王南溪,楊 偉,楊春平,楊 樺,楊學(xué)圳,沈雨曦

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院,森林保護(hù)省級重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川雅安 625014)

?

大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力和抗疲勞能力的影響

王南溪,楊 偉*,楊春平,楊 樺,楊學(xué)圳,沈雨曦

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院,森林保護(hù)省級重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,四川雅安 625014)

為探討大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物對KM小鼠學(xué)習(xí)記憶能力和抗疲勞能力的影響,本文采用Morris水迷宮法、爬竿實(shí)驗(yàn)和負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)分別測試灌胃了不同劑量該酶解產(chǎn)物30d后小鼠學(xué)習(xí)記憶與抗疲勞的情況。結(jié)果顯示,Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中,未灌胃大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物的對照組潛伏期比低、中、高劑量組長17.2%～62.8%,反應(yīng)次數(shù)少19.7%～164.3%,且中劑量組的潛伏期和反應(yīng)次數(shù)與對照組差異均極顯著(p<0.01)。爬竿實(shí)驗(yàn)和負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)中,未灌胃該酶解產(chǎn)物的對照組負(fù)重游泳成績比其他三組低1.9%～16.4%;爬竿成績低6.2%～29.8%,其中,中劑量組的這兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)成績均極顯著高于低、高劑量組(p<0.01)。表明大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物具有提高小鼠學(xué)習(xí)記憶能力和抗疲勞能力的功效,且影響程度與其劑量有關(guān),中劑量(1.67g/(kg·d))為較適劑量。

大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物,KM小鼠,學(xué)習(xí)記憶能力,抗疲勞能力

蛋白質(zhì)的攝入量反映了一個(gè)國家的營養(yǎng)水平[1],已有研究表明,我國人均蛋白質(zhì)攝入量低于世界平均水平[2],其攝入量的不足會給人體健康帶來隱患。如何解決蛋白質(zhì)資源短缺的問題,并提高我國居民膳食水平,已經(jīng)到了迫在眉睫的程度。因此,越來越多的人將目光投向新型蛋白源昆蟲—大麥蟲(ZophobsmorioL.),其不僅繁殖速度快,具有一定的人工養(yǎng)殖規(guī)模[3],且較其他資源昆蟲而言蛋白質(zhì)含量豐富,鮮蟲體的粗蛋白含量為22.3%[4-6];氨基酸組成合理,必需與非必需氨基酸的比值達(dá)0.79～0.88[7],超過了FA/WHO標(biāo)準(zhǔn)的推薦值[8]。大麥蟲蛋白質(zhì)具有健腦益智、調(diào)節(jié)免疫力、增強(qiáng)抗疲勞力等功效,其經(jīng)酶解后生成的氨基酸和多肽更易被動(dòng)物體吸收[9]。但是,目前對大麥蟲的研究還停留在飼料及飼料添加劑的開發(fā)利用層面上[10-11],對其在食品及食品添加劑、昆蟲蛋白生物活性功能方面的研究尚少[12-14]。本文以大麥蟲幼蟲為蛋白質(zhì)原料,用堿性蛋白酶酶解脫脂蟲粉獲得的酶解產(chǎn)物灌胃處理KM小鼠,并采用Morris水迷宮法、爬竿實(shí)驗(yàn)和負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)分別測試灌胃不同劑量酶解產(chǎn)物的小鼠的學(xué)習(xí)記憶與抗疲勞效果,并分析該酶解產(chǎn)物對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力與抗疲勞能力的影響,為進(jìn)一步開發(fā)和利用大麥蟲提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

KM小鼠 雌雄各40只體重在(20±2)g的斷乳小鼠；4kg大麥蟲幼蟲 均由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)森林保護(hù)實(shí)驗(yàn)室提供;乙醚 西隴化工股份有限公司,分析純;堿性蛋白酶 濰坊奧迪爾進(jìn)出口貿(mào)易有限公司;氫氧化鈉 中國成都高欣化學(xué)試劑廠,分析純;鹽酸 西隴化工股份有限公司,分析純。

