程玉萍

淋巴細胞是免疫系統(tǒng)中起核心作用的主要細胞，在人體不斷生長、發(fā)育、成熟的過程中，淋巴細胞的功能和特性也在發(fā)生變化。 機體的免疫功能與免疫表型密切相關(guān)，檢測淋巴細胞亞群可了解不同情況下機體的免疫功能狀態(tài)，對監(jiān)控疾病的發(fā)生，探索其發(fā)病機制，指導臨床治療有重要的價值。近年來，越來越多的資料顯示，兒科多種疾病的發(fā)生、發(fā)展與機體免疫功能異常有關(guān)[1-2]。 本文就淋巴細胞亞群與兒科多種疾病的關(guān)系以及在臨床診療中的應(yīng)用進展進行綜述。

1 淋巴細胞亞群結(jié)構(gòu)及其功能

淋巴細胞作為免疫系統(tǒng)的重要細胞成分，按其功能和性質(zhì)分為T 細胞、B 細胞和NK 細胞。T 細胞是在胸腺中成熟的淋巴細胞，CD3+是其表面標記。 按免疫表型和功能T細胞分為：輔助/誘導T 細胞(Th)、細胞毒性T 細胞(Tc）/抑制性T 細胞(Ts)和調(diào)節(jié)性T 細胞(Treg),其表面標記分別是CD4+、CD8+、CD4+CD25+。 Th 主要又分為Th1 和Th2 細胞，Th1 分泌γ 干擾素、白細胞介素2(IL-2)；Th2 分泌IL-4、5、6、10 等。Th 主要功能是輔助誘導其他免疫細胞，介導和增強免疫應(yīng)答，促使其他T 細胞分化成熟。 CD4+降低，反映機體免疫功能低下；CD4+增高， 反映機體免疫功能亢進。Tc 能夠特異性殺傷靶細胞，具有抗病毒、抗腫瘤等調(diào)節(jié)作用；Ts 有重要的免疫負調(diào)節(jié)功能；Treg 在抑制免疫應(yīng)答、維持機體免疫耐受及腫瘤免疫中起重要作用[3]。

兒童淋巴細胞免疫表型的表達與胸腺發(fā)育密切相關(guān)，特別是在嬰幼兒時期變化很大，多種免疫分子和細胞從無到有、從少到多、從幼稚到成熟[4]。嬰兒剛出生時，由于胸腺運送大量T 細胞至外周組織，故淋巴細胞處于較高水平，但隨年齡增長而減低。 嬰幼兒期CD4+較多， 且以Th2 為主，CD8+較少，CD4+/CD8+比值較高。 約2 歲后，CD4+、CD8+及其比值逐步接近成人水平[5]。B 細胞是產(chǎn)生抗體的細胞，主要合成和分泌免疫球蛋白，發(fā)揮體液免疫調(diào)節(jié)作用。 其表面標記是CD19+。 NK 細胞又稱為自然殺傷細胞，其表面標記為CD16+/CD56+。 該細胞通過非特異性殺傷等途徑殺傷感染細胞或腫瘤細胞等。 6 個月以下嬰兒體內(nèi)抗體大多是通過胎盤或初乳從母體獲得，對傳染病的預防具有一定作用。 隨著外界抗原物質(zhì)接觸增多、年齡增加及骨髓功能不斷完善,使兒童B 和NK 細胞數(shù)量由少變多，3 歲時已與青春期相近。 正常情況下，兒童機體內(nèi)淋巴細胞亞群保持著一定數(shù)量和比例，當各成分數(shù)量或比例失調(diào)時，機體免疫功能將發(fā)生紊亂， 從而導致多種疾病甚至腫瘤的發(fā)生。

