李 芹，唐洪玉，鄭永華，鄧麗蓉

(西南大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院 水產(chǎn)科學(xué)系，重慶 北碚 400715)

禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚生化及非特異性免疫指標(biāo)的影響

李 芹，唐洪玉，鄭永華，鄧麗蓉

(西南大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院 水產(chǎn)科學(xué)系，重慶 北碚 400715)

【目的】 研究禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚生長(zhǎng)、血液學(xué)、生物化學(xué)及非特異性免疫指標(biāo)的影響?！痉椒ā?將厚頜魴幼魚分成4組，分別為對(duì)照組(正常投喂24 d，F(xiàn)0)、禁食3 d后連續(xù)投喂21 d(F3組)、禁食7 d后連續(xù)投喂17 d(F7組)、禁食12 d后連續(xù)投喂12 d(F12組)，在禁食前、禁食后及恢復(fù)投喂后取樣，檢測(cè)其生長(zhǎng)指標(biāo)(體質(zhì)量、體長(zhǎng)、肥滿度、肝體指數(shù)(HSI)、臟體指數(shù)(VSI))、紅細(xì)胞壓積、血清皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度、血糖濃度及血清、肝胰臟和頭腎超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶活性?！窘Y(jié)果】 禁食后，厚頜魴幼魚的肥滿度、肝體指數(shù)、臟體指數(shù)大多顯著降低(P<0.05)，恢復(fù)投喂后均能恢復(fù)至正常水平(F12組VSI除外)。禁食后恢復(fù)投喂對(duì)幼魚的紅細(xì)胞壓積無顯著影響(P>0.05)。F3、F7組幼魚的血糖在禁食后與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)，而F12組幼魚在禁食后血糖濃度顯著下降(P<0.05)，恢復(fù)投喂后各試驗(yàn)組血糖濃度均恢復(fù)至正常水平。禁食后F3組幼魚皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)，而F7、F12組幼魚皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度則極顯著升高 (P<0.01)，恢復(fù)投喂后均恢復(fù)至對(duì)照組(F0)水平。禁食后F3組幼魚血清和肝胰臟SOD活性與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)，F(xiàn)7、F12組幼魚血清和肝胰臟SOD活性顯著降低(P<0.05)，恢復(fù)投喂后血清和F3、F7組肝胰臟SOD活性與對(duì)照組無顯著性差異(P>0.05)，F(xiàn)12組幼魚肝胰臟SOD活性顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚肝胰臟溶菌酶活性無顯著影響(P>0.05)。禁食后F3、F7組幼魚血清溶菌酶活性與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)，F(xiàn)12組幼魚血清溶菌酶活性顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，恢復(fù)投喂后，各試驗(yàn)組血清溶菌酶活性均與對(duì)照組(F0)無顯著差異(P>0.05)。禁食后，F(xiàn)3組幼魚頭腎溶菌酶活性與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)，F(xiàn)7、F12組幼魚頭腎溶菌酶活性顯著降低(P<0.05)，恢復(fù)投喂后，F(xiàn)3、F7組幼魚頭腎溶菌酶活性分別與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)，但F7組幼魚頭腎溶菌酶活性顯著低于F3組，F(xiàn)12組幼魚頭腎溶菌酶活性顯著低于對(duì)照組(P<0.05)?！窘Y(jié)論】 厚頜魴幼魚在禁食3 d投喂21 d時(shí)能達(dá)到完全性補(bǔ)償生長(zhǎng)，也不會(huì)降低幼魚的非特異性免疫水平。建議在厚頜魴養(yǎng)殖過程中采用禁食-再投喂的方式誘導(dǎo)魚類的補(bǔ)償生長(zhǎng)時(shí)，禁食期以不超過4 d為宜。

厚頜魴(Megalobramapellegrini)；禁食-再投喂；生長(zhǎng)指標(biāo)；生物化學(xué)指標(biāo)；非特異性免疫指標(biāo)

