李春鳳

（黑龍江省穆棱市畜牧中心,黑龍江穆棱 157500）

生育期與品種對紫花苜蓿營養(yǎng)價值的影響

李春鳳

（黑龍江省穆棱市畜牧中心,黑龍江穆棱 157500）

1 研究目的與意義

近年來，隨著我國經(jīng)濟發(fā)展，人們生活質(zhì)量的提高，對乳制品的需求量也在增高，特別對產(chǎn)品質(zhì)量的重視程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了過去幾十年，人們追求更高的產(chǎn)品質(zhì)量，選擇更優(yōu)的產(chǎn)品，這就需要更多優(yōu)質(zhì)飼料滿足動物生產(chǎn)需要。苜蓿由于分布廣，品質(zhì)高，成為了奶牛養(yǎng)殖中的首選優(yōu)質(zhì)粗飼料。而我國苜蓿品種多，各地的苜蓿質(zhì)量差異大，產(chǎn)量低等因素對國產(chǎn)苜蓿在奶牛生產(chǎn)中造成了眾多不便。因而，很多大型牧場選擇進口苜蓿，雖然成本高，但飼料回報高，乳品質(zhì)好。黑龍江省是我國的奶牛養(yǎng)殖大省，對優(yōu)質(zhì)粗飼料的需求量存在著很大的缺口，本文在前人研究的基礎(chǔ)上，選擇了三種黑龍江省種植面積最大的本地紫花苜蓿品種，通過對其不同生育期營養(yǎng)價值評定，為我國科學(xué)的制定苜蓿干草營養(yǎng)價值的評定體系和我省苜蓿種植與適時收割提供理論依據(jù)。

2 材料與方法

2.1 試驗材料

試驗材料采用三種生育期（即現(xiàn)蕾期，初花期，盛花期）的三個品種（肇東苜蓿，龍牧801，龍牧803）紫花苜蓿，于2012年刈割自哈爾濱市香坊農(nóng)場苜蓿地。自然風(fēng)干，取少部分粉碎至20目用于實驗室分析。

2.2 測定指標(biāo)

依據(jù)CNCPS體系就碳水化合物（CHO）和蛋白質(zhì)（Protein）組分的劃分，本試驗需要測定的指標(biāo)有：干物質(zhì)（DM）；粗蛋白（CP）；粗脂肪（EE）；粗灰分（Ash）；中性洗滌纖維（NDF）；酸性洗滌纖維（ADF）。

2.3 試驗方法

根據(jù)《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》（楊勝，1993）中的分析方法測定各指標(biāo)中干物質(zhì)、粗脂肪、粗灰分。

2.3.1 粗蛋白質(zhì)測定方法

（1）儀器設(shè)備：FOSS全自動凱氏定氮分析儀，分析天平

（2）溶液的制備：濃硫酸：化學(xué)純。1%硼酸吸收液：將l0g硼酸溶于1000ml蒸餾水；400 g/L氫氧化鈉溶液：400g氫氧化鈉溶解于1000ml蒸餾水中；混合指示劑：0.lg溴甲酚綠，0.lg甲基紅分別溶于100 ml 95 %乙醇，然后將10ml溴甲酚綠溶液與7 ml甲基紅溶液加入到1000ml的1 %硼酸溶液中。

（3）測定步驟：

①消化：準(zhǔn)確稱取0.2g試樣，無損失地轉(zhuǎn)移到消解管的底部，加入1勺催化劑（0.4g硫酸銅、6g硫酸鈉或硫酸鉀），再加入10ml濃硫酸搖勻，將消解管放在通風(fēng)櫥的消煮爐上以290℃炭化15min，然后將溫度調(diào)至420 ℃進行消解180 min，將消煮完的試驗樣品從消煮爐上取下，并冷卻至室溫，待測。

②蒸餾：在定氮儀的控制面板上輸入所稱飼料樣品的質(zhì)量數(shù)據(jù)，放下安全門，定氮儀對消煮液便開始蒸餾并進行自動滴定，滴定完畢后，定氮儀直接輸出CP含量，記錄數(shù)據(jù)。

