不同分子分型乳腺癌TOPⅡα表達(dá)與新輔助化療療效的相關(guān)性

楊良權(quán)1，周東光1，婁歡歡2，李光輝1

(1秦皇島市婦幼保健院，河北秦皇島066000；2秦皇島市開發(fā)區(qū)醫(yī)院)

摘要：目的觀察不同分子分型乳腺癌DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα(TOPⅡα)表達(dá)與新輔助化療療效的相關(guān)性。方法化療前經(jīng)巴德針穿刺活檢病理檢查證實(shí)為乳腺癌的女性患者共141例，分子分型為Luminal A型28例、Luminal B型19例、三陰性型28例、Luminal B-like型35例、Her-2表達(dá)型31例，其乳腺癌組織中TOPⅡα表達(dá)陽性和陰性者分別為10例和18例、8例和11例、20例和8例、23例和12例、24例和7例。術(shù)前所有患者接受并完成新輔助化療，評定化療療效，分析各型乳腺癌的療效與TOPⅡα表達(dá)的關(guān)系。結(jié)果Luminal A型、Luminal B型、三陰性型、Luminal B-like型、Her-2表達(dá)型患者中TOPⅡα表達(dá)陽性和陰性者的化療有效率分別為60.0%(6/10)和55.6%(10/18)、62.5%(5/8)和54.5%(6/11)、90.0%(18/20)和87.5(7/8)、91.3%(21/23)和50.0%(6/12)、95.5%(23/24)和42.9%(3/7)；在Luminal B-like型、Her-2表達(dá)型乳腺癌中，TOPⅡα表達(dá)陽性和陰性者的化療有效率相比，分別為P<0.05、P<0.01；Luminal A型、Luminal B型、三陰性型乳腺癌中，TOPⅡα表達(dá)陽性和陰性者的化療有效率相比，P均>0.05。結(jié)論 在分子分型為Luminal B-like型、Her-2表達(dá)型乳腺癌中，TopⅡα陽性表達(dá)者新輔助化療的有效率高于TopⅡα陰性者，TopⅡα陽性表達(dá)可作為預(yù)測Luminal B-like型、Her-2表達(dá)型乳腺癌新輔助化療療效的指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：乳腺腫瘤；乳腺癌；乳腺癌分子分型;DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα；新輔助化療；多藥耐藥

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.43.030

中圖分類號(hào)：R737.9文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

doi[4] Lare S , Arnould L , Apetoh L, et al. Pathologic complete response to neoadjuvant chemotherapy of breast carcinoma is associated with the disappearance of tumor-infiltrating foxp3+ regulatory T cells [J]. Clin Cancer Res, 2008,14(8):2413-2420.

收稿日期：(2015-07-22)

隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，以腫瘤分子表達(dá)差異為基礎(chǔ)的乳腺癌分子分型對于解決腫瘤的異質(zhì)性、分期的合理性、預(yù)后判斷的準(zhǔn)確性及乳腺癌的個(gè)體化治療等問題將有重要意義。20世紀(jì)70年代開始的乳腺癌新輔助化療，目的是降低腫瘤分期以提高手術(shù)的切除率和保乳手術(shù)率，同時(shí)可以了解化療藥物的敏感性[1～3]。影響乳腺癌化療療效的因素有很多，而腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥是重要原因之一，多藥耐藥產(chǎn)生的機(jī)制是多基因參與、多步驟綜合作用的結(jié)果。DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα(TOP Ⅱα)作為耐藥基因之一，是目前研究的熱點(diǎn)。本研究對不同分子分型乳腺癌TOPⅡα表達(dá)與新輔助化療療效的相關(guān)性進(jìn)行了觀察，以便為乳腺癌制定個(gè)體化方案提供參考。

