劉 威 張洪娟

（黑龍江科倫制藥有限公司·慶安 152400）

丹芪腦血康膠囊是在多年臨床應(yīng)用基礎(chǔ)上開發(fā)而成的現(xiàn)代中藥制劑，處方由丹參、黃芪、人工牛黃、三七、川芎、大黃等十余味中藥組成，具有補(bǔ)氣、活血、通絡(luò)功效，用于氣虛血瘀型中風(fēng)后半身不遂，口眼歪斜，語言蹇澀，口角流涎；或截癱，下半身痿廢等癥候。按照中藥新藥研究技術(shù)要求，在原有的部分藥效學(xué)和臨床初步研究基礎(chǔ)上，進(jìn)行了制劑和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等藥學(xué)研究，現(xiàn)將其研究內(nèi)容報(bào)告如下：

1 儀器與藥品

多功能粉碎機(jī)；中試多功能提取罐；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；藥用膠囊；KQ-300DB型超聲儀；十萬分之一電子天平；恒溫水浴。試劑均為分析純；大黃、川芎對照藥材，大黃素、黃芪甲苷、丹參酮ⅡA、豬去氧膽酸、人參皂苷Rg1、三七皂苷R1對照品購自中國藥品生物制品檢定所；藥品：自制中試樣品。

2 試驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 制劑工藝

處方藥味，黃芪、三七、人工牛黃粉碎成細(xì)粉，備用；丹參、川芎、大黃等酌予碎斷加五倍量90%乙醇于25～30℃浸提48小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度為1.22～1.25（60℃測）的浸膏。藥渣再加水煎煮兩次，分別為2小時(shí)和1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.22－1.25（60℃測）的清膏。上述浸膏與清膏與黃芪、三七及人工牛黃細(xì)粉混勻，加適量淀粉，制粒、干燥，裝膠囊，即得。

2.2 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)薄層鑒別

2.2.1 丹參的鑒別 取本品內(nèi)容物3g，加乙酸乙酯20ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取丹參酮ⅡA對照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。將制劑處方藥味去掉丹參，按照制劑工藝制成丹參空白樣品，以下操作同供試品處理方法制成丹參空白對照液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯（19：1）為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，空白對照液色譜則無對應(yīng)斑點(diǎn)。

2.2.2 黃芪的薄層鑒別 取本品內(nèi)容物2.5g，加甲醇40ml，索氏提取器回流提取4小時(shí)，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，加水飽和正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨試液洗2次，每次15ml，棄去氨試液，再用正丁醇飽和水洗2次，每次15ml，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。將制劑處方藥味去掉黃芪，按照制劑工藝制成黃芪空白樣品，以下操作同供試品處理方法制成黃芪空白對照液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水（13：6：2）10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)，空白對照液色譜則無對應(yīng)斑點(diǎn)。

2.2.3 川芎的鑒別 取本品內(nèi)容物2.5g，加乙醚30ml，超聲處理5分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對照藥材，加乙醚20ml，同法制成對照藥材溶液。將制劑處方藥味去掉川芎，按照制劑工藝制成川芎空白樣品，以下操作供試品處理方法制成川芎空白對照液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（9：1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，空白對照液色譜則無對應(yīng)斑點(diǎn)。

2.2.4 人工牛黃的鑒別 取本品內(nèi)容物3g，加甲醇30ml，超聲處理10分鐘，靜置，取上清液作為供試品溶液。另取豬去氧膽酸對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。將制劑處方藥味去掉人工牛黃，按照制劑工藝制成人工牛黃空白樣品，以下操作同供試品處理方法制成人工牛黃空白對照液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VI B）試驗(yàn)，吸取上述供試品、人工牛黃空白各溶液10～15μl，對照品溶液2～5μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇（20：25：2：3）上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，空白對照液色譜則無對應(yīng)斑點(diǎn)。

2.2.5 三七的鑒別 取本品內(nèi)容物8g，加水飽和的正丁醇60ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20ml，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷對照品Rg1及三七皂苷R1對照品，加甲醇分別制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。將制劑處方藥味去掉三七，按照制劑工藝制成三七空白樣品，以下操作同供試品處理方法制成三七空白對照液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)，空白對照液色譜則無對應(yīng)斑點(diǎn)。

2.2.6 大黃的鑒別 取本品內(nèi)容物5g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液蒸干，加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml，置水浴上加熱30分鐘，立即冷卻，用乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對照藥材0.1g，同法制成對照藥材溶液。再取大黃素對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。將制劑處方藥味去掉大黃，按照制劑工藝制成大黃空白樣品，以下操作同供試品處理方法制成大黃空白對照液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄Ⅵ B）試驗(yàn)，吸取對照品溶液及對照藥材溶液各4μl，供試品、空白溶液10～15μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏后，日光下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點(diǎn)；在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，相同的五個(gè)紅色主斑點(diǎn)，空白對照液色譜則無對應(yīng)斑點(diǎn)。

3 結(jié)果與討論

（1）制劑工藝研究中，處方中三七、人工牛黃為貴細(xì)藥材不適于提取，而黃芪粉性較強(qiáng)可以充當(dāng)一部分賦形劑，考慮以生藥形式入藥；丹參、川芎等藥材為兼顧脂溶性和水溶粉性成分，考慮設(shè)計(jì)以90%乙醇提取后藥渣再進(jìn)行水煎處理，以保證藥材的全成分，更好的發(fā)揮藥效。通過藥效學(xué)驗(yàn)證以及穩(wěn)定性考核該工藝穩(wěn)定、可行。

（2）上述丹參等六味藥的薄層鑒別方法，通過空白對照試驗(yàn)，陰性液無干擾，具備專屬性，可作為該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)鑒別方法。

[1] 國家藥典委員會編.中國醫(yī)藥科技出版社出版，《中華人民共和國藥典》2010年版一部.

[2] 韋文俊，羅遠(yuǎn). 救爾心膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中成藥，2009，31(11)：1801-1803.

[3] 王曉飛，金向群，等. 紫丹銀屑膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究 [J].中成藥，2007，29(12)：1872-1874.