嚴(yán) 瑋
(江蘇省南通市中醫(yī)院西病區(qū)藥房,江蘇 南通 226001)
佛手系蕓香科植物佛手的干燥果實(shí),具有疏肝理氣、止痛和胃、燥濕化痰的功效,用于治療肝胃氣滯、胸脅脹痛、胃脘痞滿(mǎn)、食少?lài)I吐、咳嗽痰多等疾病[1]。佛手原產(chǎn)印度,在我國(guó)已有400多年的種植和應(yīng)用歷史,主要產(chǎn)于浙江、廣東、廣西、福建、四川、云南等省。佛手其根莖、葉、花、果均可入藥[2]?,F(xiàn)將佛手的化學(xué)成分、藥理作用研究綜述如下。
揮發(fā)油。馬越等[3]采用超臨界CO2萃取技術(shù)提取佛手中的揮發(fā)油,確定了最佳工藝條件為萃取溫度60℃、萃取壓力40MPa、分離溫度35℃、分離壓力10MPa;通過(guò)GC-MS的分析鑒定其含有54種化學(xué)成分,含量前六位分別為β-石竹烯、α-石竹烯、ν-松油烯、桉樹(shù)腦、冰片酮、D-檸檬烯。鐘云等[4]采用頂空固相萃取及GC-MS法,分析了廣佛手不同成熟期的鮮果中揮發(fā)性物質(zhì)含量成分及變化。從花后160~200d的5個(gè)成熟期共鑒定出25種成分,揮發(fā)油以檸檬烯和松油烯為主,占含量的96%以上,兩主要烯的含量之和從花后160~200d分別為74.48%、73.20%、79.19%、77.39%、73.18%,所以花后180d為佛手采收最佳期。趙靜芳等[5]對(duì)佛手葉與佛手果中揮發(fā)油的含量及組成進(jìn)行了比較,結(jié)果金華佛手葉中揮發(fā)油含量為0.58%,鑒定出30種化學(xué)成分;杭州佛手葉中揮發(fā)油含量為0.32%,鑒定出40種化學(xué)成分,佛手鮮果揮發(fā)油含量為1.2%。揮發(fā)油主要成分為檸檬烯和α-檸檬醛。羅朵生等[6]研究了生佛手和制佛手,兩種佛手揮發(fā)油提取率分別為0.68%和0.35%,鑒定出23種主要揮發(fā)性化合物。生佛手以2,3-丁二醇、檸檬烯、ν-松油烯、橙花醇、香葉醇等不飽和化合物為主;制佛手中2,3-丁二醇含量增加,檸檬烯、ν-松油烯、橙花醇、香葉醇含量降低。林敏浩等[7]研究了水蒸氣蒸餾法提取廣佛手揮發(fā)油的最佳工藝為料液比1∶3,蒸餾時(shí)間6h,助劑氯化鈉濃度9%,此時(shí)精油得率為3.81%,主要有烯烴類(lèi)、醇類(lèi)和醛類(lèi)組成,分別占精油相對(duì)百分含量的39.75%、24.73%、26.38%。
黃酮類(lèi)。李勇等[8]研究清炒、蒸制、微波等佛手炮制品的總黃酮含量為微波佛手(90s)>制佛手>生佛手>炒佛手。鄧祥等[9]確定了超臨界CO2萃取技術(shù)提取川佛手中的總黃酮的最佳工藝參數(shù)為萃取壓力30MPa、萃取溫度50℃、料液比100∶120g/mL、萃取時(shí)間為2.0h,此條件下總黃酮的萃取率為3.79%。章斌等[10]確定了復(fù)合酶法提取佛手總黃酮的最佳工藝條件:酶用量1.0%(E/S)、酶解時(shí)間120min、酶解溫度45℃、PH4.5,此條件下的佛手總黃酮得率為4.093%。鄧祥等[11]采用超聲波法提取川佛手中的總黃酮,得到川佛手總黃酮的最佳提取工藝:乙醇體積分?jǐn)?shù)60%、超聲溫度45℃、料液比1∶20(g·mL-1)、超聲時(shí)間1.0h和超聲功率900W,提取最大率4.160%。
多糖。李勇等[12]以紫外-可見(jiàn)分光光度法,采用苯酚-硫酸法測(cè)定佛手清炒、蒸制、微波不同炮制品中總多糖含量,結(jié)果以水為溶劑時(shí)佛手總多糖提取率高,炮制前后總多糖含量無(wú)明顯變化。紀(jì)躍芝等[13]確定了傳統(tǒng)方法提取佛手多糖的最佳工藝條件為提取次數(shù)2次,浸提時(shí)間1.5h,提取溫度100℃,料液比1∶20。章斌等[14]探討復(fù)合酶法提取佛手多糖獲的最佳工藝條件為酶用量1.2%、酶解時(shí)間150min、料液比1∶40、酶解溫度50℃,此條件下的佛手多糖得率為4.13%。楊繼等[15]通過(guò)單因素和多因素實(shí)驗(yàn),采用響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法對(duì)金佛手果葉多糖以水提取的最佳提取工藝進(jìn)行了研究,結(jié)果表明多糖最佳提取組合是提取時(shí)間247min、溫度91℃、料液比1∶64,此時(shí)1g金佛手果,葉粉多糖得率分別是4.542和1.776/100g。盧夢(mèng)驍?shù)萚16]運(yùn)用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法研究了微波法提取佛手多糖的最佳工藝條件:提取時(shí)間8min、微波提取功率500W、料液比1∶20。曹詣斌等[17]用DEAE葡聚糖A-50離子交換色譜分離得到不同的多糖;金佛手和建佛手各分離得到3種多糖,川佛手分離得到4種多糖。將佛手多糖經(jīng)酸水解后,用硅膠G薄層色譜分析,金佛手多糖和建佛手多糖各檢測(cè)到3種單糖成分為甘露糖、葡萄糖和半乳糖;川佛手多糖檢測(cè)到5種單糖成分為鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖。李忻等[18]利用微波提取方法確定了提取佛手多糖的最佳工藝條件:提取次數(shù)2次,浸提時(shí)間8min,微波功率550W,料液比1∶20。