2.3.2 中性洗滌纖維測定方法

（1）儀器設(shè)備：ANKOM纖維分析儀，濾袋，封口機，干燥器，分析天平，電熱鼓風(fēng)干燥箱

（2）測定步驟：

① 中性洗滌劑的制備：準(zhǔn)確稱取18.68g乙二胺四乙酸二鈉和6.8g硼酸鈉，一同放入1000ml的燒杯中，加入少量蒸餾水，加熱溶解后，再加入30g十二烷基硫酸鈉和l0ml乙二醇乙醚；稱取4.56g無水磷酸氫二鈉置于另一燒杯中，加少量蒸餾水，微微加熱，溶解后傾入第一個燒杯中，在容量瓶中稀釋至1000ml。

② 濾袋恒重（W1），稱取0.5g（±0.001g）飼料樣品（W2）直接裝入濾袋中，同時稱取二個空白袋，用以測定空白袋的校正系數(shù)（C1）。

③ 在距袋口0.5cm處用封口機封口，設(shè)法使樣品在袋中均勻分布。

④ 將樣品袋平放在樣品盤上，除了最頂層的樣品盤不放樣品，其余8層樣品盤每層放3個濾袋。各濾袋間成120°角擺放。

⑤ 將樣品盤放入洗滌容器中，然后注入1900～2000ml中性洗滌劑，擰緊容器蓋。按下振蕩和加熱的按鈕，計時90min。

⑥ 當(dāng)90分鐘以后（定時器發(fā)出嘟嘟聲），關(guān)閉加熱和振蕩開關(guān)，先打開廢液閥，將廢液排盡，關(guān)閉排液閥，打開容器蓋，加入大約1900～2000ml熱的蒸餾水（90～100℃），蓋好蓋，按下振蕩按鈕，持續(xù)振蕩濾袋3～5min。重復(fù)沖洗3次。

⑦ 將樣品架從容器中取出，用吸水紙吸收濾袋中的水分。再將樣品置于250ml燒杯中，加入丙酮沒過樣品，浸泡3min，取出，吸去丙酮，在通風(fēng)櫥晾干。將風(fēng)干后的樣品于105℃的烘箱中烘至少3h，取出后放入干燥器中，30min后稱重（W3）。

（3）結(jié)果計算：先在300℃下炭化20min左右,然后溫度升至550±20℃下灼燒3h,取出,在空氣中冷卻約1min,移入干燥器冷卻30min,稱重。再同樣灼燒1h,冷卻,稱重,直至兩次稱重之差小于0.001g為恒重。

⑷結(jié)果計算:

式中：W1—濾袋質(zhì)量，g

W2一樣品質(zhì)量，g

W3—提取過程后濾袋和樣品的質(zhì)量，g

C1一空白濾袋校正系數(shù)（提取后烘干的空白袋質(zhì)量/空白袋質(zhì)量）

每份樣品測定三個平行樣作為重復(fù)，用三者的算術(shù)平均值為結(jié)果。

2.3.3 酸性洗滌纖維的測定方法

（1）儀器設(shè)備：同上NDF。

（2）測定步驟：

① 酸性洗滌劑的配制：稱取20克CTAB溶于1000ml 1.0M的硫酸中，攪拌溶解，必要時過濾。慢慢加到己裝有500m1蒸餾水的燒杯中，冷卻后注入1000m1容量瓶中定容，標(biāo)定。

② 其余操作步驟同NDF。（3）結(jié)果計算：

每個試樣至少取兩個平行樣測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。粗灰分含量≥5%時，允許相對偏差為1%；粗灰分含量〈5%時，允許相對偏差為5%。

2.3.5 粗脂肪測定方法

（1）儀器設(shè)備：

實驗室用樣品粉碎機或研缽，分樣篩，分析天平，電熱式恒溫水浴鍋，恒溫烘箱

（2）溶液的制備：乙醚（GB 12591-90），分析純

（3）測定步驟：

① 稱樣（W）：稱取2g左右試樣，準(zhǔn)確至0.0001g，用濾紙包好，并以脫脂棉線系牢，再用鉛筆于濾紙包上標(biāo)記待放入的鋁盒號，然后將濾紙包放入相應(yīng)鋁盒中。