DHG-9104電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;LD-Y300A型粉碎機(jī) 上海頂帥電器有限公司;SZF-06A型脂肪儀 上海精隆科學(xué)儀器有限公司;飛鴿牌TDL-5-A型離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠;JA2003A型電子天平 上海精天電子儀器有限公司;Morris水迷宮 上海欣軟信息科技有限公司;EthoVision3.0行為分析儀 荷蘭諾達(dá)斯信息技術(shù)有限責(zé)任公司;DELTA320型pH計(jì) 上海摩速科學(xué)器材有限公司;DK-S26恒溫水浴鍋 上海申生科技有限公司;S212恒速電動(dòng)攪拌器 上海凌科實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司;WI64537爬桿實(shí)驗(yàn)裝置 上海欣軟信息科技有限公司。

1.2 樣品的制備與特性

將4kg大麥蟲幼蟲洗凈放入80℃的烘箱中干燥至恒重,用粉碎機(jī)將其打磨成粉,并用定性濾紙包裹。將包好的蟲粉放入裝有150mL無水乙醚的索氏提取器,并置于55℃的恒溫水浴鍋中?？刂埔颐鸦亓鞔螖?shù)為(10±2)次/h,試樣抽提8h后取出。將得到的脫脂蟲粉烘干后加水配成濃度為6.7%±0.2%的溶液并煮沸滅菌10min,然后置于恒溫?cái)嚢杵髦屑訜嶂?59.5±0.5)℃。稱取適量堿性蛋白酶于(59.5±0.5)℃的恒溫水浴鍋中加熱10min,用NaOH溶液調(diào)pH至9.3±0.1后迅速加入備好的脫脂溶液酶解(3.2±0.4)h,酶底質(zhì)量比為3.7%±0.2%,酶解過程中不斷加入HCl溶液和NaOH溶液以維持pH恒定。酶解結(jié)束,沸水浴10min滅酶,冷卻至室溫,經(jīng)10000r/min離心10min,取上清液冷藏備用,得到的大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物的多肽含量為38.847mg/mL[15-18]。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥 實(shí)驗(yàn)小鼠的分組及飼養(yǎng):KM小鼠雌雄各20只隨機(jī)分成4組,即智力組大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物的低、中、高劑量組(A1、A2、A3),對照組(A4),每組雌雄小鼠各5只;另選雌雄各20只小鼠按照相同的方法處理,即體力組,用B表示。整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間,各組小鼠自由取食和飲用相同的飼料和酸化水,室內(nèi)溫度保持在(22±2)℃。

大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物劑量設(shè)定與灌胃:根據(jù)戚穎欣等人[19]報(bào)道的蠶蛹蛋白肽的人體推薦用量來計(jì)算出樣品的適用量為0.167g/(kg·d)。將低、中、高劑量設(shè)計(jì)為適用量的5倍、10倍、25倍,分別為0.83、1.67、4.17g/(kg·d),對照組為陰性對照。連續(xù)30d,每天定時(shí)給各組小鼠灌胃相應(yīng)劑量的樣品,每2d稱重一次并調(diào)整灌胃劑量。最后一次灌胃的次日開始對A、B組小鼠分別進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)和爬桿、負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)。

1.3.2 小鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn) 將灌胃結(jié)束后的A組小鼠放入水迷宮(Φ=90 cm)中進(jìn)行記憶訓(xùn)練,實(shí)驗(yàn)水溫(25±2)℃。每只小鼠每天訓(xùn)練其搜尋平臺4次,每次2min,如果2min未搜尋到平臺,教其爬上平臺。對小鼠進(jìn)行4d的水迷宮訓(xùn)練后第5d撤掉平臺測試其學(xué)習(xí)能力,每只小鼠測試1次。休息4d后,在第10d依照第5d的方法再次測試小鼠的記憶能力[20]。學(xué)習(xí)與搜尋行為均由EthoVision3.0行為分析儀進(jìn)行記錄與分析。