在商品魚的養(yǎng)殖過程中，適宜的投喂策略會(huì)明顯降低養(yǎng)殖成本，因此養(yǎng)殖者經(jīng)常會(huì)采取禁食-再投喂的方式誘導(dǎo)魚類的補(bǔ)償生長(zhǎng)。但當(dāng)魚類處于禁食狀態(tài)下會(huì)發(fā)生一系列的行為和適應(yīng)性的生理生化變化來適應(yīng)這種不利的條件[1-2]，而這些適應(yīng)性的變化可能會(huì)影響魚類的養(yǎng)殖福利。多年來對(duì)魚類饑餓脅迫的研究多集中在饑餓對(duì)魚體的生長(zhǎng)、體組成及消化生理等方面。近年來，國內(nèi)外學(xué)者如Morshedi等[3]、Barcellos等[4]、Bayir等[5]探討了禁食對(duì)魚類血液學(xué)及非特異性免疫方面的影響。厚頜魴(Megalobramapellegrini)隸屬于鯉科(Cyprinidae)鲌亞科(Cultrinae)魴屬(Megalobrama)，地方名“烏鳊”、“鳊魚”，是長(zhǎng)江上游重要的經(jīng)濟(jì)魚類[6]。本試驗(yàn)在養(yǎng)殖條件下對(duì)厚頜魴幼魚進(jìn)行禁食后再投喂，測(cè)定了禁食后再投喂幼魚的生長(zhǎng)、部分血液學(xué)、生物化學(xué)及非特異性免疫指標(biāo)，研究了禁食對(duì)厚頜魴幼魚養(yǎng)殖過程中福利的影響，探討了適宜厚頜魴幼魚生長(zhǎng)的投喂策略，以期為厚頜魴的人工養(yǎng)殖奠定一定的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚

厚頜魴幼魚來源于重慶市東平水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，所有幼魚均由同一批受精卵孵化。試驗(yàn)魚在容積為200 L的水族箱暫養(yǎng)1周，投喂水蚯蚓。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

挑選規(guī)格整齊，體格健壯，體質(zhì)量平均為(4.02±0.96) g/尾的幼魚360尾。按下列組別隨機(jī)分組后放入20 L小水族缸進(jìn)行試驗(yàn)。每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)水族缸放魚30尾。F0組(對(duì)照組)：連續(xù)投喂24 d；F3組：禁食3 d后連續(xù)投喂21 d；F7組：禁食7 d后連續(xù)投喂17 d；F12組：禁食12 d后連續(xù)投喂12 d。投喂期間各組幼魚每天投喂3次，時(shí)間分別為上午08:00，中午12:00，晚上18:00，餌料為水蚯蚓，每次投喂1 h后將殘余餌料清除干凈。養(yǎng)殖期間水溫(26.0±0.5) ℃，溶氧(6.79±0.28) mg/L，自然光照。

1.3 樣品采集與處理

1.3.1 樣品采集 各組分別在禁食前、禁食后和整個(gè)試驗(yàn)結(jié)束后取樣，每次取樣時(shí)間均為取樣日的早上08:00(喂食前)，每試驗(yàn)組每個(gè)重復(fù)取6尾魚，分別用于生長(zhǎng)樣品和血液樣品的測(cè)定。為了避免應(yīng)激對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)的影響，在取樣時(shí)3個(gè)操作者同時(shí)操作，每組魚取樣時(shí)間不超過2 min。

1.3.2 生長(zhǎng)樣品的處理 每尾魚先測(cè)體長(zhǎng)和體質(zhì)量，之后再置于冰盤解剖，取出內(nèi)臟后，稱取內(nèi)臟質(zhì)量，分別剝離肝胰臟和頭腎后稱質(zhì)量。稱質(zhì)量后的肝胰臟和頭腎置于-80 ℃低溫冰箱保存，用于測(cè)定SOD和溶菌酶活性。