1資料與方法

2012年1月～2014年10月秦皇島市婦幼保健院收治的乳腺癌患者141例，均為女性，年齡31～61歲；臨床分期為Ⅱ期86例、Ⅲ期55例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①女性，可手術(shù)治療的乳腺癌，化療前經(jīng)超聲、CT、骨掃描等檢查排除遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，無同期發(fā)生的其他器官的惡性疾病；②入院前未接受內(nèi)分泌治療、化療及放療等影響腫瘤大小、臨床分期、淋巴結(jié)狀態(tài)的相關(guān)治療；③有可測量或可評價(jià)的腫瘤病灶，鉬鈀或B超可測病變直徑≥3 cm；④化療前經(jīng)巴德針穿刺活檢病理檢查證實(shí)為乳腺癌，且均為浸潤性導(dǎo)管癌，完善雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、CerbB-2、Ki-67、TOPⅡα檢查；⑤無明顯化療禁忌；⑥新輔助化療后接受保乳術(shù)或改良根治術(shù)，術(shù)后大體標(biāo)本行常規(guī)病理學(xué)檢查；⑦按2013中國抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌診治指南與規(guī)范的定義分類標(biāo)準(zhǔn)對乳腺癌進(jìn)行分子分型。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的Ⅳ期乳腺癌患者；②有化療禁忌、不能耐受化療的乳腺癌患者。

術(shù)前所有患者按EC×4→T×4的3周方案化療進(jìn)行化療(EC為表柔比星100 mg/m2、第1天,環(huán)磷酰胺600 mg/m2、第1天；T為多西他賽100 mg/m2)。2周期后進(jìn)行療效評估，期間評估無效(SD和PD)者中轉(zhuǎn)手術(shù)，有效(CR和PR)者完成所有周期化療后14～21 d接受手術(shù)治療。

計(jì)算化療有效率[有效率=(CR例數(shù)+PR例數(shù))/病例總數(shù)×100%]。分析各型乳腺癌化療療效與TOPⅡα表達(dá)的關(guān)系：采用Excel表格建立乳腺癌新輔助化療及相關(guān)因素?cái)?shù)據(jù)庫，進(jìn)行資料的篩選分析，轉(zhuǎn)入SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)和Fisher確切概率法，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

141例乳腺癌分子分型為Luminal A型28例、Luminal B型19例、三陰性型28例、Luminal B-like型35例、Her-2表達(dá)型31例，其乳腺癌組織中TOPⅡα表達(dá)陽性和陰性者分別為10例和18例、8例和11例、20例和8例、23例和12例、24例和7例。

Luminal A型、Luminal B型、三陰性型、Luminal B-like型、Her-2表達(dá)型患者中TOPⅡα表達(dá)陽性和陰性者的化療有效率分別為60.0%(6/10)和55.6%(10/18)、62.5%(5/8)和54.5%(6/11)、90.0%(18/20)和87.5(7/8)、91.3%(21/23)和50.0%(6/12)、95.5%(23/24)和42.9%(3/7)；在Luminal B-like型、Her-2表達(dá)型乳腺癌中，TOPⅡα表達(dá)陽性和陰性者的化療有效率相比，分別為P<0.05、P<0.01；Luminal A型、Luminal B型、三陰性型乳腺癌中，TOPⅡα表達(dá)陽性和陰性者的化療有效率相比，P均>0.05。

