摘要：以靜水法測試了苯酚對斑馬魚的24小時、48小時、72小時和96小時急性毒性，結(jié)果表明：苯酚對斑馬魚的24小時、48小時、72小時和96小時 LC50值分別為47.42毫克/升、42.462 毫克/升、39.355 毫克/升和39.355 毫克/升;苯酚的安全濃度為10.216 毫克/升，屬于中毒化合物。

關(guān)鍵詞：苯酚;烷基酚;斑馬魚;急性毒性

中圖分類號： X171.5 ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼： ?A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI編號： ? 10.14025/j.cnki.jlny.2015.01.034

苯酚是生產(chǎn)某些樹脂、殺菌劑、防腐劑以及藥物（如阿司匹林）的重要原料。常溫下微溶于水，易溶于有機溶液;有腐蝕性，毒性，接觸后會使局部蛋白質(zhì)變性，是我國水中優(yōu)先控制的污染物。

1 材料與方法

1.1 材料

苯酚（CP， 上海試劑一廠），丙酮（CP，天津市化學制劑廠）。

試驗用水為充分曝氣的自來水， p小時為7.52±0.25，硬度為229.14±0.45（毫克/升，以碳酸鈣計），溶解氧為6.7±0.6 毫克/升，水溫控制在28±2℃。

斑馬魚體長30.28±2.74毫米。在實驗室水族箱馴養(yǎng)一周后方可進行試驗。

1.2方法

首先做預備實驗以確定兩種烷基酚類化合物對斑馬魚的100%致死濃度LC100和不引起死亡的最大濃度LC0。然后在預實驗基礎(chǔ)上按等對數(shù)間距設(shè)置5個實驗濃度組，包括24小時 LC100和 LC0。濃度分別為：26 毫克/升、33.8 毫克/升 、43.94 毫克/升、57.12 毫克/升 、74.26 毫克/升。每個濃度點進行3個平行實驗，以死亡率作為觀察指標，參照改進寇氏法，計算24 小時、48小時、72小時和96小時的LC50和置信區(qū)間。

LC50 = lg-1[Xk-d （∑Pi-0.5）] ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? （1）

式中，Xk為最高劑量對數(shù)，d為相鄰濃度比值的對數(shù)，Pi為各組動物死亡率（以小數(shù)表示）。

LC5095%可信限：

95% 置信限 = lg-1（lg LC50±1.96slg LC50） ? ? ? （2）

slgLC50=d[（∑Pi-∑Pi2）/n]1/2 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? （3）

式中n為各組魚數(shù)，d為相鄰濃度比值的對數(shù)。

2 結(jié)果與討論

2.1苯酚對斑馬魚的半數(shù)致死濃度及安全濃度

苯酚溶液中斑馬魚的死亡數(shù)據(jù)見表 1，不同時段的LC50見表2。

根據(jù)表1和表2結(jié)果，參照安全濃度的計算方法48小時 LC50×0.3（24小時 LC50/48小時 LC50）2 ，估算出苯酚的安全濃度為10.216毫克/升。

2.2 斑馬魚對苯酚的毒性反應(yīng)

實驗中，不同濃度組試驗魚的中毒程度不同。最高濃度組，斑馬魚剛接觸到試液時均出現(xiàn)體色變深現(xiàn)象，其余較低濃度組，體色變化不明顯。

最高濃度組魚一接觸到試液表現(xiàn)出明顯的中毒癥狀，游速增大，沖撞，48小時內(nèi)基本全部死亡。較低濃度組魚剛接觸到試液也表現(xiàn)出游速減慢，呼吸困難等癥狀，且死亡率隨暴露時間增長和暴露濃度增大而增加。

2.3 結(jié)論

通過本次急性毒性實驗，得出苯酚對斑馬魚的48小時 LC50為42.462 毫克/升，安全濃度為10.216毫克/升。根據(jù)國家環(huán)保局《水和廢水監(jiān)測分析方法》（2002） 中的相關(guān)規(guī)定對苯酚進行毒性分級。苯酚屬于中等毒性?？赡苁怯捎邴}度、溫度、溶解氧和p小時值等理化因子的改變對酚類化合物的毒性產(chǎn)生了影響。因此，有必要進一步探討不同環(huán)境因素下毒物毒性的變化，以便更接近于實際應(yīng)用。

從中毒癥狀來看，各染毒組死亡現(xiàn)象集中在48小時以內(nèi)，72小時后死亡率幾乎沒有什么變化。這表明它們可能對魚體的蓄積毒性較小，但此結(jié)論正確與否還需進一步試驗證明。

參考文獻

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作者簡介：房妮，碩士，寶雞文理學院，講師，研究方向：環(huán)境化學與退化生態(tài)環(huán)境恢復。