興?？h藏系綿羊弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查

趙 良

(青海省興?？h畜牧獸醫(yī)工作站,青海興海 813300)

興海縣藏系綿羊弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查

趙 良

(青海省興?？h畜牧獸醫(yī)工作站,青海興海 813300)

弓形蟲病是一種嚴(yán)重的人畜共患病，對人類健康和畜牧業(yè)生產(chǎn)造成嚴(yán)重威脅，已受到全世界衛(wèi)生界和獸醫(yī)界的廣泛關(guān)注。檢測結(jié)果表明，興海縣藏系羊中存在弓形蟲病感染，陽性率為6.00%；其中:羔羊陽性率為6.25%（5/80），成年羊陽性率為陽性率5.84%（7/120）；母羊陽性率為7.83%（9/115），公羊陽性率為3.53%（3/85）。

興?？h 藏系羊 弓形體 間接血凝試驗（IHA） 效價 血清陽性率

弓形蟲?。╰oxoplasmosis）是由剛地弓形蟲（Toxophasma gondii）寄生于人和多種哺乳動物及禽類的有核細(xì)胞內(nèi)所引起的一種人畜共患性原蟲病。為獲得興?？h藏系羊弓形蟲病流行病學(xué)資料，給今后制定有效的防治措施和有計劃地開展防治工作提供參考依據(jù)，筆者于2014年6月份用間接血凝試驗（IHA）進(jìn)行了藏系羊弓形蟲病血清學(xué)調(diào)查，現(xiàn)將結(jié)果報告如下：

1 自然概況

興海縣地處青藏高原東北部，位于青海省西南部，隸屬海南藏族自治州，地理位置介于東經(jīng)99°01′01″～100°21′，北緯34°48′01″～36°14′之間。全縣土地總面積為12146km2，下轄7鄉(xiāng)1鎮(zhèn)，有可利用草場面積為100.34萬hm2。境內(nèi)地貌類型多樣，山地、丘陵、谷地和高原盆地相間出現(xiàn)，但以山地為主。地勢西南高東北低，其南部地區(qū)河流縱橫，林木廣布，植被良好，野生動植物資源豐富，北部地區(qū)地勢開闊平坦，牧草廣茂，是優(yōu)質(zhì)的天然牧場。平均海拔4100m，具有顯著的高原大陸性氣候特點(diǎn)，日照1050～1280h，平均氣溫1℃～4℃，年降水量416mm，年蒸發(fā)量1300mm。該縣是一個以牧為主、農(nóng)牧結(jié)合的縣，畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)是基礎(chǔ)性產(chǎn)業(yè)，養(yǎng)羊業(yè)又是畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)的支柱產(chǎn)業(yè)，全縣地域遼闊，牧草豐茂，發(fā)展高原畜牧業(yè)具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢。

2 檢測材料

2.1 被檢血清

200份被檢血清用隨機(jī)抽樣的方法均采自興?？h自然條件下放牧的藏系羊，其中120份為成年藏羊血清，80份為當(dāng)年產(chǎn)羔羊血清。空腹頸靜脈采血后，將試管擺成斜面，置于4℃冰箱5 h后取出，放在室溫下待血清析出后收集血清，冷凍保存?zhèn)錂z。

2.2 診斷器械

檢測用96孔110°V型微量聚乙烯反應(yīng)板、微量加樣器、微量振蕩器、玻璃板等。

2.3 診斷液弓

形蟲IHA抗原（批號2011334）、稀釋液（批號2011334）、衣原體陽性血清（批號2011122）、衣原體陰性血清（批號2011120），均購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