1.3.3 小鼠爬桿、負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn) 小鼠爬桿實(shí)驗(yàn):末次灌胃后24h將B組小鼠放在置于水溫(15±0.5)℃、深10cm的水盆上方的有機(jī)玻璃桿上端并讓其自主抓住爬桿,使其肌肉處于靜力緊張狀態(tài)。記錄小鼠從抓住爬桿到因肌肉疲勞無力從爬桿上滑落的時(shí)間,每只小鼠測試3次,累計(jì)3次時(shí)間為小鼠的爬桿成績。

小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn):爬竿實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,再次灌胃B組小鼠,24h后稱量小鼠體重并做好記錄。給每只小鼠的尾根部負(fù)荷其自身體重5%的鉛皮,然后將小鼠放入水溫為(25±1)℃的游泳箱,開始測試。記錄小鼠自開始游泳至溺水死亡的時(shí)間,作為其負(fù)重游泳成績。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用EthoVision3.0行為分析軟件處理Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù),經(jīng)行為儀處理后所得的水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果和爬桿實(shí)驗(yàn)結(jié)果、負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果均采用SPSS15.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物對小鼠體重增長的影響

本實(shí)驗(yàn)測定小鼠在灌胃大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物前及30d后的體重變化,并分別對智力組和體力組中不同劑量處理的小鼠的體重進(jìn)行多重比較,見表1。經(jīng)分析,灌胃前智力組和體力組中各處理的體重差異均不顯著(p>0.05)。灌胃該酶解產(chǎn)物30d后,智力組與體力組中對照組小鼠的體重均極顯著低于低、中、高劑量組(p<0.01);而高劑量組與低劑量組差異極顯著(p<0.01),與中劑量組無顯著差異(p>0.05),且兩組內(nèi)各處理的小鼠平均增重量呈現(xiàn)出從高、中、低劑量組到對照組依次降低的規(guī)律。

表1 大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物對小鼠體重的影響(n=10)Table 1 Effects of Zophobs morio protein hydrolysates on weight of mice(n=10)

注:W0:灌胃前KM小鼠的體重;WT:灌胃30d后KM小鼠的體重。將表中數(shù)據(jù)進(jìn)行同列比較,大寫字母不同表示差異極顯著(p<0.01);小寫字母不同表示差異顯著(p<0.05)。下同。

表2 小鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練成績(n=10)Table 2 Training results of mice in Morris water maze test(n=10)

表3 小鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)記憶及遺忘測試成績(n=10,Mean±S.E)Table 3 Test results of memory and forgetting of mice in Morris water maze test(n=10,Mean±S.E)

根據(jù)肽營養(yǎng)理論,蛋白質(zhì)以小肽的形式被吸收可以消除游離氨基酸在吸收過程中的電荷競爭,促進(jìn)氨基酸和一些礦質(zhì)元素的吸收[21]。在本實(shí)驗(yàn)中,大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物中的小肽促進(jìn)了小鼠對氨基酸和礦質(zhì)元素的吸收,有利于其的生長發(fā)育,因此,灌胃了該酶解產(chǎn)物的小鼠增重量顯著大于未灌胃的。實(shí)驗(yàn)表明,大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物對小鼠良好的生長發(fā)育有一定的促進(jìn)作用,且在給定劑量下,其增重量與灌胃該酶解產(chǎn)物的劑量呈正相關(guān)。

