豬乙型腦炎病毒的乳膠凝集試驗(yàn)

楊春貴

（云南景東彝族自治縣文井鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,云南景東 676201）

豬乙型腦炎病毒的乳膠凝集試驗(yàn)

楊春貴

（云南景東彝族自治縣文井鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,云南景東 676201）

豬日本乙型腦炎是由日本腦炎病毒引起的一種人畜共患傳染病。豬感染后表現(xiàn)為高熱、流產(chǎn)、產(chǎn)死胎及公豬睪丸炎。本病嚴(yán)重影響生豬生產(chǎn)的發(fā)展，并對人類的健康造成威脅。2014年，采用血清學(xué)的乳膠凝集試驗(yàn)對本病的病原體進(jìn)行了檢測，從文井鎮(zhèn)、錦屏鎮(zhèn)等5個規(guī)模豬場，采集豬血清76份進(jìn)行病原學(xué)檢測，檢出陽性血清19份，陽性率25.00%。

1 材料

1.1 儀器和試劑

5 ml一次性真空負(fù)壓采血管、離心機(jī)、移液管、微量反應(yīng)板、載玻片等。試劑用武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司生產(chǎn)的豬乙型腦炎檢測試劑盒（包括陽性對照血清1瓶（2 ml/瓶）、陰性對照血清1瓶（2 ml/瓶）、乳膠抗原1瓶（2 ml/瓶）、稀釋液）。

1.2 血清采集

在文井鎮(zhèn)、錦屏鎮(zhèn)等5個規(guī)模豬場，隨機(jī)用5 ml一次性真空負(fù)壓采血管采集豬血清76份（其中能繁母豬36份，種公豬5份，育成豬35份）。填寫采血登記表，血樣置室溫 3 h，待血液在負(fù)壓采血管中充分凝固，3 000 r/min 離心20min，常規(guī)分離血清，冰凍保存待檢。

2 用法與判定

2.1 定性試驗(yàn)

取被測樣品（血清或全血）陽性對照血清、陰性對照血清、稀釋液各一滴（20μl），分別置于玻片上，各加乳膠抗原一滴（20ul），攪拌混勻大小1cm，并搖動1～2min，于3～5min內(nèi)觀察結(jié)果。

2.2 定量試驗(yàn)

先將被測樣品在微量反應(yīng)板內(nèi)作連續(xù)稀釋，各取一滴（2μl）依次滴加于玻片上，另設(shè)對照同上，隨后各加乳膠抗原一滴（20μl），如上攪拌并搖動，判定。

2.3 結(jié)果判定

凝集反應(yīng)強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)：“++++”全部乳膠凝集，顆粒聚于液滴邊緣，液體完全透明；“+++”大部分乳膠凝集，顆粒明顯，液體稍混濁；“++”約50%乳膠凝集，但顆粒較細(xì)，液體較混濁；“+”有少許凝集，液體呈混濁狀；“-”液滴呈原有的均勻乳狀。

2.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

當(dāng)陽性對照血清加抗原呈“++++”凝集；陰性對照血清加抗原呈“-”凝集；抗原加稀釋液呈“-”凝集，以呈現(xiàn)“++”及其以上凝集反應(yīng)判為陽性。

3 結(jié)果

呈現(xiàn)“++”及其以上凝集反應(yīng)19份，陽性率25.00%，其中能繁母豬12份，占陽性的63.16%，種公豬2份，占10.53%，育肥豬26.31%。

4 本病防控體會

4.1 生物安全措施

蚊是乙腦的傳播媒介，豬是擴(kuò)散宿主，夏秋季乙腦病毒在蚊→豬→蚊之間循環(huán)。因此在蚊滋生的夏秋季節(jié)進(jìn)行滅蚊。

4.2 淘汰病豬，加強(qiáng)消毒

確診病豬最好淘汰，豬圈及用具要經(jīng)常消毒。死胎、胎盤等進(jìn)行無害化處理。

4.3 做好免疫接種

特別是要按免疫程序做好繁殖母豬及種公豬的免疫接種，于每年3月份（蚊蟲出現(xiàn)前1個月），使用乙型腦炎疫苗間隔1個月免疫兩次。

[1] 吳清民，蘇敬良.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2001.

[2] 蔡寶祥，沈正達(dá).家畜傳染病學(xué)[M].農(nóng)業(yè)出版社，1984.