3 試驗方法

3.1 操作步驟

3.1.1 血清檢測方法

試驗在96孔110°V型微量聚乙烯反應(yīng)板上進(jìn)行，每塊血凝板設(shè)陰性血清、陽性血清、空白和稀釋液對照孔；

3.1.2 加稀釋液

每孔加0.075 ml稀釋液。

3.1.3 加樣品、陽性、陰性對照血清

第1孔加相應(yīng)血清0.025 ml。

3.1.4 稀釋

陰性、陽性對照血清稀釋至第7孔，樣品稀釋至第3孔。陰、陽性對照血清的第8孔和樣品的第4孔為稀釋液對照。

3.1.5 加抗原

凍干抗原按說明書要求稀釋，1 500～2 000r/min離心5～10 min，棄去上清液，加等量稀釋液混均，置4℃恒溫箱24 h后使用。向每孔加稀釋好的抗原0.025 ml，置微量振蕩器上振蕩2 min，蓋上玻璃板在37℃下作用2 h后判定結(jié)果。

3.2 判定標(biāo)準(zhǔn)

在陽性對照血清滴度不低于1‥1024（第5孔）、陰性對照血清除第1孔允許存在前滯現(xiàn)（+）外，其余各孔為（-），稀釋液對照孔為（-）的前提下，對被檢血清進(jìn)行判定。被檢血清抗體滴度達(dá)到或者超過1‥64判為陽性，判（++）為陽性終點(diǎn)。

4 檢測結(jié)果

在被檢測的200份藏系羊（母羊115只、公羊85只）血清中檢出陽性血清12份，陽性率為6.00%（12/200）。其中：120份成年藏羊血清中檢出陽性7份，陽性率5.84%（7/120）；80份羔羊血清中檢出陽性5份，陽性率6.25%（5/80）；115份母藏羊血清中檢出陽性9份，陽性率7.83%（9/115）；85份公藏羊血清中檢出陽性3份，陽性率3.53%（3/85）。檢測結(jié)果表明，在興?？h的藏系羊中存在弓形蟲病感染，羔羊的陽性率高于成年羊，母羊的陽性率高于公羊的陽性率。

5 分析討論

（1）弓形蟲病是一種世界性流行的人畜共患病，沒有嚴(yán)格的地區(qū)分布，特別在一些衛(wèi)生條件差的農(nóng)牧區(qū)，本病的感染率比城市高，氣候潮濕地區(qū)比干燥地區(qū)感染率高，與卵囊在潮濕土壤存活時間有關(guān)；一般情況下，弓形蟲的流行沒有嚴(yán)格的季節(jié)性，但秋冬季和早春季發(fā)病率最高，可能與動物機(jī)體的抵抗力因寒冷、運(yùn)輸、妊娠而降低有關(guān)。弓形蟲的傳播途徑分為先天性弓形蟲病和獲得性弓形蟲病，先天性弓形蟲病是孕婦在妊娠期弓形體隱形感染而引起的；獲得性弓形蟲病多通過消化道感染或經(jīng)損傷的皮膚、黏膜感染。

（2）本次調(diào)查結(jié)果顯示，興?？h藏系羊弓形體的感染率為6.00%，說明在成年藏羊及其后代牛群中弓形體感染是客觀存在的。綜合分析該地區(qū)地理特征和藏系羊的飼養(yǎng)特點(diǎn)，認(rèn)為該地區(qū)藏羊弓形體病的發(fā)生在一定程度上于人為因素有很大關(guān)系，即當(dāng)?shù)啬撩駥Ρ静〉膫鞑ネ緩秸J(rèn)識不足，有飼養(yǎng)貓的風(fēng)俗習(xí)慣，對有些貓管理不善，成為在草場上流浪的野貓，糞便污染草場環(huán)境，使放牧羊群采食被卵囊污染的牧草而感染。

（3）今后要有計劃地開展對弓形體病羊的隔離治療和淘汰工作，對已發(fā)生弓形體病的羊群應(yīng)定期進(jìn)行血清學(xué)檢測，及時檢出隱性感染的羊進(jìn)行治療或淘汰。在此基礎(chǔ)上，加強(qiáng)對貓等中間宿主的管理，同時，對病畜和中間宿主的糞便等排泄物和污染物采取消毒等方法進(jìn)行無害化處理，以達(dá)到徹底凈化弓形體病的目的。

（4）據(jù)有關(guān)資料報道，感染弓形體的羊在傳播人類弓形體上有特殊作用。因此，做好羊弓形體病的檢測及控制工作，對防止人弓形體病的感染及流行有重要意義。