劉永宏,趙 麗*,曹勝波,李龍凱,王海國(guó),廖秋萍,焦海宏
(1.塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院/新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)塔里木畜牧科技重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,新疆阿拉爾 843300;2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,湖北武漢 430070;3.新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司,新疆烏魯木齊 830032;4.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第三師紅旗農(nóng)場(chǎng)生產(chǎn)科,新疆阿圖什 845350)
小反芻獸疫(Peste des petits ruminants,PPR)是由小反芻獸疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)感染小反芻獸的一種嚴(yán)重的急性、烈性、接觸性傳染病,以高熱、口炎、胃炎、腹瀉和肺炎為特征[1]。小反芻獸疫主要通過(guò)直接和間接接觸傳染或呼吸道飛沫傳染,潛伏期為4d~5d[2]。在易感群中,嚴(yán)重暴發(fā)時(shí)致死率為100%,中等暴發(fā)時(shí)致死率不超過(guò)50%。山羊高度易感,綿羊次之[3];2004年8月,蘇丹出現(xiàn)了大量大型反芻動(dòng)物駱駝感染PPRV[4];牛和牦牛亦可感染,但無(wú)臨床癥狀,也不排毒[5];野生動(dòng)物(如白尾鹿)偶有感染,豬可被實(shí)驗(yàn)性感染,未見(jiàn)人感染的報(bào)道[3]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須報(bào)告的類動(dòng)物疫病,在我國(guó)列為一類動(dòng)物疫病。
1942年,PPR首次暴發(fā)于西非科特迪瓦[6],現(xiàn)在全球至少49個(gè)國(guó)家已發(fā)生或正在發(fā)生該疫情,其中至少23個(gè)亞洲國(guó)家[7],包括我國(guó)周邊的老撾、孟加拉國(guó)、俄羅斯、印度、巴基斯坦、塔吉克斯坦、哈薩克斯坦、蒙古國(guó)、緬甸、尼泊爾、阿富汗和韓國(guó)等國(guó)[7-9]。PPR給疫情國(guó)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,僅肯尼亞每年因該病造成的經(jīng)濟(jì)損失平均高達(dá)1 500余萬(wàn)美元[10]。
PPRV屬于副黏病毒科麻疹病毒屬,同屬的還有海豚麻疹病毒、犬瘟熱病毒、鼠海豹麻疹病毒、牛瘟病毒和麻疹病毒[11],PPRV 只有一個(gè)血清型[12]。PPRV基因組為單股負(fù)鏈RNA,大小為15 948nt,基因組3′末端為基因組啟動(dòng)子區(qū),5′末端為反向基因組啟動(dòng)子區(qū),6個(gè)基因排列順序?yàn)?′-N-P-M-F-HL-5′,依次編碼的6個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白為核衣殼蛋白(N)、磷蛋白(P)、基質(zhì)蛋白(M)、融合蛋白(F)、血凝蛋白(H)和大蛋白(L),P基因還編碼兩個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白C和 V[13]。
N蛋白通過(guò)自我組裝形成核衣殼粒子,與P蛋白和L蛋白協(xié)同作用調(diào)控病毒RNA轉(zhuǎn)錄和復(fù)制。N蛋白還是保守性較強(qiáng)的免疫源性蛋白,當(dāng)病毒感染時(shí)可以引起強(qiáng)烈的抗體反應(yīng)。此外,N蛋白上含有T細(xì)胞表位,在細(xì)胞免疫方面發(fā)揮著重要作用[14]。
