雷玉明 河西學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，甘肅 張掖734000；

甘肅河西走廊特色資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 張掖734000

閆治斌 （敦煌種業(yè)有限公司玉門分公司，甘肅 酒泉735000）

鄭天翔 （河西學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，甘肅 張掖734000）

王棟 （敦煌種業(yè)有限公司玉門分公司，甘肅 酒泉735000）

王玉萍 （甘肅省金塔縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，甘肅 金塔735300）

謝軍 （敦煌種業(yè)有限公司玉門分公司，甘肅 酒泉735000）

柴文玉 （甘肅省酒泉市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，甘肅 酒泉735000）

楊芳蘭 （甘肅省武威市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，甘肅 武威733000）

河西走廊是全國(guó)最大的玉米制種基地。隨著全球氣候變化、耕作方式改變、新品種推廣、種植面積擴(kuò)大，且自交系抗病資源貧乏，又多年連作和耕作質(zhì)量下降，近千份的玉米品種（系）和種質(zhì)材料無(wú)序引入，造成感病品種（系）種子帶菌和土壤病原菌積累，病害種類不斷增加，一度曾被控制的病害黑粉病再度爆發(fā)流行，一些次要病蟲害上升為主要病蟲害，新的病蟲害不斷出現(xiàn)，直接威脅和制約河西走廊玉米生產(chǎn)的發(fā)展和產(chǎn)量提高。截至目前，對(duì)河西走廊制種玉米田病害種類數(shù)量、為害分布還不詳。為此，2013～2014年筆者對(duì)河西走廊玉米制種田病害進(jìn)行了田間調(diào)查和診斷，以查明制種玉米的病害種類，為玉米病害的防治與檢疫及玉米的品種選育與引種提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查基點(diǎn)

選擇制種玉米相對(duì)集中的酒泉市的敦煌市、肅州區(qū)、金塔縣，張掖市的甘州區(qū)、臨澤縣、高臺(tái)縣，武威市的永昌縣、涼州區(qū)、古浪縣，白銀市的景泰縣等地作為調(diào)查基點(diǎn)，每基點(diǎn)選擇3個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)），每個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）選擇3個(gè)村（社），每個(gè)村（社）選擇3塊不少于3335m2制種玉米田進(jìn)行調(diào)查，共計(jì)選擇30個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)），90個(gè)村（社），270塊制種玉米田。

1.2 標(biāo)本采集

針對(duì)不同品種，在調(diào)查基點(diǎn)按照玉米苗期、大喇叭口期、吐絲散粉期、成熟期4期分別進(jìn)行1次調(diào)查采集。注意采集不同時(shí)期不同發(fā)病部位、不同癥狀葉片、莖桿、果穗、植株等，認(rèn)真記載為害部位、病狀特點(diǎn)、生境等，并用吸水紙壓制成蠟葉標(biāo)本。對(duì)于病征典型的標(biāo)本，浸入乳酚油中以便室內(nèi)鑒定。對(duì)于無(wú)病征標(biāo)本，裝入冰袋或冰瓶中進(jìn)行室內(nèi)病原分離。

1.3 癥狀觀察

在采集的同時(shí)，根據(jù)不同生育期，觀察發(fā)病部位及其病狀、病征的特點(diǎn)。用直尺或游標(biāo)卡尺測(cè)量病斑大小，并與健康植株進(jìn)行比較，記載發(fā)病后的狀況。

1.4 病情調(diào)查

每塊制種田，采用隨機(jī)雙對(duì)角線5點(diǎn)取樣，以行為單位，每個(gè)樣點(diǎn)調(diào)查父、母本各50株，樣點(diǎn)距田邊地頭3m，調(diào)查統(tǒng)計(jì)發(fā)病率，依據(jù)發(fā)病率或病葉（穗、株）率確定病情，劃分不發(fā)病、輕微、中等、嚴(yán)重4級(jí)記載，用“0”、“＋”、“‘”、“”等符號(hào)表示。分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下所述。

1）葉部病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 無(wú)?。?，植株無(wú)病葉；輕微：（＋），病葉在20%以下；中等：（），病葉在20%～50%；嚴(yán)重：（），病葉在50%以上。

2）根、莖部病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 無(wú)?。?，植株無(wú)病株；輕微：（＋），病株在10%以下；中等：（），病株在10%～25%；嚴(yán)重：（），病株占調(diào)查總株數(shù)25%以上。

