養(yǎng)液溫度變化及微藻生長狀況。
表1 安裝反射裝置前后室外培養(yǎng)條件及微藻生長狀況的變化Table 1 Change of outdoor cultivation conditions and microalgae growth after reflectors installation
圖6為安裝反射板前后,1 d內(nèi)不同時刻反應(yīng)器表面光照強度及微藻培養(yǎng)液中溫度的變化,光照強度在每天上午10:00到下午17:00之間,每30 min隨機在反應(yīng)器表面取5個點測量其平均值,溫度由內(nèi)置式溫度計每隔4 min自動讀取。在上午10:00至下午17:00光照加強、溫度上升期間,安裝反射裝置的反應(yīng)器中有 (42.21±4.7)%入射光被反射,但光照強度依舊可以達到900 μmol/(m2·s)以上。Liu等指出[18],通過在反應(yīng)器表面添加特殊材質(zhì)的反射膜可以減少50%的培養(yǎng)液熱負荷。結(jié)合表1知,光照強度下降 (543±175)μmol/(m2·s),溫度降低2~4℃,最高在36℃左右。
圖6 安裝反射裝置前后一天內(nèi)不同時刻反應(yīng)器表面光照強度及培養(yǎng)液溫度Fig.6 Light intensity on the surface of reactor and culture temperature during differentmoment before and after reflectors installation
然而,由表1可以看出,安裝反射裝置后,在初始OD750相差不大的狀況下,雖然反映其表面光照強度減弱,培養(yǎng)液中溫度有所下降,微藻生長并未得到明顯改觀,能達到的最高OD750僅比沒有安裝反射裝置條件下高出19%,最大比生長速率高出16.7%。這是由于即使反射裝置的安裝可以減弱(42.21±4.7)%的光照強度,到達反應(yīng)器表面的光照強度仍然可以達到900 μmol/(m2·s)以上(見圖6),光抑制作用并沒有得到緩解。因此,微藻室外生長最重要的限制因素是過高的光照強度。Monica等也指出,微藻室外培養(yǎng)產(chǎn)率很大程度上被光飽和效應(yīng)限制[19]。目前還沒有實現(xiàn)室外微藻的可持續(xù)培養(yǎng),仍需要進一步改善裝置來減弱可到達光生物反應(yīng)器表面的光照強度。
室外運行光生物反應(yīng)器進行微藻培養(yǎng),當培養(yǎng)液pH超過8.5時,微藻會出現(xiàn)明顯絮凝沉淀現(xiàn)象,甚至有98%的微藻生物量會從培養(yǎng)液中被去除。pH升高可能是引起微藻發(fā)生嚴重絮凝沉淀的原因之一,但并不是關(guān)鍵因素。限制微藻在室外光生物反應(yīng)器中良好生長的關(guān)鍵因素是太陽光入射到反應(yīng)器的高達(1 700±137)μmol/(m2·s)的光照強度所帶來的光抑制作用,以及隨之引起的48℃高溫對微藻細胞的損傷。當培養(yǎng)液溫度超過40℃時,Chlorella sorokiniana幾乎不能生長。反射裝置的安裝可以減少(42.21±4.7)%的光照強度,使培養(yǎng)液溫度下降2~4℃,但反應(yīng)器表面的光照強度仍然達到900 μmol/(m2·s)以上,過高的光照強度是微藻室外培養(yǎng)的最大限制因素。微藻的室外培養(yǎng)尚未實現(xiàn)可持續(xù)增長,仍需要進一步改善裝置減弱光照強度。
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Outdoor Chlorella sorokiniana Cultivation Using Photobioreactor in Summer
ZHANG Shanshan, LIU He*
(School of Environmental and Civil Engineering,Jiangnan University,Wuxi 214122,China)
Aimed to investigate the feasibility of growing Chlorella sorokiniana outdoor in summer,a 6 L aerated vertical column photobioreactor was performed from Jun to Aug on the rooftop.When cultivated outdoor,algae auto-flocculation will happen heavily once pH was over 8.5.The photoinhibition caused by high incident light intensity(1 700±137 μmol/(m2·s))and the algal cells damage resulted from high temperature (48℃)lead to inhibition of algal growth.Chlorella sorokiniana is not able to grow well when temperature is over 40℃.The installation of reflectors,which covered by reflective thermal insulation mental coatings,could decrease light intensity by 42.21±4.7%,resulting in 2~4℃temperature decrease.However,light intensity still could be more than 900 μmol/(m2·s)on sunny days,making photoinhibition hard to be relieved.To achieve faster algal growth as well as continuous cultivation outdoor,more effort should be made to moderate the light intensity.
microalgae,photobioreactor,outdoor cultivation,light intensity,temperature
X 505
A
1673—1689(2015)03—0260—07
2014-03-26
國家新世紀優(yōu)秀人才支持計劃項目(NCET-10-0455)。
*通信作者:劉 和(1974—),男,江西吉安人,工學(xué)博士,教授,碩士研究生導(dǎo)師,主要從事污泥無害化、資源化及環(huán)境微生物技術(shù)應(yīng)用于污染控制的研究。E-mail:liuhe@jiangnan.edu.cn