胥展志，李 暉，梁瀠丹，辜海英，侯艷鋒，張?zhí)旌?，?婧，江 婷

（1．成都中醫(yī)藥大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院2012級(jí)碩士研究生，四川 成都610075；2．成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院感染科，四川 成都610072）

證治探討

絞股藍(lán)有效成分及抗肝纖維化作用探討

胥展志1，李 暉2，梁瀠丹2，辜海英2，侯艷鋒1，張?zhí)旌?，陳 婧2，江 婷1

（1．成都中醫(yī)藥大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院2012級(jí)碩士研究生，四川 成都610075；2．成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院感染科，四川 成都610072）

肝纖維化是各種慢性肝病向肝硬化發(fā)展的必經(jīng)階段，其表現(xiàn)為各種致病因素（如嗜肝病毒、酒精、藥物、化學(xué)毒物、肝寄生蟲(chóng)等）所致的慢性肝病損傷和炎癥后組織修復(fù)過(guò)程的代償性反應(yīng)。中醫(yī)認(rèn)為，絞股藍(lán)味苦、微甘，性涼，歸肺、脾經(jīng)，具有健脾益氣，清熱解毒功能，主治體虛乏力、虛癆失精及白細(xì)胞減少癥、病毒性肝炎、慢性胃腸炎、慢性氣管炎等?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，絞股藍(lán)的有效成分具有抗肝纖維化的作用。

絞股藍(lán)；絞股藍(lán)皂苷；肝纖維化

絞股藍(lán)含有與人參皂苷類似的達(dá)瑪烷型絞股藍(lán)皂苷（Gypenside，GPs），現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)136種絞股藍(lán)皂苷，其酸性產(chǎn)物與人參皂苷的酸水解產(chǎn)物人參二醇具有相同的理化性質(zhì)，這在五加科植物中非常罕見(jiàn)，絞股藍(lán)也因此被譽(yù)為“第二人參”。絞股藍(lán)的有效成分中絞股藍(lán)總苷及絞股藍(lán)多糖有對(duì)抗肝纖維化作用，分析如下。

1 絞股藍(lán)有效成分

絞股藍(lán)屬葫蘆科多年生蔓生草本，又名七葉膽、五葉參等［1］。藥典最早記載于《救荒本草》，生長(zhǎng)于亞熱帶，全世界約有16種和3個(gè)變種，我國(guó)有15種和3個(gè)變種，廣泛分布于秦嶺及長(zhǎng)江以南地區(qū)，在湖北陜西等省廣泛栽培。

絞股藍(lán)有效成分為絞股藍(lán)總皂苷（GPs），其藥理作用廣泛。絞股藍(lán)皂苷分布于植物營(yíng)養(yǎng)器官，包括同化組織及韌皮部薄壁細(xì)胞，其含量因植物的部位不同而有所差異，一般情況下絞股藍(lán)葉中含量做多。絞股藍(lán)皂苷藥理作用因其產(chǎn)地、生長(zhǎng)環(huán)境、提取方法不同而有所差異。絞股藍(lán)地上部分可提取分離出蘆丁、商陸苷、丙二醇［2］。另含有黃酮、甜葉素，糖類成分有果糖、葡萄糖、半乳糖、低聚糖與多糖類成分。絞股藍(lán)中含有18種氨基酸，含量達(dá)到6.548μg/g；其中8種為人體必需氨基酸。絞股藍(lán)中還含有多種維生素與微量元素，其中鋅、銅、鉬、鐵、鉻等與人體增強(qiáng)免疫機(jī)能、抗腫瘤有關(guān)。藥理研究發(fā)現(xiàn)，絞股藍(lán)皂苷及絞股藍(lán)多糖均有一定抗肝纖維化作用。

2 絞股藍(lán)抗纖維化作用

2.1 對(duì)信號(hào)通路的影響

目前認(rèn)為，HSC是肝纖維化發(fā)生的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）CCl4誘導(dǎo)后的肝纖維化的是最重要的促進(jìn)膠原活化與肝纖維化的細(xì)胞因子。大鼠肝組織中TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及p-Smad2、p-Smad3蛋白表達(dá)增高，在肝纖維化形成過(guò)程中，TGF-β1/Smad信號(hào)通路活化，絞股藍(lán)總皂苷可以使大鼠肝組織TGF-β1蛋白表達(dá)顯著降低；p-Smad2及p-Smad3在絞股藍(lán)總皂苷蛋白表達(dá)顯著降低，提示經(jīng)絞股藍(lán)總皂苷作用后，CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化模型中TGF-β1/Smad信號(hào)通路被抑制，效應(yīng)環(huán)節(jié)在于對(duì)TGF-β1及p-Smad2、p-Smad3蛋白表達(dá)的抑制，發(fā)揮抗肝纖維化作用［3］。Chen等［4］以四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠為模型，研究發(fā)現(xiàn)絞股藍(lán)正丁醇提取部位及所含的絞股藍(lán)皂苷可抑制肝星狀細(xì)胞的增殖，降低單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）及mRNA表達(dá)，減少蛋白質(zhì)釋放，抑制I型膠原蛋白的表達(dá)，對(duì)大鼠的肝纖維化具有明顯的改善作用。

