孔憲盤(pán),唐式校

(1.江蘇省東海縣駝峰鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)站 222300;2.江蘇省東?？h動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 222300)

禽流感及其防控

孔憲盤(pán)1,唐式校2

(1.江蘇省東?？h駝峰鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)站 222300;2.江蘇省東?？h動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所 222300)

禽流感對(duì)家禽養(yǎng)殖業(yè)是一大危害,特別是高致病性禽流感,威脅人類(lèi)健康;對(duì)禽流感的深度認(rèn)識(shí)很有必要,免疫預(yù)防、撲殺、消毒、管理可降低禽流感發(fā)生、流行,降低對(duì)人類(lèi)健康、安全的威脅。

禽流感病毒;流行;免疫;防控

1 病原

禽流感病毒為分節(jié)段的負(fù)鏈R NA、正黏病毒科病毒,病毒顆粒呈球型或絲狀、螺旋對(duì)稱(chēng)有囊膜。流感病毒按蛋白抗原的不同分為甲型、乙型、丙型。甲乙型流感病毒基因組分8個(gè)節(jié)段,丙型分7個(gè)節(jié)段,在病毒復(fù)制過(guò)程中常發(fā)生基因重配,抗原性漂移或轉(zhuǎn)移。該病毒抵抗力都不強(qiáng),例如60～65℃經(jīng)20 min,或置于5%碳酸中片刻可被滅活。流感病毒均能凝集雞和人的紅細(xì)胞,這種血凝性可被相應(yīng)的免疫血清所抑制［1］。

這一類(lèi)病毒均可在雞胚絨毛尿囊腔中增殖,也可在雞胚成纖維細(xì)胞或犬腎細(xì)胞株MDCK(犬腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞)上增殖,使細(xì)胞呈現(xiàn)病變或形成空斑。

甲型流感病毒致人流感、馬流感、豬流感、禽流感;乙型流感病毒僅感染人;丙型流感病毒可感染人和豬,但極少引起嚴(yán)重疾病。甲型流感病毒囊膜上的血凝素HA和神經(jīng)氨酸酶NA是最重要的抗原和分類(lèi)指標(biāo),迄今HA分為16個(gè)亞型(H1-H16), NA有9個(gè)亞型(N1-N9),可組合成H1N7、H3 N2、H5N1、H9 N2、H7 N9等各種亞型毒株,各亞型毒株致病力差異很大,分別感染畜禽和人。

禽流感病毒幾乎所有16個(gè)HA與9個(gè)NA組合的亞型毒株都可發(fā)現(xiàn)于禽類(lèi),其中H5N1和H7N7亞型強(qiáng)毒致高致病性禽流感,并可感染人?；茧u突發(fā)死亡或呼吸困難、頭冠水腫、腹瀉、產(chǎn)蛋率下降等。

HPA1是OIE分類(lèi)中的A類(lèi)病,而MPA1既不是A類(lèi)病,也不是B類(lèi)病。因此區(qū)分HPA1和MPA1十分重要。

2 流行

流行包括H1-H16和N1-N10在內(nèi)各種亞型的A型流感病毒幾乎都已在家禽和野禽中分離到,但其分布依年份、地理位置和宿主種類(lèi)而異,雁形目和鸻形目中的禽類(lèi)是主要的健康帶毒者,迄今為止,高致病性A I V都是H5和H7血清亞型,而所有其他亞型毒株對(duì)禽類(lèi)均為低致病性(MP),雖然H5和H7亞型中的病毒只有一小部分是HPA1,但MPAIV在合適的條件下是很容易變?yōu)镠PAIV的。

MPA1可以由H5和H7亞型中的非HPAIV引起,也可由其他HA亞型病毒引起,在前者引起的流行中往往可以演變?yōu)镠PA1。

病禽和帶毒禽是主要傳染源,鴨、鵝等和野生水禽在該病傳播中起主要作用,候鳥(niǎo)也可能起一定作用。該病的傳播途徑為氣源呼吸道傳播,可很快造成大范圍流行;而由H5N1亞型病毒引起的HPA1,以糞-口途徑傳播為主,發(fā)病或帶毒水禽造成水源和環(huán)境污染,對(duì)擴(kuò)散該病有特別重要意義。該病無(wú)明顯季節(jié)性,但常以冬、春季多發(fā)。