1.3.3 血液樣品的處理 將樣品魚放入200 mg/L的MS-222溶液中麻醉。魚側(cè)翻后取出，立即斷尾取血約1.0 mL，將血液分成2份,1份立即采用毛細(xì)管血液離心機(jī)3 000g離心10 min，讀取紅細(xì)胞壓積。另1份血液樣品置4 ℃冰箱過夜，于4 ℃條件下以1 500g離心10 min，收集血清，-80 ℃保存，用于測(cè)定血糖濃度、血清皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度及SOD和溶菌酶活性。

1.4 測(cè)定項(xiàng)目及方法

1.4.1 生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定 肝體指數(shù)(HSI)的計(jì)算:

HSI=(肝質(zhì)量/體質(zhì)量)×100%。

臟體指數(shù)(VSI)的計(jì)算:

VSI=(內(nèi)臟質(zhì)量/體質(zhì)量)×100%。

肥滿度(K)的計(jì)算:K=100×(W/L3)。

式中：W為體質(zhì)量(g)，L為體長(zhǎng)(cm)。

特定生長(zhǎng)率(SGR)的計(jì)算公式如下：

SGR=100(ln FBW-ln IBW)/T。

式中：IBW為恢復(fù)生長(zhǎng)時(shí)的體質(zhì)量(g),FBW為終末體質(zhì)量(g),T為投喂時(shí)間(d)

1.4.2 血液學(xué)、生物化學(xué)及非特異性免疫指標(biāo)的測(cè)定 將樣品魚的一部分血清按照Eddie等[7]的方法制備提取物，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清皮質(zhì)醇含量，所用試劑盒購自北京方程生物科技有限公司；另一部分血清采用南京建成生物工程研究所試劑盒檢測(cè)血糖及血清SOD和溶菌酶活性。取頭腎、肝胰臟組織解凍后，用濾紙吸干水分，準(zhǔn)確稱取質(zhì)量，按質(zhì)量體積比加入9倍的預(yù)冷生理鹽水，用勻漿器勻漿成10%組織勻漿液，4 ℃、4 000 r/min離心10 min,取上清液，然后采用南京建成生物工程研究所試劑盒檢測(cè)肝胰臟SOD、溶菌酶活性以及頭腎溶菌酶活性。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行one-way ANOVA分析，組間差異進(jìn)行Duncan’s多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚生長(zhǎng)的影響

禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚生長(zhǎng)的影響如表1所示。

注：同列數(shù)據(jù)后標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

Note:Different lowercase letters in each column indicate significant differences between the groups (P<0.05).The same for below tables.

由表1可以看出，隨著禁食時(shí)間的增加，禁食后厚頜魴幼魚體質(zhì)量呈下降趨勢(shì)，且各試驗(yàn)組間均存在顯著性差異(P<0.05)，尤其是F12組幼魚體質(zhì)量?jī)H為(3.19±0.37) g/尾。再投喂后各組幼魚均能恢復(fù)生長(zhǎng)，F(xiàn)3組幼魚的體質(zhì)量達(dá)(7.65±0.39) g/尾，超過了對(duì)照組(F0)體質(zhì)量，但兩組間差異不顯著(P>0.05)，而F12組幼魚體質(zhì)量?jī)H為(6.78±0.52) g/尾，顯著低于其他各組幼魚 (P<0.05)。禁食后厚頜魴幼魚體長(zhǎng)各組間無顯著性差異(P>0.05)，恢復(fù)生長(zhǎng)后，F(xiàn)3組幼魚體長(zhǎng)與對(duì)照組間無顯著性差異(P>0.05)，而F7、F12組幼魚體長(zhǎng)則顯著低于對(duì)照組(F0)和F3組幼魚(P<0.05)。各試驗(yàn)組的特定生長(zhǎng)率均顯著高于對(duì)照組(F0) (P<0.05)。

禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚的肥滿度、肝體指數(shù)和臟體指數(shù)的影響如表2所示。由表2可知，F(xiàn)3組厚頜魴幼魚禁食后，肥滿度、肝體指數(shù)及臟體指數(shù)較對(duì)照組(F0)略有降低，但無顯著性差異(P>0.05)；F7、F12組幼魚禁食后，其肥滿度、肝體指數(shù)及臟體指數(shù)顯著低于對(duì)照組(F0) (P<0.05)?；謴?fù)投喂后，F(xiàn)3組和F7組幼魚的肥滿度、肝體指數(shù)及臟體指數(shù)均恢復(fù)至正常水平，其中F7組幼魚肥滿度顯著高于對(duì)照組(F0)，其他組與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)；F12組幼魚的肥滿度和肝體指數(shù)恢復(fù)至正常水平，而臟體指數(shù)顯著低于對(duì)照組(F0)及其余試驗(yàn)組(P<0.05)。

2.2 禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚血液及生化指標(biāo)的影響

禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚紅細(xì)胞壓積的影響如圖1所示。由圖1可知，在整個(gè)禁食過程中，F(xiàn)3、F7、F12組幼魚禁食后紅細(xì)胞壓積分別為(32.16±1.89)%，(33.76±3.01)%和(31.47±1.79)%，均高于同期對(duì)照組(F0)，但無顯著性差異(P>0.05)?；謴?fù)投喂后，對(duì)照組(F0)及F3、F7、F12組厚頜魴幼魚紅細(xì)胞壓積分別為(31.44±2.68)%，(31.79±2.14)%，(32.05±2.76)%和(31.72±1.89)%，各組間無顯著性差異(P>0.05)。

禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚血糖的影響如圖2所示。由圖2可知，F(xiàn)3、F7組厚頜魴幼魚禁食后血糖濃度有所降低，分別為(6.02±0.61)和(5.87±0.73) mmol/L，但與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)；而F12組幼魚禁食后血糖為(4.16±0.68) mmol/L，顯著低于對(duì)照組(F0) (P<0.05)?；謴?fù)投喂后，各試驗(yàn)組的血糖濃度均恢復(fù)至正常水平，與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)。

從圖3可知，F(xiàn)3組厚頜魴幼魚禁食后，皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度略有增加，為(9.21±1.01) ng/mL，與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)；而F7、F12組幼魚禁食后，皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度分別為(31.25±2.89)和(34.56±3.24) ng/mL，極顯著高于對(duì)照組(F0) (P<0.01)?；謴?fù)投喂后，皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度均恢復(fù)至正常水平，與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)。

2.3 禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚非特異性免疫指標(biāo)的影響

2.3.1 SOD活性 禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚SOD活性的影響如圖4所示。由圖4可以看出，禁食后，F(xiàn)3組厚頜魴幼魚血清SOD活性為 (33.05±3.17) U/mL，略高于對(duì)照組(F0)，但差異不顯著(P>0.05)；F7組、F12組幼魚血清SOD活性分別為(27.52±2.04) 和(18.44±2.47) U/mL，顯著低于對(duì)照組(F0) (P<0.05)。恢復(fù)投喂后，F(xiàn)3、F7、F12組幼魚血清SOD活性均恢復(fù)至正常水平，與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)。

由圖4還可以看出，禁食后，F(xiàn)3組厚頜魴幼魚肝胰臟SOD活性升高，與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)；F7、F12組幼魚肝胰臟SOD活性分別為(51.28±4.39)和 (49.21±4.07) U/mg，顯著低于對(duì)照組(F0) (P<0.05)?；謴?fù)投喂后，F(xiàn)3、F7組幼魚肝胰臟SOD活性恢復(fù)至正常水平，與對(duì)照組(F0)無顯著差異(P>0.05)， F12組幼魚肝胰臟SOD活性顯著低于對(duì)照組(F0)和F3、F7組幼魚(P<0.05)。

2.3.2 溶菌酶活性 禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚溶菌酶活性的影響如圖5所示。從圖5可知，禁食后，F(xiàn)3、F7組厚頜魴幼魚血清溶菌酶活性分別為(1.08±0.16)和(0.95±0.14) U/mL，均略高于對(duì)照組(F0)，但無顯著性差異(P>0.05)；F12組幼魚禁食后，血清溶菌酶活性為 (0.74±0.06) U/mL，顯著低于對(duì)照組(F0)(P<0.05)。恢復(fù)投喂后，F(xiàn)3、F7、F12組幼魚血清溶菌酶活性均與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)。