2.2 清除氧自由基

GPs可顯著降低免疫性肝纖維化模型大鼠肝組織中脂質(zhì)過(guò)氧化物L(fēng)PO的水平，同時(shí)升高血紅細(xì)胞中SOD全血中GSH-Px活性，各種致肝細(xì)胞損傷因子如病毒顆粒和免疫復(fù)合物均可激活肝內(nèi)單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生自由基，破壞細(xì)胞的膜性結(jié)構(gòu)，從而影響肝纖維化的進(jìn)展。GPs有可能是通過(guò)抑制單核巨噬、中性粒細(xì)胞釋放超氧陰離子，阻斷自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，從而防治肝細(xì)胞損傷、死亡以及由此引起的肝纖維化。GPs還可能通過(guò)調(diào)節(jié)升高肝細(xì)胞環(huán)腺苷酸水平，穩(wěn)定cAMP/cGMP比例，激活腺苷酸環(huán)化酶，抑制磷脂酶A活性，促進(jìn)胞質(zhì)Ca2+轉(zhuǎn)入致密管道系統(tǒng)，從而阻斷肝細(xì)胞壞死過(guò)程進(jìn)而影響肝纖維化進(jìn)展［5］。

龍碧波等［6］發(fā)現(xiàn)，絞股藍(lán)具有較強(qiáng)的抗脂質(zhì)過(guò)氧化損傷的作用，絞股藍(lán)可減輕運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生的內(nèi)源性自由基對(duì)小鼠的傷害。另外，絞股藍(lán)對(duì)小鼠肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞有顯著的保護(hù)作用，可減少組織酶的外泄。韋登明等［7］給四氯化碳誘發(fā)的大鼠肝纖維化模型進(jìn)行絞股藍(lán)液腹腔注射后，發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞變性壞死、纖維結(jié)締組織、線粒體腫脹程度及竇周隙增生的膠原纖維均有較明顯的改善，未見(jiàn)明顯假小葉形成。其高劑量組降低血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶效果明顯，且肝組織中MDA水平明顯下降，SOD明顯升高。提示GPs具有改善肝功能、清除自由基、抗脂質(zhì)過(guò)氧化的作用，并呈劑量效應(yīng)。

2.3 調(diào)節(jié)免疫

絞股藍(lán)的免疫調(diào)節(jié)作用主要是通過(guò)影響單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)、NK細(xì)胞活性、影響白介素、促干擾素誘生等方面。絞股藍(lán)總皂昔40mg/kg/d給小鼠灌胃10d，能明顯提高因環(huán)磷酞胺引起的脾NK細(xì)胞活性低下。另外，絞股藍(lán)多糖能顯著增強(qiáng)Heps小鼠NK細(xì)胞活性，且與劑量有一定關(guān)系，隨劑量的增大NK細(xì)胞活性也逐漸提高絞股藍(lán)總皂苷在體外能刺激大鼠脾細(xì)胞分泌白介素-2。絞股藍(lán)總皂苷可協(xié)同conA使正常小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生的IL-2明顯增高，使大黃所致脾虛小鼠低下的IL-2活性恢復(fù)至正常水平。用絞股藍(lán)總皂苷片治療慢性乙型肝炎46例，可見(jiàn)外周血單核細(xì)胞IL-2活性和IL-R2較治療前明顯升高。絞股藍(lán)總皂苷在體內(nèi)外均可明顯提高ConA誘導(dǎo)小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)IFN-γ的水平，絞股藍(lán)總皂苷在ConA協(xié)同下，在體內(nèi)外均可明顯提高大黃所致脾虛小鼠低下的INF-γ水平。另有研究報(bào)道，小鼠自由飲用絞股藍(lán)多糖1g/10ml，20d，其腹腔巨噬細(xì)胞補(bǔ)體Cb3受體和吞噬功能明顯提高［8］。