3 H5亞型禽流感的免疫預(yù)防

當(dāng)前我國(guó)流行的H5亞型禽流感病毒分為三個(gè)主要分支,即：2.3.2分支、7.2分支和2.3.4分支,這三個(gè)分支的H5亞型禽流感病毒制備的疫苗均不能提供完全的交叉免疫保護(hù),因此,需要分別有針對(duì)性地進(jìn)行免疫預(yù)防,即用對(duì)應(yīng)的Re-6、Re-7和Re-株系列疫苗分別預(yù)防這三類(lèi)病毒引起的禽流感,不可以相互替換。

3.1 禽流感疫苗分類(lèi)

3.1.1 滅活疫苗：自然分離株研制的疫苗：重組病毒研制的疫苗(自然重組、利用反向基因操作技術(shù)重組)。

3.1.2 減毒活疫苗：自然弱毒株研制(不允許使用該疫苗預(yù)防禽流感);冷適應(yīng)弱毒株疫苗(自然株培育或利用反向基因操作技術(shù)構(gòu)建)。

3.1.3 基因工程疫苗：重組病毒疫苗(H5、H7、H9);禽流感重組雞痘病毒載體活疫苗(H5亞型);新城疫、禽流感重組二聯(lián)活疫苗(r L-H5株)亞單位疫苗(H5、H7)D NA疫苗(H5、H7),又稱(chēng)核酸疫苗。

此外,還有R NA復(fù)制子疫苗、表位疫苗、復(fù)制缺陷型流感病毒滅活疫苗等。

3.2 H5亞型禽流感疫苗

3.2.1 毒株特點(diǎn)：預(yù)防2.3.2分支H5亞型禽流感疫苗,該疫苗種毒是用2010年從廣東分離的2.3.2分支H5亞型禽流感病毒,利用反向遺傳操作技術(shù)重組制備的。

3.2.2 重組構(gòu)建病毒：疫苗種毒：必須是弱毒。弱毒來(lái)源：自然存在。當(dāng)前H5亞型禽流感弱毒極少,幾乎無(wú)選擇的余地,代表性差,影響對(duì)流行株的免疫效果。

3.2.3 人工重組：人工重組不局限于強(qiáng)毒還是弱毒,數(shù)量大,可選擇,制備出于流行株在各方面特性上最接近的,最具有代表性的,免疫效果最好的疫苗株。重組病毒疫苗株還有另外兩個(gè)優(yōu)點(diǎn)：①高滴度雞胚適應(yīng)性。病毒在雞胚夜中增殖的數(shù)量大,疫苗中有效成分高。②良好的生物安全性。該重組病毒已經(jīng)通過(guò)分子修飾致弱變成了弱毒株。因此對(duì)禽、人和其他畜都沒(méi)有致病性。

3.2.4 新毒株疫苗研制的背景：禽流感疫苗種毒進(jìn)行了多次更新,以后也將繼續(xù)進(jìn)行更新,其更新的基本原因主要是以下三點(diǎn)。在基因進(jìn)化上出現(xiàn)了新的病毒分支。新出現(xiàn)病毒的抗原性與疫苗株存在較大的差異。原有滅活疫苗對(duì)流行株的部分病毒不能提供完全有效的免疫保護(hù),免疫雞出現(xiàn)不同程度的死亡。以上三點(diǎn)同時(shí)具備時(shí)一般才進(jìn)行種毒的更新。3.3 Re-6株系列疫苗的適用范圍

由于2.3.2分支H5亞型禽流感病毒呈全國(guó)分布,因此,農(nóng)業(yè)部規(guī)定Re-6株疫苗可以在全國(guó)范圍內(nèi)應(yīng)用。

重組禽流感病毒滅活疫苗(H5N1亞型,Re-6 株)禽流感(H5+H9)二價(jià)滅活疫苗(H5N1,Re-6 +H9 N2,Re-2株)和禽流感病毒(H5N1亞型)滅活疫苗(細(xì)胞源,Re-6株)可同時(shí)用于雞和水禽等免疫,均具有良好的免疫保護(hù)效果。