2.2 大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響

Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)是利用小鼠尋找隱藏在水中的休息場所來節(jié)約體力的本能,通過強(qiáng)迫小鼠學(xué)習(xí)尋找水中平臺來測試其對空間位置感和方向感的學(xué)習(xí)記憶能力。因此,訓(xùn)練過程中小鼠找到平臺的耗時(shí)越短,成績越好;而測試過程中以潛伏期和反應(yīng)次數(shù)作為小鼠空間定位學(xué)習(xí)和記憶能力的指標(biāo),潛伏期越短、反應(yīng)次數(shù)越多,表明學(xué)習(xí)記憶能力越強(qiáng)。水迷宮實(shí)驗(yàn)的訓(xùn)練和測試結(jié)果的方差分析見表2和表3。

從表2中水迷宮實(shí)驗(yàn)的訓(xùn)練結(jié)果可得,第1d各組間的訓(xùn)練成績無顯著差異(p>0.05);比較1d和4d的數(shù)據(jù)可知,低、中、高劑量組比對照組小鼠的訓(xùn)練成績提高幅度大38%～130.1%。提示經(jīng)過4d的訓(xùn)練,基本在同一水平上的各組小鼠的訓(xùn)練成績均有所提高,且灌胃了大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物的成績提高幅度均大于未灌胃的,表明該酶解產(chǎn)物可提高小鼠的訓(xùn)練成績。中劑量組第2d訓(xùn)練成績與對照組差異顯著(p<0.05),與低、高劑量組無顯著差異(p>0.05);第3d的訓(xùn)練成績與低劑量組無顯著差異(p>0.05),與高劑量組差異顯著(p<0.05),與對照組差異極顯著(p<0.01);第4d的訓(xùn)練成績與高劑量組差異顯著(p<0.05),與低劑量組和對照組的成績差異極顯著(p<0.01)。而且比較1d和4d的數(shù)據(jù)可知,中劑量組小鼠的訓(xùn)練成績提高幅度比低、高劑量組大21.5%～40.1%,提示中劑量為較適劑量,對小鼠學(xué)習(xí)能力的促進(jìn)效果較好。

訓(xùn)練4d后,在第5d和第10d分別對小鼠進(jìn)行了空間定位的學(xué)習(xí)記憶和遺忘程度的測試。通過表3可知,第5d對照組潛伏期比其他三組長19.1%～62.8%,極顯著長于中、高劑量組(p<0.01),顯著長于低劑量組(p<0.05);反應(yīng)次數(shù)比其他三組少19.7%～76.1%,與中劑量組差異極顯著(p<0.01)。第10d對照組潛伏期比其他三組長17.2%～39.8%,與中劑量組差異極顯著(p<0.01);反應(yīng)次數(shù)比其他三組少86.7%～164.3%(p<0.01)。提示大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物可提高小鼠的測試成績,促進(jìn)其學(xué)習(xí)記憶能力。第5d中劑量組的潛伏期極顯著短于低、高劑量組(p<0.01);反應(yīng)次數(shù)極顯著多于低劑量組(p<0.01),顯著多于高劑量組(p<0.05)。第10d中劑量組的潛伏期顯著短于高劑量組(p<0.05);反應(yīng)次數(shù)顯著多于低、高劑量組(p<0.05)。通過分別比較各組小鼠5d和10d的測試成績可知,中劑量組兩次測試的潛伏期都是最短的,反應(yīng)次數(shù)都是最多的。提示中劑量的大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的保持促進(jìn)效果最好。

研究表明,營養(yǎng)與學(xué)習(xí)記憶關(guān)系密切,學(xué)習(xí)記憶的過程需要食物中與各種營養(yǎng)素緊密相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)類物質(zhì)的參與[22]。本實(shí)驗(yàn)中,灌胃大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物后小鼠的Morris水迷宮訓(xùn)練和測試成績均顯著高于對照的原因可能是,該酶解產(chǎn)物給小鼠的智力發(fā)育提供的生物活性肽是其促進(jìn)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的主要成分。而關(guān)于大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物如何影響小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的生理生化機(jī)制,如其如何影響海馬腦源性神經(jīng)生長因子的表達(dá)量及NMDA受體基因和CREB受體基因的表達(dá)量等[23],還有待進(jìn)一步研究。