由圖5可見，F(xiàn)3組幼魚禁食后頭腎溶菌酶活性為(2.52±0.16) U/mg，略高于對(duì)照組(F0)，但差異不顯著(P>0.05)；而F7、F12組幼魚在禁食后頭腎溶菌酶活性分別為(1.81±0.15)和(1.67±0.11)U/mg，均顯著低于對(duì)照組(F0) (P<0.05)?；謴?fù)投喂后，F(xiàn)3、F7組幼魚頭腎溶菌酶活性分別與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)，但F7組幼魚頭腎溶菌酶活性顯著低于F3組(P<0.05)；F12組幼魚頭腎溶菌酶活性未恢復(fù)至正常水平，顯著低于對(duì)照組(F0)(P<0.05)。

由圖5可見，F(xiàn)3、F7、F12組厚頜魴幼魚肝胰臟溶菌酶活性在禁食后均略有下降，但與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)?；謴?fù)投喂后，F(xiàn)3、F7、F12組幼魚肝胰臟溶菌酶活性均恢復(fù)至正常水平，與對(duì)照組(F0)無顯著性差異(P>0.05)。

3 討 論

3.1 禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚生長(zhǎng)指標(biāo)的影響

在本研究中，隨著禁食時(shí)間的增加，禁食后厚頜魴幼魚體質(zhì)量顯著降低(P<0.05)，恢復(fù)投喂后，F(xiàn)3組幼魚經(jīng)禁食后能完全恢復(fù)至正常水平，而F7、F12組幼魚的體質(zhì)量和體長(zhǎng)指標(biāo)經(jīng)禁食后均顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，而其特定生長(zhǎng)率均顯著高于對(duì)照組和F3組，表現(xiàn)出部分補(bǔ)償生長(zhǎng)的能力。該結(jié)果與程宵玲[8]對(duì)厚頜魴幼魚的研究結(jié)果一致，表明厚頜魴幼魚在禁食4 d以上再恢復(fù)投喂即不能表現(xiàn)出完全補(bǔ)償生長(zhǎng)的能力。

肥滿度是衡量魚類能量?jī)?chǔ)存及反映魚類健康的一個(gè)粗略的指標(biāo)，其值的變化可以反映出魚類營(yíng)養(yǎng)狀況的變化[9]。本試驗(yàn)的研究結(jié)果與學(xué)者對(duì)團(tuán)頭魴(MegalobramaamblycephalaYih)[10]、赤鯛(Pagruspagrus(Linnaeus))[11]的研究結(jié)果一致。表明短時(shí)間禁食并不會(huì)影響魚類的營(yíng)養(yǎng)及福利狀況。同樣，魚類的肝體指數(shù)和臟體指數(shù)也是反映其營(yíng)養(yǎng)狀況的指標(biāo)。在瓦氏黃顙魚(Pelteobagrusvachelli)[12]、大西洋鱈(GadusmorhuaL.)[13]的研究也發(fā)現(xiàn)，禁食后其肝體指數(shù)也會(huì)降低，這與本研究的結(jié)果有一致性。但在犬齒牙鲆(Paralichthysdentatus)[14]的研究中則發(fā)現(xiàn)，饑餓對(duì)肝體指數(shù)的影響不大。這可能是由于不同魚的肝臟在能量?jī)?chǔ)藏過程中所起作用不同，在饑餓過程中肝臟的變化也就各不相同。程宵玲[8]研究表明，厚頜魴幼魚在饑餓過程中會(huì)主要消耗糖原和脂肪。因此在發(fā)生饑餓脅迫時(shí)由于糖原和脂肪的消耗，作為糖原和脂肪的主要儲(chǔ)存器官的肝臟質(zhì)量和體積均會(huì)變小，這就使得隨禁食時(shí)間的延長(zhǎng)導(dǎo)致厚頜魴幼魚的肝體指數(shù)顯著降低。隨著禁食時(shí)間的增加可引起魚類消化道及其附屬腺體的全面退化[15]。本研究中F12組幼魚臟體指數(shù)在恢復(fù)投喂后仍不能恢復(fù)至正常水平，這可能表明，厚頜魴幼魚經(jīng)短時(shí)間的禁食并不會(huì)影響其營(yíng)養(yǎng)狀況，但隨禁食時(shí)間的延長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致饑餓效應(yīng)持續(xù)作用于魚體，從而影響厚頜魴幼魚的營(yíng)養(yǎng)狀況。

