丹酚酸B在心血管疾病中藥理作用研究進展

林 超，劉兆國，錢 星，姚 遠，徐 斌，卞慧敏,2

(1.南京中醫(yī)藥大學藥學院，2.江蘇省中藥藥效與安全性評價重點實驗室，江蘇省優(yōu)勢學科,江蘇 南京 210023)

丹酚酸B在心血管疾病中藥理作用研究進展

林 超1，劉兆國1，錢 星1，姚 遠1，徐 斌1，卞慧敏1,2

(1.南京中醫(yī)藥大學藥學院，2.江蘇省中藥藥效與安全性評價重點實驗室，江蘇省優(yōu)勢學科,江蘇 南京 210023)

心血管疾病嚴重威脅人類的健康和生活質(zhì)量，目前已成為導致人類死亡的頭號殺手。因此，尋找有效的治療藥物以降低該病的致死率和致殘率成為亟待解決的問題。丹參因其具有較好的活血化瘀功效，目前已被廣泛的用于心血管疾病的治療且取得較好的療效。丹酚酸B是丹參提取物中的主要水溶性成分之一，研究證實丹酚酸B具有多種藥理活性，不僅對心肌梗死(myocardial infarction, MI)具有很好的保護作用，同時也能夠明顯的改善心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia-reperfusion, MI/R)的損傷。該文就近年來丹酚酸B在心血管疾病中的藥理研究進展進行綜述，闡述丹酚酸B調(diào)控心血管疾病的藥理作用機制及其與心血管疾病治療的關系，為丹酚酸B的臨床應用及后續(xù)研究提供參考。

丹酚酸B；心肌梗塞；缺血/再灌注；心肌細胞肥大；分子機制；治療策略

心血管疾病是一種嚴重威脅人類健康的疾病，該病具有“發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高”等特點[1]，目前已成為導致人類死亡的頭號病因。因此，尋找能夠有效治療心血管病的藥物成為了臨床面臨的首要問題。傳統(tǒng)的活血化瘀中藥丹參，因其具有祛瘀止痛、活血通經(jīng)的功效[2-3]，目前已被廣泛用于心血管疾病的治療。研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸(salvianolic acids)是丹參(拉丁學名：salviamiltiorrhizabunge)中含量最豐富的水溶性物質(zhì)，而丹酚酸B則是丹酚酸中含量最多、生物活性最強的化合物[4]。研究表明，丹酚酸不僅對心肌缺血/再灌注損傷具有保護作用[5-6]，同時對心肌梗死[7-8]及心肌細胞肥大[9]均有保護作用。本文就近年來丹酚酸B在心血管疾病中的藥理研究進展進行綜述，重點探討丹酚酸B介導調(diào)控心血管疾病的藥理作用機制及其與心血管疾病治療的關系，為丹酚酸B的臨床應用及后續(xù)研究提供參考。

1 丹酚酸B在心血管疾病中藥理作用研究進展

1.1 丹酚酸B對心肌梗死的保護作用He等[10]采用冠狀動脈結(jié)扎方法構建大鼠心肌梗死(myocardial infarction, MI)模型，考察丹酚酸B對MI的保護作用。結(jié)果顯示，與對照組相比，丹酚酸B能夠?qū)I發(fā)揮明顯的心臟保護作用。機制研究表明，丹酚酸B主要通過抑制瘦素和內(nèi)皮素-活性氧簇(endothelin-reactive oxygen species, ET-ROS)的上調(diào)以及恢復心肌中心肌細胞肌漿網(wǎng)鈣ATP酶2a(sarco/endoplasmic reticulum ATPase 2a, SERCA2a)和受磷蛋白的正常表達，進而發(fā)揮保護心臟的作用。