3 絞股藍(lán)多糖的作用

絞股藍(lán)多糖（gynos-temma pentaphyllum makino polysaccharide，PGP）具有抗腫瘤、提高免疫力和抗氧化等作用，且無(wú)任何不良反應(yīng)［9］。體外實(shí)驗(yàn)表明，絞股藍(lán)多糖在體外能夠降低四氯化碳損傷的HepG2肝細(xì)胞的凋亡率，對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷有顯著保護(hù)作用［10］。張從梅［11］用絞股藍(lán)多糖給四氯化碳大鼠灌胃，絞股藍(lán)多糖干預(yù)組能有效控制肝臟組織中iNOS的表達(dá)，逆轉(zhuǎn)細(xì)胞毒性因子對(duì)肝細(xì)胞的損傷，防止胞漿內(nèi)容物外漏，穩(wěn)定肝細(xì)胞膜，從而有效恢復(fù)肝功能，其中對(duì)ALT水平的降低最明顯。楊倚天等［12］發(fā)現(xiàn)PGP對(duì)CCl4急性肝損傷大鼠有明顯的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抗氧化，穩(wěn)定細(xì)胞膜和溶酶體膜防止肝細(xì)胞壞死有關(guān)，并發(fā)現(xiàn)對(duì)大鼠的最佳保護(hù)濃度為6mg/kg。

4 討 論

絞股藍(lán)全世界有13個(gè)種系，我國(guó)有11個(gè)種系，如短柄絞股藍(lán)、長(zhǎng)柄絞股藍(lán)、心籽絞股藍(lán)、甜味絞股藍(lán)、光葉絞股藍(lán)、毛葉絞股藍(lán)、喙果絞股藍(lán)。絞股藍(lán)有三葉、五葉、七葉、九葉之分，其中九葉甘味絞股藍(lán)皂苷含量最高，但我國(guó)境內(nèi)非常少見(jiàn)。其次是七葉甘味絞股藍(lán)，其藥用價(jià)值和保健功效是普通五葉絞股藍(lán)的5～10倍。近年來(lái)，在湖南省西南山區(qū)地帶發(fā)現(xiàn)了大面積的野生七葉絞股藍(lán)，皂苷含量很高，湖南綏寧藥用植物研究所及清華大學(xué)中藥現(xiàn)代化研究中心進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，皂苷含量高達(dá)8%～12%以上，藥用及保健價(jià)值非常高。藥理實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，絞股藍(lán)能增加人體血液循環(huán)中淋巴細(xì)胞活性，調(diào)節(jié)人體的免疫功能，增強(qiáng)體力，減輕衰弱、疲勞等癥狀，并且可以延緩衰老，改善腦力活動(dòng)，提高大腦機(jī)能。

肝纖維化是多種慢性肝病的共同病理過(guò)程，以肝組織內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)成分過(guò)度增生與異常沉積導(dǎo)致肝臟結(jié)構(gòu)和功能異常改變?yōu)樘卣鳌８卫w維化的發(fā)展過(guò)程，是肝臟動(dòng)態(tài)創(chuàng)傷-愈合過(guò)程，在肝硬化漫長(zhǎng)的病變過(guò)程中，肝纖維化階段是可逆的，阻斷或逆轉(zhuǎn)肝纖維化就有可能阻斷疾病向肝硬化發(fā)展的進(jìn)程，因此抗肝纖維化是慢性肝病治療中的重要環(huán)節(jié)。目前認(rèn)為，肝硬化共同的病理改變是以膠原蛋白為主的細(xì)胞外基質(zhì)成分過(guò)度沉積，導(dǎo)致肝臟結(jié)構(gòu)和功能異常。肝星狀細(xì)胞是肝纖維化發(fā)生的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。在慢性肝損傷過(guò)程中，HSC被激活，轉(zhuǎn)變?yōu)榧〕衫w維細(xì)胞分泌與合成膠原。ECM的合成與降解受到基質(zhì)金屬蛋白酶及其組織抑制因子的調(diào)節(jié)。

藥理研究發(fā)現(xiàn)，絞股藍(lán)具有抗肝纖維化的作用［13］。絞股藍(lán)可改變血流變學(xué)異常，抑制C反應(yīng)蛋白的形成。絞股藍(lán)總皂的主要作用表現(xiàn)在對(duì)TGF-β1/Smad信號(hào)通路的影響、清除氧自由基調(diào)節(jié)免疫等方面。絞股藍(lán)多糖也具有一定的抗氧化、調(diào)節(jié)免疫作用。

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R285.6

B

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2014-11-05

成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院院基金（2011-D-YY-05）

李 暉