新城疫、禽流感重組二聯(lián)活疫苗(r LH5-6),說(shuō)明書(shū)中只推薦在雞中使用。

3.4 禽流感滅活疫苗

禽流感滅活疫苗(H5 N2亞型,Re-7株)是用2007年從廣東分離的2.3.2分支H5亞型禽流感的疫苗,該疫苗僅被批準(zhǔn)用于水禽的免疫,目前只有一家企業(yè)生產(chǎn)。

重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)可同時(shí)預(yù)防2.3.2分支和7.2分支H5亞型禽流感病毒。

3.5 預(yù)防7.2分支H5亞型禽流感的疫苗(Re-7株疫苗)

3.5.1 研制背景：該分支病毒從2006年開(kāi)始出現(xiàn),當(dāng)時(shí)研制出Re-4株疫苗,多年來(lái)對(duì)于預(yù)防這類(lèi)病毒發(fā)揮了十分重要的作用,2012年末開(kāi)始,該類(lèi)病毒出現(xiàn)了新的基因進(jìn)化分支,其亞分支病毒與2006年開(kāi)始應(yīng)用的Re-4疫苗株的HA基因與Re-4疫苗株的核苷酸同源性差異較大。2012年,Re-4株系列疫苗,尚可對(duì)寧夏和甘肅等疫情分離株攻擊提供100%完全保護(hù),但到了2013年,Re-4株系列疫苗免疫雞用河北暴發(fā)疫情的H5 N2等7.2分支流行株攻擊后部分免疫雞出現(xiàn)死亡,表明Re-4株疫苗已經(jīng)不能對(duì)當(dāng)前流行株提供完全保護(hù),需要研制新的疫苗。

3.5.2 Re-7株疫苗種毒的來(lái)源及特點(diǎn)：通過(guò)序列分析和抗原性分析等,選擇出2011年從┇雞中分離的7.2分支,高致病性H5亞型禽流感病毒提供表面基因,利用反向遺傳操作技術(shù)重組構(gòu)建出疫苗種毒株。該疫苗株抗原性與我國(guó)流行的7.2分支高度匹配,目前可以用于預(yù)防我國(guó)所有7.2分支H5亞型禽流感病毒引起的禽流感。

3.5.3 Re-7株疫苗適用范圍：由于7.2分支禽流感病毒當(dāng)前主要分布于我國(guó)的北方,因此,農(nóng)業(yè)部規(guī)定了7.2分支疫苗的適用范圍,目前主要包括北京、天津、河北、山西、內(nèi)蒙古、┇、上海、江蘇、浙江、安徽、山東、河南、陜西、甘肅、寧夏等15個(gè)省(自治區(qū)、直轄市)。另外,其他省份如果覺(jué)得有必要使用這類(lèi)疫苗,申請(qǐng)并經(jīng)農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)后也可使用該類(lèi)疫苗防控禽流感。

當(dāng)前只有兩個(gè)產(chǎn)品：重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株)可同時(shí)預(yù)防2.3.2分支和7.2分支,H5亞型禽流感病毒,該疫苗可用于雞河水禽,重組禽流感滅活疫苗(H5N1亞型,Re-7株)建議在北方雞中應(yīng)用,緣于7.2分支H5亞型禽流感病毒。當(dāng)前主要存在于北方,而且?guī)缀醵际窃陔u中分離到的。

OIE(世界動(dòng)物衛(wèi)生組織)通報(bào)的2012河北的雞H5 N2禽流感疫情以及山東分離的H5 N2禽流感病毒,都屬于7.2分支病毒,該類(lèi)病毒在我國(guó)北方一定范圍內(nèi)存在,因此北方需做好該類(lèi)病毒的免疫預(yù)防工作。Re-7株系列疫苗對(duì)當(dāng)前的這類(lèi)病毒具有完全的免疫保護(hù)作用。

3.6 即將應(yīng)用的預(yù)防類(lèi)2.3.4分支H5亞型禽流感的疫苗(Re-8株疫苗)

2013年末到2014年初在我國(guó)云南,貴州和湖北等地引起雞的疫情,以及黑龍江鵝中發(fā)現(xiàn)的疫情均由這類(lèi)病毒引起。該類(lèi)病毒在我國(guó)的南方和北方均有,將可能成為危害我國(guó)養(yǎng)禽也的主要H5亞型禽流感病毒。