2 淋巴細胞亞群檢測在兒科疾病診療中的應(yīng)用

2.1 感染性疾病

2.1.1 肺炎 肺炎多是緣于病毒、細菌等病原體感染所致的肺部炎癥，是兒科的常見病、多發(fā)病，也是嬰幼兒死亡的主要原因[6]。許多研究顯示，各型肺炎患兒均有免疫功能紊亂。鄭曉莉等[7]對92 例細菌性肺炎、支原體肺炎、病毒性肺炎患兒研究結(jié)果顯示，3 組患兒的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值均顯著降低，細菌性肺炎、支原體肺炎時CD8+水平升高。 說明肺炎患兒機體免疫功能降低，對病原體的清除能力減弱，是肺炎發(fā)生的危險因素之一。該研究還發(fā)現(xiàn)，3 組患兒Treg 均明顯增高， 過高的Treg 抑制了機體免疫應(yīng)答，使大量病原體復制與存活，導致了機體慢性感染狀態(tài)的持續(xù)。

2.1.2 傳染性單核細胞增多癥(infectious mononucleosis，IM) IM 是由EB 病毒（EBV）感染所致的感染性疾病，兒童較常見。 人體B 細胞上具有EBV 受體，故B 細胞先受累。 受累的B 細胞增殖激發(fā)T 細胞及NK 細胞，隨之發(fā)生強烈的免疫反應(yīng)，使患兒出現(xiàn)高熱、咽頰炎及淋巴細胞增生等一系列癥狀[8]。在病程進展中，由于免疫功能不足，可導致機會性感染，甚至有發(fā)生腫瘤的危險[9]。 陸巧英等[10]對40 例IM 患兒研究顯示，IM 患兒的CD3+、CD8+明顯升高，CD4+、CD4+/CD8+比值明顯降低， 表明IM 患兒細胞免疫功能、 調(diào)節(jié)功能都存在異常， 致使機體抗病毒能力減弱，產(chǎn)生IM 相關(guān)癥狀。 因此，掌握IM 患兒淋巴細胞亞群變化規(guī)律，對有效治療尤其是防范EBV 相關(guān)疾病的發(fā)生至關(guān)重要。

2.2 血液病

2.2.1 再生障礙性貧血(aplastic anemia，AA) AA 多數(shù)病因不詳，近年來隨著免疫學技術(shù)的進步，其免疫發(fā)病機制日益受到重視。Jian 等[11]研究發(fā)現(xiàn)，AA 患者外周血Th1/Th2 和Tc1/Tc2 比例明顯升高， 表明AA 患者的Th 和Tc比例失調(diào)，出現(xiàn)了細胞免疫功能紊亂。也有研究報道，與對照組兒童比較，AA 患兒CD4+/CD8+比值明顯倒置，CD4+、CD4+/CD8+比值與Hb、WBC 呈一定程度的負相關(guān)， 表明CD4+細胞中產(chǎn)生造血負調(diào)控因子的細胞即Th1 較高，導致細胞毒性作用增強，造血抑制作用明顯；而CD8+與Hb、WBC 呈一定程度的正相關(guān)，機體出現(xiàn)了Th 格局向Th1 偏移的狀況。這對AA 患兒的臨床診斷及免疫治療有指導意義[12]。

2.2.2 白血病 王艷榮等[13]觀察了71 例急性淋巴細胞白血病(ALL)患兒治療前后T 細胞亞群變化。 發(fā)現(xiàn)ALL 患兒化療前CD3+、CD4+、CD8+與正常兒童比較明顯減低，化療緩解組其指標恢復正常， 而未緩解組其指標無明顯改變，復發(fā)組其指標再次出現(xiàn)異常，提示ALL 患兒存在細胞免疫功能低下，T 細胞的異常程度與疾病進展、緩解、預后有相關(guān)性。 隨后人們發(fā)現(xiàn)，ALL 患兒Treg 數(shù)量明顯增多，常與NK 細胞數(shù)量減少相伴隨。Treg 在體內(nèi)外能有效抑制NK 細胞，致使NK 細胞數(shù)量減少，從而影響了其對腫瘤細胞的廣譜殺傷作用[14]。

