■關(guān)洪斌 余夢迪 成英俊 王曉蘭

(山東大學(xué)海洋學(xué)院，山東威海 264200)

目前，豆科牧草在我國主要用于飼喂禽畜，在水產(chǎn)配合飼料中使用較少且研究不多，從而使豆科牧草這一分布廣泛而又廉價的資源難以得到充分的開發(fā)利用。從豆科牧草作為禽畜飼料的事實(shí)中可以看出，豆科牧草作為一種綠色的飼料不僅具有營養(yǎng)豐富、能夠改善動物體質(zhì)的價值，更重要的是豆科牧草生命力頑強(qiáng)，分布廣泛，廉價易得，對生產(chǎn)具有重大的意義。有研究表明：鮮白三葉草，葉柔嫩，在初花期，莖葉各占一半，蛋白質(zhì)含量較高，粗纖維含量低。鮮草喂豬可減少精料消耗20%～25%，降低飼料成本近20%。干草粉易貯存，便于運(yùn)輸，使用方便，干草粉可加入配合飼料中作為粗料，另可獨(dú)立加工成顆粒飼料。本研究依據(jù)白花三葉草具有高蛋白和較高經(jīng)濟(jì)價值的特點(diǎn)，使其部分替代原水產(chǎn)飼料中的魚粉、豆粕粉和小麥粉，以提高草金魚的增重率，降低飼料成本。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)用魚

試驗(yàn)所用草金魚來自山東大學(xué)（威海）附近的水族館，選擇體長6 cm左右，體質(zhì)量10 g左右，個體均勻、活潑健康的草金魚作為試驗(yàn)用魚。草金魚（Goldfish）屬鯉科（Cyprinidae）金鯽種（Red Swallowtail）。是金魚中最古老的一種，主要有單尾草金魚和燕尾草金魚。屬于以動物性食料為主的雜食性觀賞魚類，不需精細(xì)管理，飼養(yǎng)簡便。

1.1.2 試驗(yàn)用白花三葉草

試驗(yàn)用白花三葉草采自山東大學(xué)（威海）圖書館前兩側(cè)及海洋學(xué)院樓前側(cè)的草坪，采集后洗凈，放入烘箱，在120℃下連續(xù)烘干6 h，使用高速中藥粉碎機(jī)粉碎至干粉過60目篩備用。

1.1.3 試驗(yàn)飼料

按表1配方稱量白花三葉草粉末及其他飼料原料，攪拌均勻，適量加水，置于30～38℃繼續(xù)發(fā)酵1～2 h，制成顆粒狀飼料，在60℃下烘干成型，過14～16目篩，在120℃下完全烘干，冷卻裝袋備用。對照組為白花三葉草添加量0%，試驗(yàn)1組、2組、3組添加量分別為5%、10%和20%。

表1 各組原料配比(%)

1.2 試驗(yàn)環(huán)境

試驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，采用自然散射光，避免陽光直射。草金魚飼養(yǎng)于體積為60 cm×40 cm×40 cm的魚缸內(nèi)。魚缸內(nèi)有溫度計(jì)和充氣泵，魚缸中裝深度有30 cm曝氣充氧24 h的自來水，水溫(25.0±1.0)℃，pH值7.0±0.5。設(shè)置1個對照組，3個試驗(yàn)組?？紤]到實(shí)驗(yàn)室中各處光照條件不同，每個試驗(yàn)組設(shè)置3個重復(fù)組。每個魚缸投放13尾草金魚。試驗(yàn)前用3%的食鹽水浸洗草金魚5 min,用高錳酸鉀對魚缸進(jìn)行消毒處理。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 攝食率試驗(yàn)

生長性能檢測采用攝食率法進(jìn)行，試驗(yàn)開始前14 d將試驗(yàn)用魚暫養(yǎng)在100 cm×50 cm×60 cm的魚缸中，以對照組飼料對其進(jìn)行飽食投喂，定期換水，清理糞便保持水體溫度，pH值，含氧量穩(wěn)定，使試驗(yàn)用魚能更好的適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。

試驗(yàn)歷時2周，投喂表1飼料。試驗(yàn)開始空腹24 h后稱量質(zhì)量與體長，記錄數(shù)據(jù)。試驗(yàn)期間，采用飽食投喂法，每日投喂2次，每天中午12：30和下午19：30定時投喂，定時投喂的目的是避免使魚產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)。每次的投喂量控制在魚體質(zhì)量的2%～3%，每天中午喂食前采用虹吸法清理魚缸中的排泄物和飼料殘?jiān)Q水1/3。試驗(yàn)結(jié)束后，各魚缸中魚空腹24 h后稱取重量。對照組中隨機(jī)取3尾魚，試驗(yàn)組中每組各隨機(jī)取1尾魚，取樣后，先測量每尾魚的體長和重量，再解剖魚，將內(nèi)臟完整取出，使用1‰電子天平依次測量魚皮、內(nèi)臟、肝胰臟的重量。試驗(yàn)指標(biāo)計(jì)算方法如下：

增重率(%)=(試驗(yàn)?zāi)w重-試驗(yàn)初體重）/試驗(yàn)初體重×100;

特定生長率（%）=(試驗(yàn)?zāi)w重-試驗(yàn)初體重）/試驗(yàn)天數(shù)×100;

日攝食率（%）=（日投喂量-日殘食量）/魚體增重×100;

飼料系數(shù)=飼料消耗量/魚體增重量;

肝體比(HSI)=(試驗(yàn)?zāi)~體肝重/試驗(yàn)?zāi)~體重)×100;

豐滿度(%)=(試驗(yàn)?zāi)~體重/試驗(yàn)?zāi)~體長3)×100;