2.3 大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物對小鼠抗疲勞能力的影響

本實(shí)驗(yàn)以小鼠爬竿時(shí)間和負(fù)重游泳時(shí)間作為測量指標(biāo),來測定灌胃大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物30d后小鼠的體力。其中,負(fù)重游泳時(shí)間體現(xiàn)小鼠對抗運(yùn)動(dòng)疲勞的能力,爬竿時(shí)間體現(xiàn)其對抗靜力疲勞的能力。小鼠爬桿實(shí)驗(yàn)和負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)測試成績的方差分析見表4。

表4 小鼠爬桿實(shí)驗(yàn)和負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)測試成績Table 4 Test results of pole test and weight loading swimming test

表4中,灌胃不同劑量大麥蟲蛋白酶解產(chǎn)物后對照組負(fù)重游泳成績比低、中、高劑量組低1.9%～16.4%,與低、中劑量組差異極顯著(p<0.01)。中劑量組負(fù)重游泳成績比其他三組高12.2%～14.1%(p<0.01);低劑量組成績極顯著高于對照組(p<0.01),顯著高于高劑量組(p<0.05),高劑量組與對照組無顯著差異(p>0.05)。提示灌胃小鼠該酶解產(chǎn)物的劑量與其對抗運(yùn)動(dòng)疲勞的能力有一定的關(guān)系,其中,中劑量更有利于提高小鼠抗運(yùn)動(dòng)疲勞的能力,低劑量對小鼠的該項(xiàng)能力也有一定的促進(jìn)作用,高劑量的這項(xiàng)功效不明顯。

灌胃不同劑量大麥蟲蛋白酶解產(chǎn)物后對照組小鼠的爬竿成績比低、中、高劑量組低6.2%～29.8%,與低、中劑量組差異極顯著(p<0.01)。中劑量組爬竿成績比其他三組高22.5%～23.0%(p<0.01);低劑量組成績極顯著高于高劑量組和對照組(p<0.01),高劑量組顯著高于對照組(p<0.05)。提示灌胃小鼠該酶解產(chǎn)物的劑量與其對抗靜力疲勞的能力有一定的關(guān)系,其中,中劑量提高小鼠抗靜力疲勞能力的效果最好,低劑量效果其次,高劑量的這項(xiàng)功效不如低、中劑量。

已有研究表明,動(dòng)物肌肉組織的能量主要來源于外源支鏈氨基酸,而大麥蟲幼蟲的氨基酸組成中有較多的支鏈氨基酸(占氨基酸總量的14.8%)[7]。在特殊的應(yīng)急情況下,給小鼠灌胃的大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物為其補(bǔ)充了大量的外源支鏈氨基酸,這些支鏈氨基酸可以直接向小鼠的肌肉組織提供能量,減輕疲勞,同時(shí)使其機(jī)體更快地適應(yīng)高強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)[24]。但從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,高劑量的該酶解產(chǎn)物使小鼠的增重量增多反而導(dǎo)致了其抗疲勞能力的降低,因此,適量的該酶解產(chǎn)物才能更好地提高小鼠的抗疲勞能力。本實(shí)驗(yàn)的中劑量為大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物促進(jìn)小鼠抗疲勞能力的較適劑量。