3）穗部病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 無(wú)病：0，植株無(wú)病穗；輕微：（＋），病穗占調(diào)查總株數(shù)5%以下；中等：（），病穗占調(diào)查總株數(shù)10%～15%；嚴(yán)重：（），病穗占調(diào)查總株數(shù)20%以上。

1.5 鑒定

1.5.1 直接鏡檢

挑取病部表面的菌體，制成臨時(shí)玻片，在顯微鏡下觀察菌絲、孢子體類型、形態(tài)、顏色等特征，并用測(cè)微尺測(cè)量其大小。對(duì)于產(chǎn)生花葉、條紋、叢生、矮縮等癥狀的標(biāo)本，用鑷子撕取組織的下表皮，自制水浸片觀察表皮細(xì)胞中內(nèi)含體。對(duì)于存在有內(nèi)含體標(biāo)本，采用電鏡觀察病毒粒子，確定病毒病害［1］。

1.5.2 病原菌分離

將采集的無(wú)病征新鮮病葉（穗、莖等）用無(wú)菌水沖冼后，剪取病健交組織約0.2mm，在無(wú)菌條件下用PDA培養(yǎng)基進(jìn)行分離，4d后觀察菌落、菌絲、孢子特征，并挑取單個(gè)菌落純化，將純化后的菌株置于斜面保存。

1.5.3 致病性測(cè)定

將分離得到的菌株，配制成濃度1×10～1×105cfu／mL的孢子懸浮液，采用發(fā)芽盒種植玉米苗，當(dāng)苗長(zhǎng)至3葉期時(shí)，噴上孢子懸浮液，并保濕24h，以噴無(wú)菌水為對(duì)照（CK），觀察接種后玉米苗發(fā)病癥狀是否與田間癥狀相同，再分離病原物與已純化病原物是否相同。