內(nèi)臟比(%)=(試驗(yàn)?zāi)~內(nèi)臟重/試驗(yàn)?zāi)~體重)×100。

1.3.2 迷宮試驗(yàn)

誘食活性試驗(yàn)采取迷宮法，在100 cm×40 cm×50 cm的魚缸中進(jìn)行，在魚缸中利用透明玻璃擋板組成迷宮（見圖1）。放入深度30 cm曝氣充氧的自來水試驗(yàn)開始1 h前用紗網(wǎng)篩將魚群隔開，從過渡魚缸中隨機(jī)取25條草金魚放入迷宮魚缸的A處，取2 g飼料用紗布包裹放在迷宮的B處。待試驗(yàn)草金魚適應(yīng)10 min后，移去紗網(wǎng)開始計(jì)時，以30 min為單位，取試驗(yàn)草金魚進(jìn)入有效區(qū)并啄咬試球的總次數(shù)為觀察值，每次測試的數(shù)據(jù)以各重復(fù)觀察值的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差表示。以上步驟分別進(jìn)行試驗(yàn)組飼料和對照組飼料的迷宮法試驗(yàn)，每種試驗(yàn)飼料重復(fù)5次。

圖1 迷宮示意圖

1.4 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)均用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（Mean±SE）表示，使用EXCEL 2007作圖。以試驗(yàn)組與對照組的數(shù)值之差的大小來判斷不同比例白花三葉草添加量配合飼料的誘食活性，負(fù)值表示抑制攝食，正值表示誘導(dǎo)攝食。用SPSS 19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因素方差分析(one-way AN0VA)分析各組差異：若差異顯著，再用LSD進(jìn)行多重比較，以P＜0.05為有顯著的誘食意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同比例的白花三葉草飼料對草金魚生長效果的影響

試驗(yàn)結(jié)果見表2，對草金魚的解剖結(jié)果進(jìn)行分析，根據(jù)實(shí)驗(yàn)測得的數(shù)據(jù)分別求出豐滿度、肝體比、內(nèi)臟比等指標(biāo)，觀察不同比例白花三葉草飼料對草金魚生長與發(fā)育狀況的影響（見表3）。

表2 不同飼料對草金魚生長的影響

表3 不同飼料對草金魚生長與發(fā)育狀況的影響

從圖2中可以看出，添加了白花三葉草的試驗(yàn)組較對照組的特定生長率有了明顯的增加；不同比例的白花三葉草飼料對草金魚豐滿度的影響不大，基本上無差異，但隨著白花三葉草比例濃度的增加，草金魚的肝體比不斷減小而內(nèi)臟比呈逐漸增加的趨勢。由圖3可知，飼料系數(shù)隨白花三葉草添加比例的增加顯著降低。隨著白花三葉草比例的增加，添加了白花三葉草的飼料對草金魚生長狀況的影響顯著增強(qiáng)。

圖2 不同飼料對草金魚發(fā)育狀況的影響

圖3 飼料系數(shù)對比

2.2 不同比例白花三葉草飼料對草金魚誘食活性的影響

試驗(yàn)結(jié)果見表4，將結(jié)果在SPSS中進(jìn)行顯著性分析，見圖4。

表4 不同比例白花三葉草飼料誘食效果對比

圖4 迷宮試驗(yàn)結(jié)果的差異性分析

從表4可以看出，試驗(yàn)組與對照組差值均為正值時，觀察t值或P值可以看出誘食活性強(qiáng)弱順序一致，因此試驗(yàn)組飼料對草金魚均具有誘食效果。其中，添加了5%白花三葉草的試驗(yàn)1組無明顯的誘食效果（P＞0.05），添加10%和20%白花三葉草的飼料均有較為顯著的誘食效果（P＜0.05），添加20%白花三葉草的試驗(yàn)3組對草金魚的誘食效果有極其顯著的影響。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，添加了白花三葉草的試驗(yàn)組飼料對草金魚生長的影響要明顯優(yōu)于對照組，誘食效果也同樣強(qiáng)于對照組，這可能與白花三葉草的高蛋白，低纖維有關(guān)。添加了5%白花三葉草的飼料對草金魚無明顯的誘食效果，可能是因?yàn)榘谆ㄈ~草的質(zhì)量濃度過小，未達(dá)到草金魚的味覺和嗅覺感受器的生理閾值。添加了20%白花三葉草的飼料對草金魚的誘食效果最為明顯，草金魚的增重率、特定生長率及飼料系數(shù)均處于最佳水平，效果最好。

營養(yǎng)豐富的食物，是保證生物生長、發(fā)育的物質(zhì)基礎(chǔ)，草金魚也要求食物中含有適量的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、各種維生素、無機(jī)鹽類和微量元素。

4 結(jié)論

本項(xiàng)研究水產(chǎn)配合飼料（適用范圍：鯉科觀賞魚如草金魚）用白花三葉草粉部分替代魚粉、豆粕粉和小麥粉，與已有技術(shù)相比，具有以下特點(diǎn)：

①不影響正常生長。

②增重率大幅度提高，餌料系數(shù)降低，誘食效果顯著。

③水產(chǎn)配合飼料的成本降低。

經(jīng)過本次試驗(yàn)可以看出，白花三葉草作為一種分布廣泛，易種植，成本低廉的優(yōu)質(zhì)牧草，在水產(chǎn)飼料的開發(fā)中具有明顯的優(yōu)勢和經(jīng)濟(jì)價值，如果可以在實(shí)踐中加以利用，白花三葉草作為飼料添加劑具有廣闊的發(fā)展前景。