1.2 丹酚酸B對MI/R損傷的保護作用MI/R時會產(chǎn)生大量自由基，使得細胞膜脂質(zhì)過氧化反應增強，膜流動性和通透性發(fā)生改變，進而導致電生理活動異常，誘發(fā)和促進心律失常的產(chǎn)生。由于心肌細胞脂質(zhì)過氧化反應增強，致使心肌缺血區(qū)的過氧化產(chǎn)物如丙二醛(malondialdehyde, MDA) 含量增多；冠脈流出液中乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase, LDH)和肌酸磷酸激酶(creatine phosphokinase, CPK) 升高以及心肌組織中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD) 減少[11]。研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸B能夠明顯提高MI/R損傷大鼠心肌組織中的SOD活力，可有效對抗氧自由基引起的毒害作用，從而減輕心肌細胞的損傷。Xue等[12]通過構建大鼠MI/R模型考察丹酚酸B對MI/R損傷的保護作用，發(fā)現(xiàn)與對照組相比，給予丹酚酸B能夠明顯增加血漿中肌鈣蛋白(troponins, CTn)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB, CK-MB)的含量，同時明顯降低血漿中一氧化氮(nitric oxide, NO)和總超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)的水平，表明丹酚酸B對大鼠MI/R損傷有明顯的保護作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸B能夠緩解氧化應激、減少鈣超載以及改善內(nèi)皮功能。Yang等[13]考察了兔MI/R過程中丹酚酸B對血小板活化和血管內(nèi)皮細胞功能的影響，發(fā)現(xiàn)缺血/再灌注過程中，內(nèi)皮細胞功能失調(diào)，同時血小板被活化；給予丹酚酸B后可保護血管內(nèi)皮細胞免受MI/R損傷，同時丹酚酸B也能夠抑制MI/R引起的血小板活化。

1.3 丹酚酸B具有抑制心肌細胞肥大的作用Liu等[9]考察丹酚酸B對血管緊張素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, AngⅡ)誘導的新生大鼠心肌細胞肥大的影響，結(jié)果表明，丹酚酸B能夠抑制AngⅡ誘導的心肌細胞的肥大，同時發(fā)現(xiàn)心鈉素和腦鈉素mRNA表達下降及細胞表面積減少。機制研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸B能夠抑制聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1[poly(ADP-ribose)polymerase-1, PARP-1]的活性；同時發(fā)現(xiàn)過表達PARP-1能夠減弱丹酚酸B抗心肌細胞肥大的效應，這些研究表明丹酚酸B具有很好的抑制心肌細胞肥大的作用。

1.4 丹酚酸B能夠抑制動脈粥樣硬化的形成Lee等[14]通過實驗考察了丹酚酸B對動脈粥樣硬化的作用，結(jié)果表明用丹酚酸B處理血管平滑肌細胞可有效抑制血小板衍生生長因子(platelet-derived growth factor, PDGF)誘導的細胞增殖和遷移，同時可明顯增加血紅素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的表達；與此同時，丹酚酸可明顯減少活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)的產(chǎn)生及降低煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸/還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP/NADPH)的比率。用人臍靜脈內(nèi)皮細胞研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸B能夠明顯誘導HO-1的產(chǎn)生，同時有效的抑制腫瘤壞死因子-α (tumor necrosis factor, TNF-α)誘導的nuclear factor-κB (NF-κB)的激活；而采用siRNA抑制HO-1的表達可消除丹酚酸對血管內(nèi)皮細胞的保護作用，同時阻斷了HO-1缺失細胞的增殖、遷移和炎癥。進一步的機制研究表明，丹酚酸B是通過活化核因子E2相關因子(nuclear factor-E2-related factor 2, Nrf2)，進而誘導HO-1的表達，從而抑制血管細胞的增殖、遷移和炎癥，進而發(fā)揮抗動脈粥樣硬化的作用。

1.5 丹酚酸B能夠有效降低門靜脈高壓Tian等[15]采用內(nèi)皮素1(endothelin-1, ET-1)誘導小鼠門靜脈高血壓，考察丹酚酸B對門脈高壓小鼠肝臟內(nèi)血液微循環(huán)的影響，結(jié)果表明，與對照組相比，丹酚酸B能夠明顯降低門脈高壓小鼠肝臟內(nèi)的平均血流和微循環(huán)流速，進而發(fā)揮降低門脈高壓的作用。Zhao等[16]研究表明，丹酚酸B能夠降低大鼠的門靜脈高壓，并且研究發(fā)現(xiàn)丹酚酸B主要是借助大鼠肝臟內(nèi)的巨噬細胞而發(fā)揮作用。