根據(jù)N或F基因片段核苷酸序列,均可進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析,結(jié)果顯示目前PPRV分為4個(gè)基因系,Ⅰ系和Ⅱ系分布于西非,Ⅲ系病毒流行于東非、阿拉伯(阿曼和也門(mén))及印度南部,Ⅳ系僅見(jiàn)于中東、阿拉伯和印度次大陸[1,13]。比較兩種分別基于N和F基因部分序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析方法,N基因系統(tǒng)進(jìn)化分析能更加有力的根據(jù)地理來(lái)源進(jìn)行毒株的聚類,分析結(jié)果體現(xiàn)了小反芻獸疫病毒在全球自西向東(從西非到亞洲)的傳播,并在4個(gè)區(qū)域分別進(jìn)行獨(dú)立的演變。而F基因系統(tǒng)進(jìn)化分析更多的反映出病毒以時(shí)間為軸線的演變過(guò)程,從而為病毒在不同地理區(qū)域之間的傳播途徑提供線索[11]。更具體的結(jié)果,依賴于更多N或F基因全序列的報(bào)道。
2007年7月,我國(guó)西藏阿里地區(qū)首次在發(fā)生PPR[15],易感羊 9 780 只,發(fā)病 4 022 只,死 亡2 024只,發(fā)病率、死亡率和病死率分別達(dá)到41.1%、20.7%和50.3%[16]。隨后幾個(gè)月后,在革吉、日土、札達(dá)和改則4個(gè)縣出現(xiàn)該疫情,共20個(gè)疫點(diǎn),羊發(fā)病6 122只,死亡1 888只[17],病死率為30.84%;2008年2月,西藏阿里地區(qū)在某草場(chǎng)邊界處發(fā)現(xiàn)巖羊、黃羊等野生動(dòng)物感染本?。?8];2008年6月,西藏那曲地區(qū)尼瑪縣雙湖區(qū)嘎措鄉(xiāng)發(fā)生PPR疫情,病羊及同群羊合計(jì)6 690只[19];2010年5月14日,西藏自治區(qū)阿里地區(qū)日土縣多瑪鄉(xiāng)烏江村發(fā)生PPR疫情,發(fā)病羊133只,死亡69只,撲殺1 094只[17],病死率為51.88%。中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心等工作人員經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查和血清學(xué)檢測(cè)可基本確定,疫情最早在2005年冬季從日土縣日土鎮(zhèn)熱角村發(fā)生,當(dāng)時(shí)被認(rèn)為是羊快疫,并按照羊快疫處理。其后疫情通過(guò)混群、混牧以及引種等方式緩慢地向東推移,經(jīng)近2年的時(shí)間疫情擴(kuò)散至改則縣[16]。
2013年11月30日,新疆伊犁哈薩克自治州霍城縣三宮鄉(xiāng)一村發(fā)生PPR疫情,發(fā)病羊1 236只,死亡203只[20],病死率為16.42%;2013年12月20日,新疆阿克蘇地區(qū)庫(kù)車(chē)縣哈尼喀塔木鄉(xiāng)托依堡村發(fā)生PPR疫情,死亡26只;12月22日,阿克蘇地區(qū)柯坪縣玉爾其鄉(xiāng)玉拉拉村和上庫(kù)木力村發(fā)生PPR疫情,死亡44只[21];2013年12月21日,新疆哈密地區(qū)哈密市五堡鎮(zhèn)發(fā)生PPR疫情,發(fā)病羊176只,死亡34只,病死率為19.32%[22];2013年12月29日,新疆巴音郭楞蒙古自治州輪臺(tái)縣策達(dá)雅鄉(xiāng)薩依巴格村發(fā)生PPR疫情,發(fā)病羊160只,死亡38只[23],病死率為23.75%。
2014年1月22日,甘肅省武威市古浪縣發(fā)生PPR疫情,發(fā)病羊951只,死亡111只[24],病死率為11.67%。2014年2月10日,內(nèi)蒙古自治區(qū)巴彥淖爾市烏拉特后旗烏蓋蘇木和豐村,以及相鄰的杭錦后旗團(tuán)結(jié)鎮(zhèn)建設(shè)村發(fā)生PPR疫情,發(fā)病羊1 063只,死亡431只[25],病死率為40.55%。2014年2月13日,寧夏吳忠市鹽池縣花馬池鎮(zhèn)深井村發(fā)生PPR疫情,發(fā) 病 羊 116 只,死 亡 32 只[26],病 死 率 為27.59%。2014年3月11日,湖南邵陽(yáng)市洞口縣又蘭鎮(zhèn)金竹村發(fā)生PPR疫情,發(fā)病羊360只,其中死亡234只[27],病死率為65%。2014年3月17日,遼寧省錦州市北鎮(zhèn)市大市鎮(zhèn)邊家村、黑山縣白廠門(mén)鎮(zhèn)董屯村發(fā)生PPR疫情,發(fā)病羊24只,死亡11只[28],病死率為45.83%。3月29日,安徽省宿州市泗縣和蕭縣,馬鞍山市和縣,淮北市相山區(qū)和烈山區(qū)部分養(yǎng)殖戶從外地調(diào)入的羊只發(fā)生小反芻獸疫;3月30日,重慶市云陽(yáng)縣、巴南區(qū)部分養(yǎng)殖戶從外地調(diào)入的羊只發(fā)生小反芻獸疫[29]。7個(gè)縣區(qū)累計(jì)發(fā)病羊747只,死亡378只,病死率為50.6%。