3.2 禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚血液及生化指標(biāo)的影響

魚類紅細(xì)胞壓積的降低反映了血液輸氧能力的下降,饑餓導(dǎo)致魚體需氧量減少,進(jìn)而使代謝水平降低,這是魚類在饑餓時(shí)降低對(duì)儲(chǔ)存能量的利用以維持基本生命活動(dòng)的一種本能適應(yīng)[16]。在本研究中，所有試驗(yàn)組在禁食過程中及恢復(fù)投喂后厚頜魴幼魚的紅細(xì)胞壓積均無顯著性變化(P>0.05)，類似結(jié)果在舌齒鱸(Dicentrarchuslabrax,Linnaeus,1758)[17]、赤鯛[11]、黑點(diǎn)海鯛(Pagellusbogaraveo,Brünnich,1768)[17]等魚類的研究中被證實(shí)。但也有研究表明，如胭脂魚(Myxocyprinusasiaticus)[18]在饑餓至30 d時(shí)其紅細(xì)胞壓積會(huì)顯著降低，鱸魚(Lateolabraxjaponicus)[16]在饑餓4周后紅細(xì)胞壓積也會(huì)顯著低于正常水平。這可能表明禁食時(shí)間會(huì)對(duì)紅細(xì)胞壓積產(chǎn)生明顯的影響，但短時(shí)間的禁食并不會(huì)影響魚類的紅細(xì)胞壓積。

在魚類處于饑餓或營(yíng)養(yǎng)不良時(shí)，因魚的種類不同而表現(xiàn)出不同的結(jié)果，有些魚類如虹鱒(Oncorhynchusmykiss)[19]、舌齒鱸[17]、黑點(diǎn)海鯛[17]等在禁食后并不會(huì)導(dǎo)致其血清皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度的變化。在本研究中，厚頜魴幼魚血清皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度在禁食3 d后與對(duì)照組無顯著性差異(P>0.05)，而在禁食7 d、12 d后極顯著高于對(duì)照組幼魚(P<0.01)，類似結(jié)果在塞內(nèi)加爾鰨(Soleasenegalensis)[20]、克林雷氏鯰(Rhamdiaquelen)[4]、歐洲鰻鱺(Anguillaanguilla)[21]、赤鯛[11]等魚類中被證實(shí)。該結(jié)果可能表明，厚頜魴幼魚禁食時(shí)血清皮質(zhì)醇對(duì)魚體內(nèi)能量物質(zhì)的利用起到重要的作用，是幼魚應(yīng)對(duì)饑餓脅迫的一種反應(yīng)，隨著禁食時(shí)間的延長(zhǎng)勢(shì)必會(huì)影響幼魚的養(yǎng)殖福利。

本研究中，厚頜魴幼魚禁食3 d和7 d組在試驗(yàn)期間血糖濃度無顯著變化，而禁食12 d組幼魚在禁食后血糖濃度顯著低于對(duì)照組 (P<0.05)。通常認(rèn)為魚類在禁食后，血液中的葡萄糖并不能來源于食物，只能來源于肝糖原的分解和異生作用。厚頜魴幼魚在禁食12 d后其血糖濃度不能繼續(xù)維持在正常水平，這與魚體糖原的消耗有密切關(guān)系，這在程宵玲[8]對(duì)厚頜魴幼魚在禁食后對(duì)糖原的檢測(cè)結(jié)果得以證實(shí)。因此，對(duì)于厚頜魴幼魚而言，隨著禁食時(shí)間的延長(zhǎng)，可能會(huì)對(duì)魚體的營(yíng)養(yǎng)狀況、肝臟機(jī)能造成不利影響。