3討論

乳腺癌的治療已進(jìn)入分子生物學(xué)時(shí)代，以分子分型為基礎(chǔ)的個(gè)體化治療更有針對性，對提高乳腺癌化療效果、避免不必要的過度治療及改善預(yù)后具有重要意義。對患者在新輔助化療前后通過體檢或影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)可測量的病灶，可從臨床上評估化療效果，化療結(jié)束后行手術(shù)治療者還可從病理學(xué)角度再次評估乳腺癌化療效果。因此，有學(xué)者[4]認(rèn)為乳腺癌新輔助化療可以預(yù)測化療效果。但新輔助化療的療效有時(shí)不甚理想，而腫瘤的耐藥性是影響其療效的原因之一。桂賢等[5]報(bào)道，TOPⅡα表達(dá)高低與腫瘤耐藥成反比，其所介導(dǎo)的耐藥與細(xì)胞內(nèi)藥物靶酶含量及活性改變或DNA修復(fù)機(jī)制有關(guān)，主要機(jī)制如下：①TOPⅡα基因點(diǎn)突變或缺失：等位基因的突變、重排、甲基化、TOPⅡα 調(diào)節(jié)因子改變和TOPⅡα以外基因的改變，引起腫瘤細(xì)胞中TOPⅡα 蛋白減少和催化活性降低，改變了TOPⅡα蛋白的氨基酸序列和對藥物的敏感性，導(dǎo)致藥物作用靶分子減少，引起藥物誘導(dǎo)DNA斷裂減少。②TOPⅡα磷酸化水平提高：TOPⅡα的高磷酸化與其催化活性和易解離復(fù)合物形成呈負(fù)相關(guān)，酶的去磷酸化可降低酶的活性，也可對藥物的敏感性產(chǎn)生影響，從而產(chǎn)生耐藥。③ TOPⅡα水平降低：TOPⅡα和TOPⅡβ對藥物的敏感性不盡相同，天然藥物大多作用于TOPⅡα，而在形成耐藥后Top IIα 減少，這種亞型的轉(zhuǎn)換一般發(fā)生在基因水平，使抗癌藥物的作用靶點(diǎn)減少或喪失，產(chǎn)生耐藥[6]。因此，檢測腫瘤細(xì)胞中TOPⅡα蛋白含量對篩選抗癌藥物很重要，可作為判定乳腺癌對抗癌藥物的敏感性或抗藥性的指標(biāo)[7]，有助于臨床對乳腺癌化療藥物的選擇。以蒽環(huán)類序貫紫杉類為主的化療方案是目前最為常用的乳腺癌輔助化療方案。TOPⅡα表達(dá)水平是藥敏基礎(chǔ)，其高表達(dá)者對TOPⅡα 抑制劑敏感，腫瘤的預(yù)后也較好；而TOPⅡα低表達(dá)或活性下降則導(dǎo)致TOPⅡα抑制劑細(xì)胞毒作用降低，使腫瘤對抗癌藥物敏感性下降、耐藥性增高。Lumnianl A型和Luminal B型乳腺癌中TOPⅡα呈低表達(dá)，抗癌藥物的作用靶點(diǎn)減少，化療的有效性較差。在Her-2擴(kuò)增的Luminal B-like和Her-2表達(dá)型中，新輔助化療的有效率分別為91.3%和95.5%，這與TOPⅡα高表達(dá)及Her-2擴(kuò)增有關(guān)。芬蘭Tampere大學(xué)[8]首先報(bào)道了TOPⅡα基因的異常(擴(kuò)增或缺失)，其體外實(shí)驗(yàn)研究提示 TOPⅡα和Her-2基因均擴(kuò)增的乳腺癌細(xì)胞對蒽環(huán)類藥物更加敏感，而Her-2擴(kuò)增、TOPⅡα不擴(kuò)增的細(xì)胞對蒽環(huán)類藥物敏感性差。Nielsen等[9]通過67例乳腺癌患者經(jīng)阿霉素治療后的研究結(jié)果證實(shí)，TOPⅡα擴(kuò)增與Her-2呈正相關(guān)，而TOPⅡα擴(kuò)增亦與其臨床療效關(guān)系密切，即95%的患者當(dāng)TOPⅡα與Her-2共擴(kuò)增時(shí)其療效明顯高于其他亞組(P=0.038)。蒽環(huán)類藥物化療的療效可通過TOPⅡα基因表達(dá)情況來預(yù)測，而蒽環(huán)類療效通過Her-2預(yù)測其實(shí)質(zhì)是TOPⅡα表達(dá)發(fā)揮作用的[10]。這與本研究結(jié)果一致，證實(shí)了Luminal B-like型和Her-2表達(dá)型乳腺癌中TOPⅡα的表達(dá)較其他分子分型乳腺癌新輔助化療的有效率更高。但楊燕華等[11]報(bào)道，蒽環(huán)類藥物可以通過多種機(jī)制誘導(dǎo)細(xì)胞的死亡，在乳腺癌中蒽環(huán)類藥物殺死腫瘤細(xì)胞的機(jī)制不一定只是通過抑制TOPⅡα，可能比預(yù)測的更為復(fù)雜，還需進(jìn)一步探索。