② 試樣+濾紙包+鋁盒烘干至恒重（W1）：將以上鋁盒開蓋置于105±2℃烘箱中烘6h，取出，蓋好鋁盒蓋，在干燥器中冷卻30min，稱重。再同樣烘干1h，冷卻，稱重，直至兩次稱重之差小于0.001g為恒重。

③ 乙醚浸提：將恒重的濾紙包放入索氏提取器的提脂腔中（注意濾紙包不能超過虹吸管上端），加入乙醚，乙醚加量以全部浸泡濾紙包為宜，裝好裝置，在60℃～75℃的水浴上加熱，使乙醚回流，控制乙醚回流次數(shù)為約10次/h，共回流約50～70次。

④ 浸提后，試樣+濾紙包+鋁盒再烘干至恒重（W2）：取出濾紙包，放回相應(yīng)鋁盒中，在室溫通風(fēng)處使乙醚揮發(fā)掉，然后開蓋置于105±2℃烘箱中烘6h，取出，蓋好鋁盒蓋，在干燥器中冷卻30min，稱重。再同樣烘干1h，冷卻，稱重，直至兩次稱重之差小于0.001g為恒重。

（5）結(jié)果計算：

每個試樣至少取兩個平行樣測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果。粗脂肪含量≥10%時，允許相對偏差為3%；粗脂肪含量〈10%時，允許相對偏差為5%。

式中：W1—濾袋質(zhì)量，g

W2一樣品質(zhì)量，g

W3—提取過程后濾袋和樣品的質(zhì)量，g

C1一空白濾袋校正系數(shù)（提取后烘干的空白濾袋質(zhì)量/空白濾袋質(zhì)量）

重復(fù)性同NDF。

2.3.4 粗灰分的測定方法

（1）儀器設(shè)備：實驗室用樣品粉碎機或研缽分樣篩，分析天平，感量0.0001g，高溫電爐，可控溫度在550±20℃，瓷坩堝，干燥器，用變色硅膠或氯化鈣作干燥劑

（2）測定步驟：

①空坩堝灼燒至恒重（W0）：將干凈坩堝放入高溫電爐，取出，在空氣中冷卻約1min，然后移入干燥器冷卻30min，稱重。再同樣灼燒，冷卻，稱重，直至兩次稱重之差小于0.0005g為恒重。

② 稱樣（W）：在已恒重的空坩堝中稱入2g左右試樣，準(zhǔn)確至0.0001g。

③ 坩堝+試樣灼燒至恒重（W1）：將稱好試樣的坩堝放入高溫電爐中，先在300℃下炭化20min左右，然后溫度升至550±20℃下灼燒3h，取出，在空氣中冷卻約1min，移入干燥器冷卻30min，

3 結(jié)果與分析

現(xiàn)蕾期CP含量最高（21.81%），盛花期最低（16.80%），初花期居中?，F(xiàn)蕾期及初花期三種紫花苜蓿中Ash含量分別比盛花期增高0.56%和0.57%（P〈0.01）。NDF和ADF的含量均隨著生育期的延長而顯著升高（P〈0.05）。

在所有的紫花苜蓿樣本中，肇東、龍牧803的CP含量顯著高于龍牧801（P〈0.01）。肇東Ash含量極顯著高于其他兩種紫花苜蓿（P〈0.01）。龍牧803的ADF含量顯著高于肇東，龍牧801的ADF含量居中。

生育期與品種對紫花苜蓿中CP的含量有顯著影響，并且存在明顯的互作效應(yīng)。且Ash含量受生育期、品種及互作的影響也極顯著（P〈0.01）。

綜上，隨著生育期的延長，CP 的含量極顯著降低（P〈0.01），NDF，ADF的含量顯著升高（P〈0.05）。生育期及品種的互作效應(yīng)對CP、Ash的含量有極顯著影響（P〈0.01）。

4 結(jié)論

生育期與品種對紫花苜蓿中CP、Ash和ADF影響顯著，并存在明顯的互作效應(yīng)。隨著生育期的延長，紫花苜蓿CP含量極顯著降低，NDF和ADF的含量極顯著升高。龍牧803的CP和ADF含量較高。

李春鳳（1973—），女，高級畜牧師，本科學(xué)歷，研究方向為畜牧技術(shù)推廣。