3 結(jié)論

昆蟲資源豐富、蟲體營養(yǎng)價(jià)值高,將其體內(nèi)的營養(yǎng)成分采用水解酶技術(shù)處理后可以使其產(chǎn)品的品質(zhì)、食品的營養(yǎng)和消化利用性能得到改善[25-27],可以有效的解決世界人口急劇增長帶來的資源問題。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,灌胃大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物后小鼠的Morris水迷宮、爬竿和負(fù)重游泳測試成績均顯著高于對照,說明該酶解產(chǎn)物對其學(xué)習(xí)記憶能力和抗疲勞能力有一定的促進(jìn)作用;而中劑量組的測試成績均顯著高于低、高劑量組,表明不同劑量該酶解產(chǎn)物對小鼠學(xué)習(xí)記憶和抗疲勞能力的提高程度不同,1.67g/(kg·d)的中劑量是提高小鼠這兩項(xiàng)能力的較適劑量。上述研究結(jié)果初步證明了大麥蟲蛋白質(zhì)酶解產(chǎn)物具有促進(jìn)KM小鼠學(xué)習(xí)記憶能力和抗疲勞能力的功效,為進(jìn)一步探討該酶解產(chǎn)物對動(dòng)物智力及體力發(fā)育的影響,開發(fā)利用以大麥蟲幼蟲為原材料的功能性食品提供借鑒參考。

[1]穆利霞,廖森泰,肖更生,等.昆蟲蛋白的綜合利用研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代食品科技,2011,27(12):1507-1512.

[2]郭愛偉,熊春梅.昆蟲蛋白質(zhì)飼料在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].中國畜牧獸醫(yī),2008,35(11):166-167.

[3]李文賓,吳敏麗,廉振民,等.中國昆蟲資源研究開發(fā)現(xiàn)狀[J].氨基酸和生物資源,2008,30(4):21-25.

[4]黃瓊,周祖基,周定剛,等.七種昆蟲的營養(yǎng)成分分析[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào),2007,29(1):94-96.

[5]代春華,馬海樂,沈曉昆,等.黃粉蟲幼蟲及蛹中營養(yǎng)成分分析[J].食品工業(yè)科技,2009,30(4):315-317.

[6]黃瓊,胡杰,周定剛,等.兩種色型黃粉蟲的營養(yǎng)成分比較[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào),2012,34(3):292-294.

[7]楊學(xué)圳,楊偉,楊春平,等.大麥蟲的營養(yǎng)成分分析與評價(jià)[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,35(4):394-396.

[8]郭倩,張建新,何桂梅,等.大麥蟲蛋白質(zhì)的提取分離及抗氧化性研究[J].西北農(nóng)林學(xué)報(bào),2011,20(2):188-192.

[9]魯珍,穆利霞,秦小明,等.蠶蛹蛋白酶法水解及美拉德反應(yīng)改良其產(chǎn)物風(fēng)味的研究[J].食品工業(yè)科技,2012,33(24):242-246.

[10]劉小雁,容庭,梁祖滿,等.不同劑量大麥蟲蛋白粉替代魚粉對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,(20):119-121.

[11]Finke MD. Complete nutrient composition of commercially raised invertebrates used as food for insectivores[J]. Zoo Biology,2002,21(3):269-285.

[12]王層飛,李忠海,龔吉軍,等.生物活性肽的保健功能及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用研究[J].食品與機(jī)械,2008,3(24):128-131.

[13]代春華,馬海樂,顧小紅,等.黃粉蟲幼蟲粉酶解及體外抗氧化性研究[J].中國糧油學(xué)報(bào),2009,24(12):118-123.

[14]Giffel MC,Wagendorp A,Herrewegh A,et al. Bacterial spores in silage and raw milk[J]. Antonie Van Leeuwenhoek,2002,81(1-4):625-630.

[15]張建新,郭倩,何桂梅,等.大麥蟲水溶蛋白的分離純化及抗氧化性研究[J].食品科學(xué),2011,18(32):30-33.

[16]王偉,王楠,周兵,等.雙酶分步酶解蠶蛹蛋白及其產(chǎn)物抗氧化活性的研究[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012,24(2):300-304.

[17]歐曉峰,張建新,郭倩.復(fù)合酶法水解大麥蟲蛋白制備酸性多肽及其抗氧化活性[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2010,19(2):189-193.