1.5.4 定名

根據(jù)癥狀特點(diǎn)、病原形態(tài)，查閱國(guó)內(nèi)玉米病害研究資料［2，3］，確定病原種類和病害名稱。

2 調(diào)查結(jié)果

經(jīng)田間調(diào)查和病原鑒定，結(jié)果如下。

2.1 玉米真菌性病害病原

1）黑束?。ˋcremoniumstrictumW.Cams.），（＋）

2）黑腐病 ［Acladiumtenellum（Berk.＆Curt.）Subram.comb.now］，（＋）

3）黑斑病 ［Alternariaalternata（Fr.）Keissler.］，（）

4）鏈格孢葉枯病 ［Alternariatenuissima（Fr.）Wiltshire］，（）

5）紫斑?。ˋlternariasp.，F(xiàn)usarumsp.，Clatosporiumsp.），（＋）

6）鏈格孢鞘腐病（Alternariasp.），（）

7）曲霉穗粒腐病（AspergillusflavusLink），（＋）

8）眼斑病 ［Aureobasidiumzeae（NaritaetHiratsuka）Dingly］，（＋）

9）離蠕孢穗腐病 ［Bipolarismaydis（NisikadoetMiyabe）Snoemaker］，（＋）

10）圓斑病 ［Bipolariszeicola（G.L Stact）Shoemaker］，（＋）

11）蠕孢葉斑病 ［Bipolarissorokiniana（Sacc.）Shoemaker］，（＋）

12）蠕孢莖基腐病 ［Bipolarissorokiniana（Sacc.）Shoemaker］，（＋）

13）球色單隔孢莖基腐?。˙itryodiplodiatheobromaePat.），（＋）

14）小斑病 ［Bolarismaydis（NisikadoetMiyake）Shoem］，（＋）

15）灰斑病（Cercosporazeae－maydisTehon Daniels），（＋）

16）尾孢葉斑?。–ercosporasorghiEll.Ev.），（）

17）枝孢霉條斑?。–ladosporiumzeaePeck），（）

18）黑霉?。–ladosporiumherbarum（Pers.）L.），（＋）

19）炭疽病 ［Colletotrichumgraminicola（Ces）Wils.］，（＋）

20）禾生炭疽莖基腐病 ［Colletotrichumgraminicola（Ces）Wils.］，（＋）

21）小殼菌條斑?。–oniothyriumzeaeStout），（＋）

22）彎孢霉葉斑病 ［Curvularialunata（Wakker）Boed.］，（＋）

23）色二孢苗枯病 ［Diplodiazeae（Schw.）Lev.］，（＋）

24）干腐病 ［Diplodiazeae（Schw.）Lev.］，（＋）

25）附球菌葉斑病（EpicoccumnigrumLink.），（）

26）大斑病 ［Exserohilumturcicum（Pass.）LeonardetSuggs］，（）

27）嘴突凸臍蠕孢條斑?。‥xserohilumrostratumShom.），（＋）

28）鐮孢鞘腐?。‵usariumgraminearum，F(xiàn).monilifora），（）

29）根腐?。‵usariumgraminearum，F(xiàn)usarummoniliforme，F(xiàn).solani，Pythiumgraminicola），（＋）

30）鐮霉莖基腐病（Fusariumgraminearum，F(xiàn)usarummoniliforme），（）

31）鐮孢霉穗腐?。‵usariumgraminearum，F(xiàn)usarummoniliforme），（）

32）頂腐?。‵usarummoniliformevar.subglutinansWr.＆ Rank），（）

33）鐮孢霉苗枯?。‵usarummoniliforme，F(xiàn).graminearum），（）

34）全蝕病 ［Gaeumannomyeesgraminis（Sacc.）Arx.etOlivier var.maydisYAO.］，（＋）

35）豹紋病（GloeocercosporasorghiD.Bain ＆ Edg.），（＋）

36）炭腐莖基腐病 ［Macrophominaphaseolina（Maubl.）Ashby.］，（＋）

37）球腔菌葉枯病（MycosphacerellazeicolaStcut），（＋）

38）裂軸病 ［Nigrosporaoryzea（Berk.etBr）Petch］，（＋）

39）青霉穗腐?。≒enicilliumoxalicumCurrieetThom），（＋）

40）莖點(diǎn)霉葉枯?。≒homamaydisFautrey），（）

41）葉點(diǎn)霉葉斑?。≒hyllostictazeaeStout），（＋）

42）褐斑?。≒hysodermamaydisMiyabe），（＋）

43）普通銹?。≒ucciniasorghiSchw），（）

44）多堆銹?。≒ucciniapolysoraUnderw.），（）

45）腐霉莖基腐?。≒ythiumgramincolaSubra.），（＋）

46）腐霉苗枯?。≒ythiumgramincolaSubra.），（）

47）紋枯病 ［RhizoctoniasolaniKühn），（）

48）絲核菌穗腐?。≧hizoctoniazeaeVoorheer），（）

49）煤污?。≧hizopusmaydisBruderlein），（＋）

50）禾生霜霉病 ［Sclerosphoragraminicola（Sacca.）Schreot］，（＋）

51）指疫霜霉病（瘋頂?。跾clerophthoramacrospora（Sacca.）Thium.，ShawetNaras.var.maydisLiuetzhang］，（＋）

