李艷蕾 高廣慧

石墨爐原子吸收標(biāo)準(zhǔn)加入法考察復(fù)方氨基酸注射液中鋁元素殘留量

李艷蕾 高廣慧

目的建立石墨爐原子吸收法測(cè)定復(fù)方氨基酸注射液中鋁(Al)的殘留量。方法樣品用1%硝酸直接稀釋, 選擇標(biāo)準(zhǔn)加入法測(cè)定定量以消除基體效應(yīng)和干擾。結(jié)果Al標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的相關(guān)系數(shù)0.9993, 平均回收率為96.40%, 其RSD在1.77%。不同生產(chǎn)企業(yè)的氨基酸注射液中鋁殘留量存在很大差異。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確, 可用于復(fù)方氨基酸注射液中Al鋁的殘留量測(cè)定。有必要控制復(fù)方氨基酸注射液中的鋁的殘留量。

石墨爐原子吸收法；標(biāo)準(zhǔn)加入法；復(fù)方氨基酸注射液；鋁

鋁是一種低毒的元素, 廣泛分布于自然界當(dāng)中。它不會(huì)導(dǎo)致急性中毒, 但是長(zhǎng)期攝入過(guò)量的鋁會(huì)危害人體的健康,比如鋁可以降低某些酶的活性, 引起消化功能的紊亂；影響鈣、磷、鋅等的正常吸收, 破壞正常鈣磷比例, 影響骨骼的發(fā)育以及骨骼軟化、疏松等癥狀；鋁元素對(duì)腦組織有親和性, 可導(dǎo)致智力低下、行動(dòng)遲緩等癥狀。目前, 在國(guó)外藥典中, 如美國(guó)藥典(USP)第30版；歐洲藥典6.0版；英國(guó)藥典2007年版； 日本藥局方第15改正分別在全非胃腸道給藥和注射用水的檢查中, 對(duì)鋁的含量限度做出了明確規(guī)定。而中國(guó)藥典(2005年版)的第三部中只對(duì)人血白蛋白中鋁的殘留量[1]做出了限度規(guī)定, 而對(duì)復(fù)方氨基酸注射液中鋁的含量限度沒(méi)有做出任何規(guī)定。復(fù)方氨基酸注射液作為一種廣泛應(yīng)用于臨床的藥物, 主要用于蛋白質(zhì)消化和吸收障礙、蛋白質(zhì)攝取量不足或消耗過(guò)多導(dǎo)致的輕度營(yíng)養(yǎng)不良、亦用于改善手術(shù)前后患者的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)。因此, 為保證復(fù)方氨基酸注射液制劑安全, 建立有效準(zhǔn)確的測(cè)定鋁含量的方法是十分必要的。本文采用了石墨爐原子吸收標(biāo)準(zhǔn)加入法來(lái)測(cè)定復(fù)方氨基酸注射液中鋁的殘留量, 結(jié)果顯示, 該檢測(cè)方法結(jié)果可靠、準(zhǔn)確、重復(fù)性好, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與試劑

儀器：ELAN9000電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(美國(guó)PE公司), 密里博純水機(jī)。

試劑：硝酸(北京化學(xué)試劑研究所BV-Ⅲ級(jí)), 鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液(國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心, 濃度為1 000 mg/L),復(fù)合氨基酸注射劑(見(jiàn)表3)。

2 方法與結(jié)果

2.1 石墨爐原子吸收工作條件 選擇鋁燈, 燈電流為7.5 mA,檢測(cè)波長(zhǎng)為309.3 nm, 光譜通帶寬度為1.3 nm, 時(shí)間常數(shù)為0.1 s,保護(hù)氣體為氬氣；日立C型石墨管；塞曼背景校正；進(jìn)樣量為10 μl；石墨爐程序升溫見(jiàn)表1。

表1 石墨爐升溫程序

2.2 溶液制備

2.2.1 對(duì)照溶液制備 精密量取鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000 μg/ml)3 ml, 置于100 ml量瓶中, 用濃度為1%硝酸溶液稀釋, 至刻度, 搖勻, 濃度為30 μg/ml；精密量取上述對(duì)照溶液0.5 ml, 置于100 ml的量瓶中, 用1%硝酸稀釋至刻度, 搖勻(150 ng/ml)。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)加入供試品溶液制備 分別量取供試品溶液2 ml (共4份), 置于4個(gè)5 ml的量瓶中, 分別標(biāo)記為①、②、③、④號(hào), 除了①號(hào)量瓶外, 分別在其余的量瓶中加入對(duì)照溶液,加入量分別為0.25、0.50、1.00 ml, 并用濃度為1%硝酸進(jìn)行稀釋, 至刻度, 搖勻, 試劑空白用同樣的方法來(lái)制備。

2.3 線(xiàn)性關(guān)系的考察 精密量取鋁對(duì)照貯備溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液10 mg/L, 用1%硝酸溶液進(jìn)行稀釋, 分別制成濃度為0、7.5、15.0、30.0和45.0 μg/L的對(duì)照品溶液。然后, 作者以鋁元素的濃度(X)為橫坐標(biāo), 鋁元素的響應(yīng)值 (Y)為縱坐標(biāo), 來(lái)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn), 得到鋁元素的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程：Y=0.0031X+0.0081, r=0.9993, 考察結(jié)果表明：鋁元素在0～45 μg/L的范圍內(nèi)的線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.4 回收率的試驗(yàn) 分別精密量取3份3號(hào)供試品溶液各10 ml, 精密加入濃度分別為37.5、75和112.5 μg/L的對(duì)照品溶液, 加入量都為10 ml, 之后混合均勻,3份供試溶液分別標(biāo)記為供試溶液a、供試溶液b、供試溶液c。供試溶液a、b和c的標(biāo)準(zhǔn)加入供試品溶液的制備方法同“2.2.2”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)加入供試品溶液的制備。其回收率結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 鋁的加標(biāo)回收率 (n=9)