3.3 禁食后再投喂對(duì)厚頜魴幼魚非特異性免疫指標(biāo)的影響

在本研究中，厚頜魴幼魚在禁食3 d后，血清和肝胰臟SOD活性均升高，但與對(duì)照組無顯著性差異(P>0.05)， 而在禁食7 d和12 d后血清和肝胰臟SOD活性均顯著下降(P<0.05)。在目前對(duì)魚類的研究中發(fā)現(xiàn)，不同種類、不同年齡魚類的SOD活性在饑餓狀態(tài)下呈現(xiàn)出不同的變化。如異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)[22]饑餓8 d后SOD活性顯著降低，但隨饑餓時(shí)間的延長(zhǎng)SOD活性會(huì)顯著增加。而褐鱒(Salmotrutta)[5]、舌齒鱸(Dicentrarchuslabrax,Linnaeus,1758)[23]則類同于厚頜魴，在禁食后SOD活性會(huì)呈現(xiàn)出先升高的趨勢(shì)，但隨著禁食時(shí)間的延長(zhǎng)SOD活性則會(huì)明顯降低；在恢復(fù)投喂后，各試驗(yàn)組血清中SOD活性均能恢復(fù)至正常水平，但禁食12 d的幼魚肝胰臟SOD活性則未能恢復(fù)至正常水平。這可能表明由于禁食時(shí)間延長(zhǎng)導(dǎo)致的機(jī)體氧化損害在恢復(fù)投喂后并未得到恢復(fù)，會(huì)導(dǎo)致機(jī)體消除活性氧自由基的能力降低，從而會(huì)使魚體體內(nèi)免疫水平降低。

本研究中,厚頜魴血清、肝胰臟及頭腎溶菌酶活性在禁食后再投喂的研究結(jié)果類似于赤鯛[11]、黑點(diǎn)海鯛[17]、黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)[24]。在舌齒鱸[17]的研究中則發(fā)現(xiàn)，其血漿和頭腎的溶菌酶活性在饑餓脅迫下無顯著性變化。而中華鱘(Acipensersinensis)[25]則隨著饑餓時(shí)間的增加其頭腎溶菌酶活性會(huì)顯著增加。這些不同的研究結(jié)果可能說明，魚類溶菌酶活性在饑餓脅迫下的變化情況隨魚的種類、年齡、性別、受檢組織及饑餓時(shí)間的不同而不同。厚頜魴幼魚血清、肝胰臟和頭腎溶菌酶活性中，以頭腎溶菌酶活性最大，主要是因?yàn)轭^腎是魚類重要的免疫器官，內(nèi)含豐富的白血球，而魚類溶菌酶主要是由嗜中性白細(xì)胞和單核細(xì)胞等白細(xì)胞產(chǎn)生的[26]。而這也可能是頭腎溶菌酶活性受到饑餓脅迫的影響最為明顯的原因。厚頜魴在禁食初期溶菌酶活性略有升高，可能是魚體在饑餓脅迫下免疫系統(tǒng)會(huì)啟動(dòng)保護(hù)機(jī)制以維持機(jī)體的生理功能及適應(yīng)環(huán)境，而當(dāng)進(jìn)一步延長(zhǎng)禁食時(shí)間后免疫系統(tǒng)的承受能力到達(dá)極限后，溶菌酶活性會(huì)降低，魚體的非特異性免疫水平也會(huì)下降。

綜上所述，厚頜魴幼魚在禁食3 d投喂21 d的投喂方案下，能達(dá)到完全性補(bǔ)償生長(zhǎng)，且禁食對(duì)厚頜魴幼魚的部分血液學(xué)、生物化學(xué)指標(biāo)無不利影響，尤其是短期禁食不會(huì)降低魚體的非特異性免疫水平，不會(huì)影響魚體的營(yíng)養(yǎng)狀況、健康狀況及養(yǎng)殖福利。因此，在厚頜魴的養(yǎng)殖過程中，建議在采用禁食-再投喂的方式誘導(dǎo)魚類的補(bǔ)償生長(zhǎng)時(shí)，禁食期以不超過4 d為宜。