2 丹酚酸B調(diào)控心血管效應的機制

2.1 Akt-eNOS信號介導丹酚酸B對MI/R損傷的保護作用研究發(fā)現(xiàn)，Akt-eNOS是再灌注損傷補救酶(reperfusion injury salvage kinase, RISK)信號轉(zhuǎn)導通路的組成之一，通過影響下游相關蛋白的表達，進而對心臟產(chǎn)生保護作用。在這一通路中，Akt處在中心環(huán)節(jié)，也是最主要的靶酶，只有磷酸化的Akt才能發(fā)揮一系列的生物 活性[17]。周丹等[18]通過結(jié)扎冠狀動脈制備大鼠MI/R損傷模型，考察丹酚酸B對MI/R損傷大鼠的保護作用，研究表明，丹酚酸B可增加Akt的磷酸化水平進而導致其活化，活化的Akt進一步激活其下游靶標eNOS使其磷酸化，進而通過下游一系列的生物效應發(fā)揮對MI/R損傷的保護作用。

2.2 TLR4-NFκB-TNF-α炎癥通路介導丹酚酸B保護心肌細胞損傷Wang等通過用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)誘導新生大鼠心肌細胞炎癥損傷，并探討丹酚酸B對心肌細胞損傷的保護作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，給予LPS后該組的乳酸脫氫酶和腫瘤壞死因子-α的濃度明顯高于其他組，表明造模成功；而給予丹酚酸B處理后，LDH和TNF-α的濃度明顯下降。與此同時，免疫組化結(jié)果顯示，給予LPS后，Toll樣受體4(toll-like receptors,TLR4)和NF-κB的表達明顯升高；而給予丹酚酸B后，TLR4和NF-κB的表達明顯下降[19]。說明在用LPS誘導新生大鼠心肌細胞損傷的早期階段，TLR4-NF-κB-TNF-α通路被迅速激活，而丹酚酸B發(fā)揮保護心肌細胞損傷的作用，很可能是通過抑制該通路來實現(xiàn)的。

2.3 自噬介導丹酚酸B保護心肌細胞損傷Han等[20]通過實驗考察自噬對饑餓心肌細胞的影響，同時觀察丹酚酸B對饑餓心肌細胞中自噬的效應。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，心肌細胞饑餓3 h后會誘發(fā)自噬，進而導致細胞損傷，并且發(fā)現(xiàn)饑餓細胞中的LC3-Ⅱ的表達呈現(xiàn)時間依賴性的增加；而給予丹酚酸B后，能夠明顯抑制 LC3-Ⅱ的增加，同時細胞活力及心肌細胞中ATP的水平也明顯增加。該研究表明丹酚酸B能夠通過阻斷過度自噬，進而發(fā)揮保護作用。

2.4 線粒體凋亡途徑介導丹酚酸B抑制心肌梗死后心肌細胞的凋亡張萌等[21]通過結(jié)扎冠脈左前降支構建大鼠心肌梗死模型，進而考察丹酚酸B對心肌梗死大鼠心肌細胞凋亡的影響。結(jié)果表明，丹酚酸B可以明顯降低心肌細胞的凋亡率。作者進一步考察丹酚酸B對凋亡相關基因表達的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹酚酸B可以明顯降低Bax的表達，同時發(fā)現(xiàn)丹酚酸B也明顯降低了STAT-3及IL-6的表達。這表明線粒體凋亡途徑參與調(diào)控了丹酚酸B 抑制心肌梗死后心肌細胞的凋亡。