2.5 重復(fù)性試驗(yàn) 精密量取1號(hào)供試品(5份), 按照“2.2.2”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)加入供試品溶液的制備, 按照標(biāo)準(zhǔn)加入法計(jì)算結(jié)果,含量為80.1 μg/L, 其RSD值為2.84%。

2.6 樣品的測(cè)定 精密量取供試品, 按照“2.2.2”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)加入供試品溶液的制備, 按照標(biāo)準(zhǔn)加入法計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 樣品中鋁含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 石墨管的選擇 石墨爐原子吸收法, 采用3種不同的石墨管, 分為普通石墨管, 熱解涂層石墨管和C型石墨管。由于鋁屬于高溫元素, 因此, 對(duì)石墨管有特殊的要求, 首先要求石墨管的熱穩(wěn)定性好、其次就是靈敏度高。通過(guò)實(shí)驗(yàn),普通石墨管的靈敏度與熱穩(wěn)定性都不好, 熱解涂層石墨管的靈敏度較高, 但穩(wěn)定性較差, 只能重復(fù)使用幾十次, 而C型石墨管的靈敏度不如熱解涂層石墨管, 但是其穩(wěn)定性較好,可重復(fù)使用近千次, 因此, 綜合考慮后, 最終選用了C型石墨管分析鋁元素。

3.2 定量方法選擇 本文考察標(biāo)準(zhǔn)加入法與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法兩種定量方法, 檢測(cè)結(jié)果表明標(biāo)準(zhǔn)加入法的測(cè)定結(jié)果均高于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法。此外, 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)還有以下缺點(diǎn)：①重復(fù)性比較差；②在檢測(cè)的過(guò)程中, 樣品的基質(zhì)會(huì)對(duì)鋁含量的測(cè)定有干擾。相比之下, 用標(biāo)準(zhǔn)加入法進(jìn)行鋁含量的定量檢測(cè)重復(fù)性好、而且還可以消除基質(zhì)對(duì)測(cè)定造成的干擾, 所以, 作者最終選擇了標(biāo)準(zhǔn)加入法對(duì)鋁的含量進(jìn)行定量。

3.3 介質(zhì)的選擇 石墨爐原子吸收測(cè)定常選用硝酸或鹽酸作為酸性介質(zhì)。鹽酸作為介質(zhì)對(duì)鋁的測(cè)定影響很復(fù)雜, 主要是鋁的氯化物容易升華, 在灰化階段會(huì)損失, 測(cè)定結(jié)果會(huì)降低, 同時(shí), 硝酸酸性過(guò)強(qiáng), 會(huì)降低石墨管使用壽命, 因此, 選用1%硝酸作介質(zhì)。

3.4 基體改進(jìn)劑選擇 為了減少和消除基體組分對(duì)測(cè)定的干擾, 在石墨爐原子吸收光譜的分析中, 通常采用基體改進(jìn)技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)。文獻(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)中使用的基體改進(jìn)劑為硝酸鎂或硝酸鈀, 基體改進(jìn)劑的加入, 可提高鋁的灰化溫度, 有利于去除基體干擾, 改善峰形。但硝酸鎂、硝酸鈀試劑中均含有一定量的鋁, 加入量的增加會(huì)使空白值明顯升高, 降低測(cè)量準(zhǔn)確性, 尤其不利于本實(shí)驗(yàn)中微量鋁的分析測(cè)定。因此, 不加入基體改進(jìn)劑。

3.5 測(cè)定結(jié)果的分析 本文選擇的2個(gè)品種的復(fù)方氨基酸注射液來(lái)自4個(gè)生產(chǎn)廠(chǎng)家, 用石墨爐原子吸收標(biāo)準(zhǔn)加入法測(cè)定鋁的含量, 作者以美國(guó)藥典的限度(25 μg/L)為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判斷, 檢測(cè)結(jié)果表明：只有1批產(chǎn)品符合限度要求,而且在供試品當(dāng)中, 測(cè)得的最大值為美國(guó)藥典中對(duì)鋁含量規(guī)定限度的5倍。

綜上所述, 為保證藥物制劑的安全性, 控制復(fù)方氨基酸中鋁的含量, 建立復(fù)方氨基酸注射液中的鋁殘留量的測(cè)定方法是十分必要的。

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Determination of residual aluminum in compound amino acid injection by graphite furnace atomic absorption spectroscopy standard addition method

LI Yan-lei, GAO Guang-hui. Staff University of Beijing Pharmaceutical Group, Beijing100079, China

ObjectiveTo establish graphite furnace atomic absorption spectroscopy for detection of residual aluminum (Al) in compound amino acid injection.MethodsSamples were directly diluted by1% nitric acid. Standard addition method was applied to eliminate matrix effects and interference.ResultsCorrelation coefficient of Al standard curve was 0.9993, the average recovery rate was96.40%, and its RSD was1.77%. There was a significant difference in residual aluminum in compound amino acid injection from different manufacturers.ConclusionThis is an easy, quick and accurate method for detection of residual Al in compound amino acid injection. It is necessary to control residual Al in compound amino acid injection.

Graphite furnace atomic absorption spectroscopy; Standard addition method; Compound amino acid injection; Aluminum

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.15.193

2015-04-28]

100079 北京醫(yī)藥集團(tuán)職工大學(xué)(李艷蕾)；遼寧省藥品檢驗(yàn)所(高廣慧)