寧愷佳

(三門峽市食品藥品檢測中心,河南三門峽472000)

RP-HPLC測定金感膠囊中對乙酰氨基酚的含量

寧愷佳

(三門峽市食品藥品檢測中心,河南三門峽472000)

摘 要:目的建立金感膠囊中對乙酰氨基酚含量測定方法。方法采用反相高效液相色譜法,用Hypersil C18柱(5μm,4.6 mm×150 mm)為固定相,以甲醇-水(15∶85)為流動(dòng)相醋酸調(diào)節(jié)至p H 3.00,檢測波長為320 nm。結(jié)果對乙酰氨基酚進(jìn)樣量在0.20～2.00μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,平均回收率為99.79%(n=6)。結(jié)論所建方法簡便、準(zhǔn)確、靈敏度較高,可用于測定金感膠囊中對乙酰氨基酚的含量。

關(guān)鍵詞:反相高效液相色譜;金感膠囊;對乙酰氨基酚;含量測定

金感膠囊由金銀花、穿心蓮、板藍(lán)根、蒲公英、對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷氨、馬來酸氯苯那敏等7味藥組成;具有清熱解毒,疏風(fēng)解表之功效,用于普通感冒、流行性感冒,外感風(fēng)熱證,頭痛,鼻塞、流涕、咳嗽、咽痛等。我們通過實(shí)驗(yàn),采用RP-HPLC,測定對乙酰氨基酚的含量。實(shí)驗(yàn)證明,在我們敘述色譜條件下,各成分具有很好的分離效果和較高的理論塔板數(shù),測定方法快速簡便、靈敏、準(zhǔn)確度較高,可以用于該制劑的質(zhì)量控制和評價(jià)。

1　儀器與試藥

1.1儀器

LC-10ATvp高效液相色譜儀(島津),SPD-l0Avp檢測器,浙大智能N2000色譜工作站,超聲波清洗器,2010型紫外可見分光光度計(jì),十萬分之一分析天平,酸度計(jì)。

1.2試藥

對乙酰氨基酚對照品(批號10018 200408)由中國藥品生物制品檢定所提供。金感膠囊(貴州百靈制藥有限公司,市售)。甲醇為色譜純;體積分?jǐn)?shù)36%醋酸為分析純;水為純凈水。

2　方法與結(jié)果

2.1對照品溶液的制備

精密稱取對乙酰氨基酚對照品5 mg,加甲醇定容至50 m L,制成每1 m L含對乙酰氨基酚100μg的對照品溶液。

2.2 供試品溶液的制備

取膠囊內(nèi)容物0.9 g(相當(dāng)于2粒膠囊內(nèi)容物重量),精密稱定,置100 m L容量瓶中,加入甲醇50 m L,密塞,超聲處理(功率80 W,頻率60 KHz) 40 min,放冷至室溫,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,0.45 μm微孔濾膜濾過,取續(xù)濾液,即得。

2.3實(shí)驗(yàn)條件的選擇

色譜條件:依利特Hypersil C18柱(150 mm× 4.6 mm,5μm);流動(dòng)相:甲醇―水(15∶85)醋酸調(diào)酸度至p H 3.00;檢測波長:320 nm;柱溫為室溫;流速1.0 m L/min;進(jìn)樣量:20μL。在此條件下供試品中各物質(zhì)峰恰能實(shí)現(xiàn)基線分離,對乙酰氨基酚的HPLC圖譜見圖1、圖2。

2.4方法學(xué)考察[1-2]

2.4.1線性關(guān)系 取線性關(guān)系下的對照品溶液0.5、1.5、2.5、3.0、3.5、4.0、5.0 m L,分別定容至5 m L,以0.22μm有機(jī)微孔濾膜過濾后,分別進(jìn)樣20μL。按2.3項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測定,分別記錄色譜圖。各進(jìn)樣量重復(fù)進(jìn)樣3次,取其3次峰面積平均值,以峰面積Y對進(jìn)樣量X進(jìn)行線性回歸,得回歸方程為: Y=1 006.7X+89.863,r=0.999 4(n=6),結(jié)果表明對乙酰氨基酚在0.20～2.00μg質(zhì)量范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.4.2穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取線性關(guān)系下對乙酰氨基酚對照品溶液,以0.22μm有機(jī)微孔濾膜過濾后,每隔2 h進(jìn)樣1次,考察12 h,所得峰面積RSD為1.56%。實(shí)驗(yàn)表明,對乙酰氨基酚的甲醇溶液在放置12 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.4.3重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一批金感膠囊,按2.2項(xiàng)下供試品溶液的制備方法平行制備供試品溶液6份,以0.22μm有機(jī)微孔濾膜過濾后,每份取20μL進(jìn)樣,分別記錄對乙酰氨基酚的峰面積,計(jì)算其RSD為0.51%(n=6),表明重復(fù)性良好。