2.3 自身免疫病

2.3.1 自身免疫性血小板減少癥(autoimmune thrombocytopenic purpura，AITP) AITP 是以血小板減少、黏膜、皮膚出血為特點好發(fā)于兒童的出血性疾病。 早期研究認為，AITP 是由于血小板被自身抗體致敏再被單核巨噬細胞吞噬破壞所致。 但最新研究顯示，AITP 患者也存在著細胞免疫功能紊亂，并且在AITP 的發(fā)病中起關(guān)鍵性的作用[15]。 張紅等[16]報告，與正常對照組比較，AITP 組CD4+、CD4+/CD8+比值明顯減低，CD8+、CD19+明顯增高,表明AITP患兒機體的T、B 淋巴細胞都出現(xiàn)了異常。 進一步研究發(fā)現(xiàn), 急性組CD19+高于慢性組，CD3+低于慢性組，提示急性AITP 是以體液免疫功能亢進為主, 使用糖皮質(zhì)激素治療最有效；慢性AITP 則以細胞免疫功能亢進為主，應(yīng)用免疫抑制藥物會收到較好的效果。

2.3.2 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 （systemic lupus erythematosus，SLE） SLE 是累及多系統(tǒng)、 多器官臨床表現(xiàn)復雜的自身免疫性疾病。 兒童SLE 較成人臨床癥狀嚴重，預后更差。高姍等[17]報告顯示，SLE 患兒NK 和Treg 明顯降低，表明SLE 患兒存在免疫系統(tǒng)紊亂， 機體不能產(chǎn)生抑制CD4+的作用，在CD4+活化作用下，B 細胞持續(xù)增殖產(chǎn)生多種自身抗體導致組織器官的損傷。 成傳芳等[18]經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)，SLE腎炎患兒T 細胞和Tc 均明顯增高；而Th、Th/Tc 比值、NK細胞明顯低于無腎炎患兒，SLE 患兒的SLEDAI 評分與B細胞呈正相關(guān)，與NK 細胞呈負相關(guān)，表明SLE 患兒體內(nèi)B 細胞的大量增殖與疾病活動性有著密切關(guān)系。

2.4 其他 近年來Treg 的免疫抑制作用在臨床得到很好運用。 Kwon 等[19]證實，益生菌能誘導CD4+CD25-T 細胞向Treg 轉(zhuǎn)化，提高Treg 數(shù)量，從而糾正Th1/Th2 平衡紊亂，是治療兒童哮喘的有效方式。 多項研究顯示，Th17 數(shù)量和功能改變、促炎因子的釋放與自身免疫性葡萄膜炎、膽道閉鎖等疾病有關(guān)[20-21]。 腫瘤患兒化療后T 細胞免疫重建監(jiān)測，對于防治機會性感染及改善腫瘤預后有重要意義[22]。

綜上所述， 檢測淋巴細胞亞群評估機體免疫功能，探討它們在疾病發(fā)生、發(fā)展中的作用，已成為兒科多種疾病診療監(jiān)測的一項重要手段，它能幫助醫(yī)師增強對疾病的認識和提高治愈率，但仍有許多問題尚待解決。 進一步研究和探討淋巴細胞亞群與兒科多種疾病的相互關(guān)系，對于兒童疾病的診治、預防必將具有更大的理論意義和更為廣闊的臨床應(yīng)用前景。

[1] Xiangle Sun, Harlan P, Jones, et al. Dendritic cells are the major antigen presenting cells in inflammatory lesions of murine mycoplasma respiratory disease[J]. PLoS One, 2013, 8(2)：55984.

[2] 許亞茹, 鄭成中, 徐冰心. 淋巴細胞亞群及T 淋巴細胞亞群在過敏性哮喘及肺炎中的意義[J]. 西南國防醫(yī)藥, 2012, 22(9)：940-942.

[3] Sakaguch S, Yamaguchi T, Nomura T, et al. Regulatory T cells and immune tolerance [J]. Cell, 2008, 133(5)：775-787.