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Effects of fasting and re-feeding on biochemical and non-specific immune indexes ofMegalobramapellegrinijuvenile

LI Qin,TANG Hong-yu,ZHENG Yong-hua,DENG Li-rong

(DepartmentofFisheriesScience,CollegeofAnimalScienceandTechnology,SouthwestUniversity,Beibei,Chongqing400715,China)

【Objective】 The effects of fasting and re-feeding on growth and hematological,biochemical and non-specific immune indexes ofMegalobramapellegrinijuvenile were studied.【Method】Megalobramapellegrinijuveniles were distributed in four experimental groups.The first group was considered as the control (fed normally F0) while the other three groups were fasted for 3 d(F3),7 d(F7),and 12 d (F12),respectively before re-feeding to 24 d.The growth parameters (weight,length,fatness K,HSI,and VSI),hematocrit,serum cortisol,blood glucose and serum,hepatopancreas,head-kidney SOD activities and lysozyme activities inMegalobramapellegrinijuveniles were determined before and after fasting and after re-feeding.【Result】 After fasting,most of the growth parameters including fatness K,HIS,and VSI significantly decreased (P<0.05),and these parameters could return to normal levels after re-feeding (except for the VSI of F12).The hematocrit of juveniles was not significantly affected by fasting and re-feeding (P>0.05).Blood glucose values of juveniles in F3and F7remained unchanged during fasting with no significantly difference compared with the control (P>0.05),but blood glucose values of juveniles in F12significantly decreased (P<0.05).After re-feeding,the blood glucose of juveniles could return to the same levels as the control.After fasting,the cortisol levels of F3were not significantly different (P>0.05).Fasting periods of 7 d and 12 d significantly increased serum cortisol levels compared with the control (P<0.01),and they returned to basal levels after re-feeding.After fasting,the serum and hepatopancreas SOD activities of F3were not significantly different (P>0.05),while the SOD activities of F7and F12significantly decreased (P<0.05).After re-feeding,the serum SOD activities and hepatopancreas SOD activities of F3and F7group returned to the levels of the control group,but the hepatopancreas SOD activities of F12remained significantly lower than that of the control (P<0.05).The hepatopancreas lysozyme activities of juveniles were not significantly affected (P>0.05) by fasting and re-feeding.After fasting,the serum lysozyme activities of F3and F7groups were not significantly different (P>0.05) compared with the control,but the activities of F12significantly decreased (P<0.05).After re-feeding,the activities of experimental groups returned to the same levels of control group.After fasting,the head-kidney lysozyme of F3was not significantly different (P>0.05) compared with the control,but the activities of F7and F12significantly decreased (P<0.05).After re-feeding, the activities of F3and F7returned to the levels of control group, but the activities of F12were significantly lower than the control (P<0.05).【Conclusion】 The juveniles of F3could completely grow back to normal level and the hematological,biochemical and non-specific immune indexes were not significantly impacted during a fasting period of 3 days and re-feeding.Thus a no more than 4 days fasting was recommended in the use of fasting and re-feeding during growth ofMegalobramapellegrini.

Megalobramapellegrinijuvenile;fasting and re-feeding;growth index;biochemical index;non-specific immune index

2013-09-17

中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(XDJK2012C091)；中國長(zhǎng)江三峽集團(tuán)公司項(xiàng)目；農(nóng)業(yè)部科技教育司項(xiàng)目 (200903048-08)

李 芹(1972-)，女，重慶人，講師，碩士，主要從事水產(chǎn)動(dòng)物增養(yǎng)殖原理與技術(shù)研究。E-mail:liqin8849@163.com

唐洪玉(1970-)，女，重慶人，副教授，碩士，主要從事水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)研究。E-mail:thy1970@163.com

時(shí)間:2015-01-05 08:59

10.13207/j.cnki.jnwafu.2015.02.034

S965.118

A

1671-9387(2015)02-0049-09

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