2.4.4精密度實(shí)驗(yàn) 取2.1項(xiàng)下對乙酰氨基酚對照品溶液,以0.22μm有機(jī)微孔濾膜過濾,每次進(jìn)樣20μL,重復(fù)進(jìn)樣6次,分別記錄其峰面積,計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.67%(n=6),結(jié)果表明,該方法精密度較好。

2.4.5回收率實(shí)驗(yàn) 采用加樣回收法,取同一批已知含量的金感膠囊,精密量取已知含量的供試品溶液5 m L,共6份,定量加入對乙酰氨基酚對照品溶液相當(dāng)于250μg對乙酰氨基酚的量,以0.22μm微孔濾膜濾過,按2.4.6項(xiàng)下的樣品含量測定方法進(jìn)行檢測,每次進(jìn)樣20μL,記錄色譜圖,計(jì)算得平均回收率為99.79%,RSD=1.41%(n=6),結(jié)果顯示,該方法準(zhǔn)確度較好。

2.4.6樣品含量測定 按2.2項(xiàng)下所述供試品溶液的制備方法配制6份不同批號金感膠囊供試品溶液,分別用0.22μm濾膜濾過,取續(xù)濾液,裝入樣品瓶中,按2.3項(xiàng)下色譜條件每份進(jìn)樣3次,記錄色譜圖,測定峰面積,由每個(gè)批號峰面積的平均值按外標(biāo)法分別計(jì)算金感膠囊中該成分的含量(mg/粒),結(jié)果見表1。

3　討論

3.1檢測波長的確定

對對乙酰氨基酚和綠原酸對照品溶液進(jìn)行190～400 nm范圍掃描,結(jié)果對乙酰氨基酚在257 nm處有最大吸收,綠原酸在327 nm處有最大吸收。考慮到該制劑中綠原酸含量較低,參考相關(guān)文獻(xiàn)[3-4]并進(jìn)行大量實(shí)驗(yàn),選擇綠原酸吸收強(qiáng)度相對較大同時(shí)對乙酰氨基酚也有吸收的320 nm處測定(綠原酸的含量測定另文探討)。

3.2流動(dòng)相的選擇

我們實(shí)驗(yàn)采用甲醇―水―醋酸流動(dòng)相,通過對幾種不同比例和酸度的流動(dòng)相進(jìn)行比較試驗(yàn),結(jié)果在甲醇-水(15∶85)醋酸調(diào)酸度至p H 3.00色譜條件下,待測成分的柱效較高,且分離理想,峰形較好,因而選用該流動(dòng)相進(jìn)行待測成分色譜分離與含量測定。

4　結(jié)論

我們實(shí)驗(yàn)采用RP-HPLC法測定金感膠囊中對乙酰氨基酚含量,結(jié)果對乙酰氨基酚進(jìn)樣量分別在0.20～2.00μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,平均回收率分別為99.79%(n=6)。實(shí)驗(yàn)表明該含量測定方法線性關(guān)系和精密度好、準(zhǔn)確度高、穩(wěn)定性及重復(fù)性均較好,適于藥物中對乙酰氨基酚的含量測定。

參考文獻(xiàn):

[1]付向紅,付春華.RP-HPLC測定感冒靈膠囊中對乙酰氨基酚、綠原酸的含量[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2004,11 (10):878―879.

[2]高光偉,馮向東,黃海欣.HPLC同時(shí)測定維C銀翹片中綠原酸、對乙酰氨基酚、維生素C、馬來酸氯苯那敏的含量[J].中成藥,2008,10(2):207―210.

[3]陳述,孟蕾蕾.HPLC同時(shí)測定維C銀翹片中綠原酸、對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏的含量[J].中國藥學(xué)雜志, 2009,18(1):65―66.

[4]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(二部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:234.

[責(zé)任編輯李武營]

RP-HPLC Determination of Paracetamol in Gingan Capsules

NING Kaijia
（Sanmenxia food and drug inspection center，Sanmenxia 472000，China）

Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of paracetarnol in Jingan Capsules.MethodsThe RP-HPLC was conducted on a Hypersil C18column（5μm，4.6mm×150 mm）with acetonitrile:water（15∶85）（which was adjusted to p H 3.00 by acetic acid）as mobile phase，and the detection wavelength at 320 nm.ResultsParacetamol showed good linear relationship in the following concentrations of range:0.20～2.00μg.The average recovery was obtained as 99.79%（n=6）.ConclusionThe method is reliable，accurate and specific.It can be used for the content determination of paracetamol in Jingan Capsules.

Key words：RP-HPLC；Jingan Capsules；paracetamol；contented termination

作者簡介:寧愷佳(1982―),女,三門峽市人,工程師,從事藥品及醫(yī)療器戒質(zhì)量監(jiān)測工作。

收稿日期:2015-03-12

中圖分類號:R927.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號:1672―7606(2015)02―0100―03