目前有兩個(gè)產(chǎn)品,即重組禽流感病毒滅活疫苗(H5N1亞型Re-8株)和新城疫、禽流感重組二聯(lián)活疫苗(YLH5-8),供各地在免疫Re-6株系列疫苗的基礎(chǔ)上選擇使用該疫苗進(jìn)行免疫。

3.7 滅活疫苗和活疫苗配合使用

禽流感滅活疫苗能產(chǎn)生良好抗體,但其細(xì)胞免疫和黏膜免疫較弱,活疫苗免疫后產(chǎn)生的抗體較低,但卻可產(chǎn)生較強(qiáng)的細(xì)胞免疫和黏膜免疫;因此建議滅活苗和活疫苗配合使用,既可產(chǎn)生較高的抗體,又可以獲得良好的細(xì)胞免疫和黏膜免疫,可提高免疫雞抵御同禽流感病毒的侵襲能力［2］。

當(dāng)前,我國(guó)批準(zhǔn)生產(chǎn)禽流感活疫苗只有新城疫、禽流感重組二聯(lián)活疫苗。因此,需根據(jù)需要使用滅活疫苗和新城疫、禽流感重組二聯(lián)活疫苗配合使用。研究和應(yīng)用結(jié)果表明,禽流感滅活苗和活疫苗配合使用可提高疫苗對(duì)家禽的保護(hù)效果。

4 H7 N9禽流感的防控

該禽流感病毒對(duì)禽屬低致病性的,但對(duì)人則是強(qiáng)毒。沿海水網(wǎng)密布,灘涂多、水草肥美,農(nóng)區(qū)散養(yǎng)著家禽雞、鴨、鵝有混養(yǎng)的習(xí)慣,白天,鴨、鵝等水禽到溝、河、湖等水草豐富的水網(wǎng)地帶覓食,和野生水禽接觸機(jī)會(huì)多,野禽攜帶的H7 N9病毒傳播給家養(yǎng)水禽,晚上又和雞等家禽混圈,行成H7 N9交叉感染。待到秋冬時(shí)節(jié)家禽長(zhǎng)成出售,由小販集中向大中城市活禽市場(chǎng)運(yùn)輸,在販賣(mài)運(yùn)輸和活禽市場(chǎng)幾個(gè)環(huán)節(jié)造成散發(fā)流行,并感染給人。

根據(jù)傳染病流行的三大環(huán)節(jié),傳染來(lái)源、傳播途徑、易感動(dòng)物,切斷任一環(huán)節(jié),則停止流行。首先在收購(gòu)環(huán)節(jié),做好農(nóng)村集市活禽市場(chǎng)的消毒檢疫工作,對(duì)運(yùn)輸車(chē)輛和籠具等設(shè)施設(shè)備的清洗消毒;對(duì)禽市場(chǎng)做好定期休市消毒和廢棄物及死亡禽類(lèi)的無(wú)害化處理工作。各動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督檢查站要認(rèn)真做好家禽運(yùn)輸車(chē)輛的檢疫消毒工作［3］。

加強(qiáng)家禽飼養(yǎng)場(chǎng)管理,指導(dǎo)督促家禽規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)建立封閉管理制度,落實(shí)封閉管理措施和生物安全措施,生產(chǎn)區(qū)、生活區(qū)要獨(dú)立分開(kāi)。要采取有效措施阻止飛鳥(niǎo)野禽與家禽接觸。在密閉式禽舍通風(fēng)口、門(mén)窗或開(kāi)放、半開(kāi)放式禽舍的周?chē)惭b防鳥(niǎo)網(wǎng)。加強(qiáng)散養(yǎng)家禽的管理,動(dòng)員和指導(dǎo)養(yǎng)殖戶(hù)對(duì)散養(yǎng)家禽實(shí)行圈養(yǎng)或籠養(yǎng),禁止雞、鴨、鵝多禽種混養(yǎng)。

［1］陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)(第四版)［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2007.

［2］趙玉軍.國(guó)家法定禽病診斷與防治［M］.中國(guó)輕工業(yè)出版社,2007.

［3］中國(guó)農(nóng)科院哈爾濱獸醫(yī)研究所.家畜傳染?。跰］.農(nóng)業(yè)出版社,1989.

江蘇省農(nóng)業(yè)三新工程資助項(xiàng)目(SXGC［2015］142)。