目前,我國(guó)西藏、新疆、甘肅、內(nèi)蒙古、寧夏、湖南、遼寧、安徽和重慶均報(bào)道發(fā)生小反芻獸疫疫情,且西藏和新疆均已至少暴發(fā)5起;時(shí)間順序?yàn)槲鞑刈钤绯霈F(xiàn),新疆均發(fā)生在2013年年底,2014年短短2個(gè)多月甘肅、內(nèi)蒙古、寧夏、湖南、遼寧、安徽和重慶7省份發(fā)生PPR疫情;總體走向?yàn)橛晌髦翓|。我國(guó)早期發(fā)生小反芻獸疫疫情地區(qū),均位于中國(guó)邊境地區(qū),可能與周邊國(guó)家發(fā)生該疫情有很大關(guān)系,周邊國(guó)家疫情對(duì)我國(guó)畜牧業(yè)發(fā)展有很大影響。如新疆,周鄰8國(guó),其中在與巴基斯坦接壤的塔什庫(kù)爾干野生動(dòng)物自然保護(hù)區(qū),野生動(dòng)物很容易越過(guò)邊境進(jìn)入我國(guó);西藏地區(qū)與印度、尼泊爾、緬甸等PPRV感染國(guó)家接壤,其家養(yǎng)或野生小反芻獸較容易通過(guò)交通要道將PPRV傳入我國(guó)。此外,云南省有較長(zhǎng)的邊界與PPRV感染國(guó)家相鄰;其他省份,如青海周邊省份已發(fā)生PPR,提示該省份以及陜西、山西、河北等地也較危險(xiǎn)。
目前,PPR在中國(guó)已形成大流行趨勢(shì),除以上9省份外,其他省份可能也有發(fā)病未確診病例,將來(lái)可能會(huì)造成更大的蔓延擴(kuò)散態(tài)勢(shì)。另外,湖南省PPR疫情的發(fā)生,也體現(xiàn)了該疫情在我國(guó)傳播快、跨度大、風(fēng)險(xiǎn)高嚴(yán)峻形勢(shì)。提示相關(guān)部門(mén)做好相關(guān)防控工作,此時(shí)應(yīng)該考慮中國(guó)各地小反芻獸是否均接種PPR疫苗,通過(guò)疫苗接種產(chǎn)生抗體而不造成該疫情更大范圍的流行,不造成小反芻獸的發(fā)病、死亡和經(jīng)濟(jì)損失等。PPR弱毒苗雖然既能誘導(dǎo)體液免疫,又能誘導(dǎo)細(xì)胞免疫,而且經(jīng)免疫的動(dòng)物,體內(nèi)抗體可以維持較高水平。但是,弱毒苗會(huì)導(dǎo)致病毒毒力返強(qiáng),如果使用過(guò)程中操作不當(dāng),容易造成人工散毒。另外,弱毒苗熱穩(wěn)定性相對(duì)較差,保持疫苗的冷鏈運(yùn)輸較為關(guān)鍵。同時(shí)需要重視已發(fā)病并接種PPR疫苗地區(qū),防范初生羔羊的感染發(fā)病。綜合以上情況,根據(jù)目前國(guó)內(nèi)疫情發(fā)展形勢(shì),需有關(guān)部門(mén)做出全局性決策。
當(dāng)前,首先應(yīng)該針對(duì)不同區(qū)域采取不同措施防控。無(wú)PPR地區(qū):根據(jù)國(guó)家農(nóng)業(yè)部統(tǒng)一部署加強(qiáng)牲畜飼養(yǎng)管理,宣傳疫情的政策并實(shí)施嚴(yán)格的檢疫、消毒制度;嚴(yán)禁從存在本病的國(guó)家或地區(qū)引進(jìn)相關(guān)活體動(dòng)物及其產(chǎn)品;嚴(yán)密監(jiān)控本地區(qū)易感野生動(dòng)物的活動(dòng);建立邊境疫情監(jiān)測(cè)站,對(duì)野生動(dòng)物進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控。存在PPR地區(qū):平時(shí)做好預(yù)防接種和消毒工作,預(yù)防疫病的發(fā)生和流行。發(fā)現(xiàn)可疑疫情,應(yīng)按規(guī)定立即上報(bào),實(shí)行隔離封鎖措施。