52）菌核病 ［Sclerotiniasclerotiorum（LID.）de Bary］，（＋）

53）殼針孢斑枯病（SeptoriamaydisSchulzeretSaccardo），（＋）

54）絲黑穗病 ［Sporisoriumreilianum（Kuhn.）Langdon ＆Fulleton］，（）

55）木霉穗腐?。═richodermaviridePers.etFr），（＋）

56）黑粉病 ［Ustilagomaydis（de Candolle）Corda］，（）

2.2 玉米細(xì)菌性病害病原

1）條斑病 ［Pseudomonasandroponogi（E.F.Smith）Stapp.］，（）

2）葉枯?。≒seudomonasavenae），（＋）

3）莖基腐?。‥rwiniachrysanthemipv.zeae），（）

4）褐斑?。≒seudomonassyringaepv.syringaeVan Hall），（＋）

2.3 玉米病毒性病害病原

1）黃矮?。˙arley Yellow Dwarf Virus），（＋）

2）條紋矮縮?。∕aize Strigo Dwars Virus），（＋）

3）叢矮病（Northem Cereal Mosaic Virus），（＋）

4）粗縮病（Rice Blank－streaked Dwarf Fijivirus），（）

5）矮花葉?。⊿ugarcane Mosaic Virus－maize Drawf Strain B），（）

2.4 玉米生理性病害病原

4）黃化苗（遺傳性病害），（＋）

5）生理性紅葉?。ㄟz傳性病害），（＋）

3 討論

國(guó)內(nèi)對(duì)玉米病害種類報(bào)道多集中于大田玉米，1995年白金鎧等［2］報(bào)道我國(guó)玉米病害72種，其中真菌性病害46種，細(xì)菌性病害7種，病毒性病害19種。但對(duì)制種玉米病害的種類、發(fā)生情況國(guó)內(nèi)報(bào)道較少，特別是對(duì)全國(guó)最大玉米制種基地——河西走廊制種玉米病害尚未見系統(tǒng)性報(bào)道資料。經(jīng)筆者調(diào)查和鑒定，發(fā)現(xiàn)制種玉米病害73種，其中真菌性病害56種，細(xì)菌性病害4種，病毒病害5種，生理性病害8種。在這一地區(qū)制種之前玉米病害種類報(bào)道更少，1982年在《甘肅農(nóng)作物病蟲害》記載玉米病害7種［2］，1983年張掖地區(qū)病蟲害普查資料記載玉米病害的種類僅有18種，其中真菌病害16種，病毒病害2種［5］。自20世紀(jì)90年代初開始制種以來(lái)，玉米病害發(fā)生很大演變。從發(fā)生種類數(shù)量來(lái)看，河西走廊玉米制種之前病害數(shù)量不及全國(guó)病害水平的25%，制種之后達(dá)到全國(guó)玉米病害水平。至目前制種玉米病害的數(shù)量是該地區(qū)制種前病害數(shù)量的4.06倍，說(shuō)明制種玉米病害的數(shù)量變化在不斷增長(zhǎng)，是由于過(guò)去張掖玉米種植品種單一、調(diào)運(yùn)數(shù)量少、種子交換渠道簡(jiǎn)單，玉米生產(chǎn)上發(fā)生的病蟲害種類少、基數(shù)低、危害輕、變化小、易控制。目前玉米親本材料涉繁交流和傳播，導(dǎo)致該地區(qū)病害數(shù)量發(fā)生變化，應(yīng)引起制種管理、檢疫、生產(chǎn)企業(yè)的高度重視。

從玉米病害發(fā)生為害情況分析，1983年原張掖地區(qū)病蟲害普查中，發(fā)現(xiàn)發(fā)生嚴(yán)重的玉米絲黑穗病，平均發(fā)病率達(dá)2.5%～5%，玉米根腐病、玉米青枯?。ㄇo基腐?。?、玉米紫斑病、玉米大（?。┌卟　⒂衩琢龊诜鄄?、玉米葉枯病、玉米霜霉病等病害零星發(fā)生，為害輕，一般發(fā)病率均在0.4%～4%以下，造成的損失不大。2013～2014年調(diào)查結(jié)果顯示，發(fā)生嚴(yán)重真菌性病害玉米鐮孢鞘腐病、頂腐病、鐮霉莖基腐病、鏈格孢鞘腐病、銹病、黑粉病、鐮孢霉穗腐病、鐮孢霉苗枯病、腐霉苗枯病等9種，嚴(yán)重的病毒病害玉米矮花葉病1種，嚴(yán)重非侵染性病害玉米遺傳性條紋病、遺傳性斑點(diǎn)病、生理性黃斑病等3種，在制種田的發(fā)病率超過(guò)50%，生理性病害在個(gè)別品種組合上發(fā)病率達(dá)100%。中等發(fā)生的病害18種，發(fā)病輕的病害42種，除了大（?。┌卟?、禾谷鐮孢霉莖基腐病、瘋頂病、紫斑病等無(wú)發(fā)生變化外，其余病害在該地區(qū)均屬于新發(fā)病害，在玉米制種生產(chǎn)上應(yīng)注意監(jiān)視病情變化。

［1］孫廣宇，宗兆鋒.植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù) ［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2002.

［2］白金鎧.雜糧作物病害 ［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1997.

［3］王曉鳴，戴法超，廖琴.玉米病蟲害田間手冊(cè) ［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社，2002.

［4］甘肅農(nóng)作物病蟲害編輯委員會(huì).甘肅農(nóng)作物病蟲害 ［M］.蘭州：甘肅人民出版社，1984.

［5］張掖地區(qū)病蟲害調(diào)查組.甘肅省張掖地區(qū)農(nóng)作物病害名錄 ［R］.張掖：張掖農(nóng)業(yè)學(xué)校，1984.