[18]劉旭輝,賴泰君,孫建華,等.酶解蠶蛹蛋白制備蠶蛹活性肽工藝條件優(yōu)化[J].食品科技,2008,8:177-179.

[19]戚穎欣,孟軍,曹柏營,等.蠶蛹蛋白多肽對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的研究[J].食品科學(xué),2009,30(23):419-421.

[20]溫富春,許家潔,王玉紅,等.安神補(bǔ)腦液對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及腦內(nèi)蛋白質(zhì)合成的影響[J]. 中國中醫(yī)藥信息雜志,2007,14(8):30-31.

[21]Marciniak P,Grodecki S,Konopinska D,et al. Structure-activity relationships for the cardiotropic action of the Led-NPF-I peptide in the beetles Tenebrio molitor and Zophobas atratus[J]. Journal of Peptide Science,2008,14(3):329-334.

[22]張清安,李建科,范學(xué)輝.核桃油對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J].陜西師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2006,34(4):89-91.

[23]孫紅,夏淑芳,陳洪建,等.槲皮素對高脂膳食小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響[J].營養(yǎng)學(xué)報(bào),2012,34(4):353-357.

[24]盛晟,周杰,沈詠舟,等.蜂蛹富肽蛋白粉對大鼠免疫功能和血糖、血脂的影響[J].食品科學(xué),2010,31(3):250-252.

[25]張蓓,段小明,馮敘橋,等.水解酶技術(shù)在食品工業(yè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2013,39(10):192-200.

[26]Younes I,Ghorbel-Bellaaj O,Nasri R,et al. Chitin and chitosan preparation from shrimp shells using optimized enzymatic deproteinization[J]. Process Biochemistry,2012,47(12):2032-2039.

[27]Viikari L,Alapuranen M,Puranen T,et al. Thermostable enzymes in lignocellulose hydrolysis[J]. Advances in Biochemica Engineering/Biotechnology,2007,108:121-145.

Effect of protein hydrolysates fromZophobsmorioon learningand memory and anti fatigue abilities of mice

WANG Nan-xi,YANG Wei*,YANG Chun-ping,YANG Hua,YANG Xue-zhen,SHEN Yu-xi

(College of Forestry of Sichuan Agricultural University,Provincial Key Laboratory of Forest Protection,Ya’an 625014,China)

To investigate the effect of different doses ofZophobsmorioprotein hydrolysates on learning,memory and anti fatigue abilities,KM mice were intragastric administrated 30 days’ protein hydrolysates,through using Morris water-maze,climbing pole experiment and weight loading swimming test. Results showed that the incubation period of the control group without being administrated whose reaction times was 19.7%～164.3% less than the low,middle and high dose groups was 17.2%～62.8% longer than the other groups in the Morris water-maze,while the incubation period and reaction times of the middle dose group differed significantly from the control group(p<0.01). At the same time,the control group’s score of weight loading swimming test was 1.9%～16.4% lower than the other three groups and climbing pole experiment test was 6.2%～29.8% lower in the climbing pole experiment and weight loading swimming test,and the middle dose group got the significant higher results extremely than the low and high dose group(p<0.01). It suggested thatZophobsmorioprotein hydrolysates could enhance mice’s learning,memory and anti fatigue abilities which was significantly associated with the dosage intragastric administrated,of which moderate dosage(1.67g/(kg·d))was thought to be the most appropriate.

Zophobsmorioprotein hydrolysates;KM mice;learning and memory abilities;anti fatigue ability

2014-11-13

王南溪(1990-)，女，碩士研究生，研究方向：昆蟲資源開發(fā)與利用。

*通訊作者:楊偉(1964-)，男，博士，教授，研究方向：森林保護(hù)學(xué)。

四川農(nóng)業(yè)大學(xué)“211”工程雙支計(jì)劃項(xiàng)目(00370101)。

TS201.4

A

1002-0306(2015)05-0356-05

10.13386/j.issn1002-0306.2015.05.067