[4] Andrew C. Birth season and environmental influences on blood leucocyte and lymphocyte subpopulations in rural Gambian infants[J]. BMC Immunology, 2008, 9(3)：18.

[5] 孫錕. 小兒內(nèi)科學[M]. 北京： 人民衛(wèi)生出版社, 2009.

[6] Jacalyn I . Risk factors and interventions for ventilator associated pneumonia among ventilnted pediatric intensive care unit patients[J]. Pediatr Nursing, 2010, 25(2)：17.

[7] 鄭曉莉, 薛麗華. 肺炎患兒外周血超敏C 反應(yīng)蛋白、降鈣素原及細胞免疫指標變化及意義[J]. 臨床兒科雜志, 2013, 31(1)：22-25.

[8] 趙雪蓮, 王西閣, 王軍, 等. 兒童傳染性單核細胞增多癥112例臨床特點分析[J]. 中國實用醫(yī)刊, 2014, 41(9)：39-41.

[9] Okano M, Gross TG. Acute or chronic life threatening diseases associated with Epstein Barr virus infection[J]. Am J Med Sci,2012, 343(6)：483-489.

[10] 陸巧英, 張旭, 滕懿群. 兒童IM 淋巴細胞亞群的變化及意義[J]. 中國婦幼健康研究, 2014, 25(2)：229-231.

[11] Jian Ping Li, Cui Ling Zheng, Zhong Chao Han, et al. Abnormal immunity and stem progenitor cells in acquired aplastic anemia[J]. Critical Reviews Oncol Hematol, 2010, 75(2)：79-93.

[12] 曹萍, 蔣莎義, 謝曉恬, 等. 兒童再生障礙性貧血淋巴細胞亞群及與血常規(guī)相關(guān)性的研究[J]. 同濟大學學報, 2011, 32(6)：70-73.

[13] 王艷榮, 金潤銘. 兒童急淋白血病血清LDH 及T 淋巴細胞亞群的表達及相關(guān)性研究[J]. 山東醫(yī)藥, 2007, 47(32)：14-15.

[14] Ralainirina N, Poli A, Michel T, et al. Control of NK cell functions by CD4+CD25+Treg ulatory T cells [J]. J Leukoc Biol,2007, 81(6)：144-153.

[15] Provan D, Stasi R, Newland AC. et al. International consensus report on the investigation and management of primary immune thrombocytopenia[J]. Blood, 2010, 46(115)：168-186.

[16] 張紅, 劉慶華, 田芳. 急慢性特發(fā)性血小板減少性紫癜患者外周血淋巴細胞亞群的表達[J]. 中國實用醫(yī)藥, 2014, 9(27)： 25-26.

[17] 高姍, 張惠君, 朱海燕, 等. 系統(tǒng)性紅斑狼瘡患兒外周血淋巴細胞亞群變化[J]. 中國醫(yī)藥科學, 2013, 3(23)：57-59.

[18] 成傳芳, 茹晉麗, 羅靜, 等. 兒童系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血淋巴細胞亞群與疾病活動的研究[J]. 中國藥物與臨床, 2014,14(5)：580-583.

[19] Kwon HK, Lee CG, So JS, et al. Generation of regulatory dendritic cells and CIM +Foxp3 +T cells by probiotics administration supresses immune disorders[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2010, 107(5)：2159-2164.

[20] Jia X, Hu M, Wang C, et al. Coordinated gene expression of Th17- and Treg-associated molecules correlated with resolution of the monophasic experimental autoimmune uveitis[J]. Mol Vis,2011, 17(21)：1493-1507.

[21] Antoniades CG, Khamri W, Abeles RD, et al. Secretory leukocyte protease inhibitor： a pivotal mediator of anti-inflammatory responses in acetaminophen-induced acute liver failure [J].Hepatology, 2014, 59(4)：1564-1576.

[22] Van Den Brink M, Leen AM, Baird K, et al. Enhancing immune reconstitution： from bench to bedside[J]. Biol Blood Marrow Transplant, 2013, 19(Suppl 1)：79-83.