發(fā)現(xiàn)疑似病畜必須及時(shí)采集樣品送中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心國(guó)家外來(lái)動(dòng)物疫病診斷中心國(guó)家小反芻獸疫參考實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確診。一旦發(fā)現(xiàn)疫情,根據(jù)《小反芻獸疫防治技術(shù)規(guī)范》,按照“早、快、嚴(yán)、小”的原則,采取封鎖、撲殺、檢疫、消毒和無(wú)害化處理及疫源的追蹤調(diào)查和處理等綜合防控措施,及時(shí)、有效、徹底的在最小范圍內(nèi)控制和撲滅疫情。疫區(qū)及受威脅區(qū)的動(dòng)物進(jìn)行緊急預(yù)防接種。
PPR的防控,接種疫苗是一項(xiàng)重要舉措。由于PPRV與牛瘟病毒具有高度同源性,后者曾一度作為PPR的異源疫苗,至少可使山羊維持12個(gè)月抗PPRV的免疫保護(hù)。尼日利亞國(guó)家獸醫(yī)院曾將一株P(guān)PRV在Vero細(xì)胞連續(xù)傳代,成功制備了Ⅰ系PPR疫苗株,即Nigeria 75/1,該毒株商品化疫苗對(duì)羊的免疫保護(hù)期至少可達(dá)3年,這就意味著對(duì)于商品化羊只,因其生長(zhǎng)期較短,所以通過(guò)一次免疫便可提供完全保護(hù)[10]。新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的小反芻獸疫弱毒活疫苗,所采用毒株也為Nigeria75/1,該毒株全球第1株P(guān)PR疫苗株,是國(guó)際通用的小反芻獸疫弱毒活疫苗毒株,也是OIE向小反芻獸疫發(fā)生國(guó)和地區(qū)推薦的經(jīng)典疫苗毒株[30]。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[31-32],Nigeria75/1 疫苗無(wú)副作用,且可交叉保護(hù)其他群毒株的攻擊。由新疆天康畜牧生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的小反芻獸疫活疫苗,安全性研究結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致,對(duì)綿羊、山羊及懷孕母羊安全性良好,可在田間大規(guī)模使用[33],且臨床試驗(yàn)觀察和調(diào)查該疫苗田間使用情況,未發(fā)現(xiàn)接種疫苗引起的全身或局部不良反應(yīng),免疫后26個(gè)月,83.95%(820份血清)臨床免疫羊血清中抗體效價(jià)均在1∶10(國(guó)際標(biāo)準(zhǔn))以上,表明該疫苗在田間大規(guī)模使用是安全有效的,疫苗具有良好的免疫原性和較長(zhǎng)的免疫持續(xù)期[34]。但是,需要考慮的新情況,該疫苗的使用是否與口蹄疫、羊痘等疫苗有相互干擾作用,疫苗使用間隔時(shí)間短或免疫程序不合理等是否會(huì)導(dǎo)致流產(chǎn)等。
中國(guó)目前僅有新疆(新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司)和西藏(西藏自治區(qū)獸醫(yī)生物藥品制造廠)兩家農(nóng)業(yè)部指定小反芻獸疫疫苗生產(chǎn)企業(yè)。目前,中國(guó)9省市陸續(xù)報(bào)道PPR的存在,且僅2014年短短2個(gè)月7省市暴發(fā)該病,PPR疫情發(fā)展態(tài)勢(shì)嚴(yán)峻,以上兩家生產(chǎn)企業(yè)所生產(chǎn)PPR疫苗遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠中國(guó)小反芻獸免疫的需要,這樣下去可能造成該疫苗市場(chǎng)的混亂。
2011年,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織與國(guó)際糧農(nóng)組織聯(lián)合發(fā)布了牛瘟根除的消息,因牛瘟與PPR在諸多方面極為相似,因此前者根除的歷史經(jīng)驗(yàn)為后者有效防控甚至全球性根除提供技術(shù)支持。
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