三陰性乳腺癌是一種特殊類型的乳腺癌，具有特殊的生物學(xué)行為及臨床病理特征，由于缺乏內(nèi)分泌治療及針對Her-2的分子靶向治療方法，其治療手段的選擇相對于其他類型乳腺癌也就受到限制，目前公認(rèn)的是以化療為主的綜合治療手段。理論上講，TOPⅡα陽性者較陰性者的新輔助化療有效率高，但在本研究中三陰性型乳腺癌患者TOPⅡα陰性和陽性者的化療有效率差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這可能與三陰性乳腺癌自身的特殊性、影響新輔助化療的其他因素、樣本量不足、未予具體分型等有關(guān)。在后續(xù)研究中，將加大樣本量，具體分型，進(jìn)行多因素分析，進(jìn)一步探討其TOPⅡα在三陰性乳腺癌中的表達(dá)與新輔助化療療效的關(guān)系。

參考文獻(xiàn)：

[1] Charfare H, Limongelli S, Purushotham AD. Neoadjuvant chemotherapy in breast cancer [J]. Br J Surg, 2005,92(1):14-23.

[2] 何建苗,崔科英,蒲永東,等.新輔助化療及保乳手術(shù)在Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌中的治療作用[J].中國普通外科雜志,2010,19(5):478- 481.

[3] Gianni L, Eiermann W, Semiglazov V, et al. Neoadjuvant chemotherapy with trastuzumab followed by adjuvant trastuzumab versus neoadjuvant chemotherapy alone, in patients with Her2-positive locally advanced breast cancer (the NOAH trial): a randomised controlled superiority trial with a parallel Her2-negative cohort[J]. Lancet, 2010,375(9712):377-384.

[5] 桂賢,劉會(huì)敏.腫瘤多藥耐藥發(fā)生機(jī)制的研究進(jìn)展 [J].上海醫(yī)學(xué)，2005,28(2)：161-164.

[6] Ludwig JA. Personalized therapy of sarcomas: integration of biomarkers for improved diagnosis, prognosis, and therapy selection [J]. Curr Oncol Rep, 2008,10(4):329-337.

[7] Germano S, O′Driscoll L. Breast cancer: understanding sensitivity and resistance to chemotherapy and targeted therapies to aid in personalised medicine [J]. Curr Cancer Drug Targets, 2009,9(3):398-418.

[8]J?rvinen TA, Tanner M, Rantanen V，et al. Amplification anddeletion of topoisomerase IIalpha associate with Erb-2 amplification and affect sensitivity to topoisomerase Ⅱ inhibitor doxorubicin in breast cancer[J]. Am J Pathol, 2000,156(3):839-847.

[9] Nielsen KV, Müller S, Moller S，et al. Aberrations of Erb-2 and TOP2A genes in breast cancer [J]. Mol Oncol, 2010,4(2):161-168.

[10] Mukherjee A, Shehata M, Moseley P, et al. Topo2α protein expression predicts response to anthracycline combination neo-adjuvant chemotherapy in locally advanced primary breast cancer [J]. Br J Cancer, 2010,103(12):1794-1800.

[11] 楊燕華，王樹森.乳腺癌中TOP2A與蒽環(huán)類藥物關(guān)系的研究進(jìn)展[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志，2014,21(8)：1029-1033.