3 針對現(xiàn)有研究臨床開展丹酚酸B治療心血管疾病的策略

大量研究已表明，丹酚酸B能夠?qū)Πㄐ募」Ｋ?、心肌缺?再灌注在內(nèi)的多種心血管疾病發(fā)揮保護作用，但我們不難發(fā)現(xiàn)這些研究主要限于動物體內(nèi)研究，其在臨床的研究非常少，究其原因，一是因為丹酚酸B治療心血管疾病的作用機制仍然沒有闡釋清楚；二是因為心血管本身也是一個復雜的調(diào)控網(wǎng)絡，丹酚酸B在這一調(diào)控網(wǎng)絡中究竟扮演怎樣的角色仍需努力探索。那么，臨床該如何開展丹酚酸B治療心血管疾病的研究呢？我認為應該從以下三點入手：(1) 首先對市面上含丹酚酸B為的制劑進行臨床效應篩選，找到對大部分心血管疾病患者有效的制劑類型。目前臨床上應用的含丹酚酸B的制劑類型主要包括丹參凍干粉、丹酚酸膠囊及含丹酚酸B 的注射液。丹參凍干粉的優(yōu)點主要是外部環(huán)境如光照、溫度及臨床稀釋液對其所含丹酚酸B的穩(wěn)定性無明顯影響，有效期相對其他劑型明顯延長；缺點是臨床應用中無法準確的對丹酚酸B進行定量。丹酚酸膠囊的優(yōu)點主要是便于吞服及掩蓋藥物的不適味道；缺點是生物利用度低，遇高溫、熱容易分解。丹酚酸B的注射液的優(yōu)點主要是藥物直接進入血液，可使血液藥物濃度迅速到達峰值，發(fā)揮作用迅速；缺點是臨床使用中其安全性及機體適應性差，易給患者帶來危害。(2) 在確保含丹酚酸B制劑的劑型得到正確應用的同時，對使用含丹酚酸B制劑治療心血管疾病的患者進行后續(xù)跟蹤，對其治療效果進行跟蹤記錄，并構建相關評價體系，如患者使用該藥物后疾病是否得到有效緩解以及患者長期用藥后有無明顯不良反應等，從而對其效果進行客觀評價；(3) 優(yōu)化上述得到的效果評價，如發(fā)現(xiàn)患者有不良反應后及時調(diào)整藥物的用量及用藥次數(shù)，并在此基礎上進一步開展丹酚酸B在臨床心血管疾病治療中的應用，以期獲得最佳治療效果。

4 小結(jié)

大量研究已證實丹酚酸B對多種心血管疾病如心肌梗死、動脈粥樣硬化及心肌缺血/再灌注損傷具有保護作用。近些年來關于丹酚酸B調(diào)控心血管疾病的相關作用機制也不斷被揭示，這為丹酚酸B在臨床的推廣應用提供了很多理論依據(jù)。但我們同時也看到有關丹酚酸B作用機制的研究并不深入，機理仍然不清，如Akt-eNOS信號通路是通過何種機制被激活，以及該通路活化后如何發(fā)揮心肌保護作用還有待進一步研究等等。相信隨著臨床研究的全面開展，有關丹酚酸B在心血管疾病中應用的研究必將產(chǎn)生更多、更深入的研究成果。

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Research progress of salvianolic acid B in cardiovascular diseases

LIN Chao1, LIU Zhao-guo1, QIAN Xing1, YAO Yuan1,XU Bin1,BIAN Hui-min1,2

(1.CollegeofPharmacy,NanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing210046,China; 2.JiangsuKeyLaboratoryforPharmacologyandSafetyEvaluationofChineseMateriaMedicine,Nanjing210023,China)

Cardiovascular disease is a serious threat to human health and quality of life, and it has become the leading cause of death in human. Thus, looking for effective drugs to reduce the mortality and morbidity of such a disease has become a problem to be solved. Due to its good efficacy of activating blood circulation and dissipating blood stasis, salvia miltiorrhiza has been widely used in the treatment of cardiovascular disease and obtained a good curative effect. Salvianolic acid B is one of the main water-soluble components of salvia miltiorrhiza extract and studies have shown that salvianolic acid B possesses many biological activities, which not only has a good protective effect on myocardial infarction, but could significantly alleviate myocardial ischemia-reperfusion injury. This article reviews the research progress of salvianolic acid B in cardiovascular diseases, and also includes discussion about the mechanisms of salvianolic acid B in the regulation of cardiovascular diseases, which may provide references for follow-up research and clinical treatment.

salvianolic acid B; myocardial infarction; ischemia-reperfusion; cardiomyocyte hypertrophy; molecular mechanisms; therapeutic strategies

時間：2015-3-16 15:41 網(wǎng)絡出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20150316.1541.006.html

2014-09-17,

2015-01-17

國家自然科學基金資助項目(No 81173190)；江蘇省中管局項目(No LZ11191)；國家科技部“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(No 2011ZX09102-002-07);江蘇省高校優(yōu)勢學科建設工程資助項目(No ysxk-2010)；南京中醫(yī)藥大學中藥學一級學科開放課題資助(No 2011zyx4-004)

林 超(1989-)，男，博士生，研究方向:心血管藥理學，E-mail:331476864@qq.com； 卞慧敏(1958-)，女，研究員，博士生導師，研究方向:心血管藥理學，通訊作者,E-mail:hmbian@sina.com

10.3969/j.issn.1001-1978.2015.04.002

A

1001-1978(2015)04-0449-04

R-05；R284.1；R322.11；R329.25；R542.22；R543.5；R972