微量元素。農(nóng)東紅等[19]利用微波消解/電感耦合等離子體發(fā)射光譜法(ICP-OES),同時(shí)測(cè)定了不同種質(zhì)佛手的銅、鐵、錳、鋅、硒5種微量元素的含量。結(jié)果表明佛手含有較豐富的鐵,硒的含量最低;不同種質(zhì)間金佛手的銅、鐵、錳、鋅微量元素含量最高,云佛手微量元素含量最低。秦書(shū)芝等[20]采用微波消解法處理佛手,利用火焰原子吸收法對(duì)佛手中鋅、銅、錳、鐵4種微量元素含量進(jìn)行測(cè)定分析。結(jié)果佛手中鋅、銅、錳、鐵含量分別為23.33、4.51、12.13、138.54μg/g。楊繼等[21]采用感應(yīng)耦合等離子體-質(zhì)譜法(ICP-MS)對(duì)金佛手果葉中的礦物成分進(jìn)行了分析,結(jié)果表明金佛手果和葉分別含鉀(21539.137、30070.220)(mg·kg-1),鈉83.046、52.817(mg·kg-1),鈣4611.933、25775.567(mg·kg-1),鎂772.481、2512.571(mg·kg-1),鋅11.026、29.931(mg·kg-1),鐵85.052、218.018(mg·kg-1),鉻0.519、0.878(mg·kg-1),銅5.593、6.363(mg·kg-1),鈷0.095、0.460(mg·kg-1),鎳1.740、4.025(mg·kg-1),鉬0.316、0.441(mg·kg-1),錳9.595、103.693(mg·kg-1),硒0.025、0.184(mg·kg-1)。
其他成分。鄧祥等[22]采用超聲波法提取川佛手中的多酚,進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn),確定了多酚的最佳提取工藝參數(shù)為提取溫度50℃,乙醇體積分?jǐn)?shù)60%,料液比1∶30g·mL-1,提取時(shí)間1.5h,最大提取率達(dá)到1.95%。曾琦斐[23]采用LC98-IAAA型氨基酸分析儀對(duì)浙江佛手柑中氨基酸種類(lèi)和含量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明浙江佛手柑中含有異亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、絲氨酸、酪氨酸、脯氨酸、甘氨酸、組氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸等18種氨基酸。尹鋒等[24]從佛手中分離得到5,7-二甲氧基香豆素(檸檬油素)、7-羥基-6-甲氧基香豆素(莨菪亭)、7-羥基香豆素(傘形花內(nèi)酯)7-羥基-5-甲氧基香豆素、香豆酸、6,7-二甲氧基香豆素、檸檬苦素、諾米林、豆甾醇。
止咳平喘祛痰。施長(zhǎng)春等[25]采用水蒸氣蒸餾法提取佛手揮發(fā)油,對(duì)實(shí)驗(yàn)組豚鼠和小鼠預(yù)先以高、中、低劑量的佛手揮發(fā)油灌胃,模型對(duì)照組動(dòng)物則以9g.L-1鹽水灌胃,另外采用急支糖漿、氨茶堿、鮮竹瀝為止咳、平喘、祛痰的陽(yáng)性藥物對(duì)照組。用藥后觀察各組在密閉玻璃實(shí)驗(yàn)測(cè)試箱內(nèi)噴霧枸櫞酸所致豚鼠引咳潛伏期、組胺噴霧致喘的潛伏期和腹腔注射苯酚紅溶液后小鼠氣管酚紅排泌量。結(jié)果揮發(fā)油高、中、低劑量組和急支糖漿組引咳潛伏期均較模型組長(zhǎng)(P<0.05)。揮發(fā)油高、中、低劑量組豚鼠在以組胺噴入致喘的潛伏期均較模型組長(zhǎng)(P<0.05)。揮發(fā)油高、中、低劑量組氣管酚紅排泌量均顯著大于模型組(P<0.05)。佛手揮發(fā)油對(duì)支氣管哮喘動(dòng)物具有止咳、平喘、祛痰等治療作用。尹洪萍等[26]采用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和霧化激發(fā)的方法建立小鼠哮喘模型,用佛手乙酸乙酯提取液(10g/kg)對(duì)哮喘小鼠進(jìn)行干預(yù),并以地塞米松作為陽(yáng)性對(duì)照,佛手乙酸乙酯提取液組和地塞米松組的外周血白細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞均顯著低于哮喘模型組(P<0.05或P<0.01),所以佛手乙酸乙酯提取液能抑制哮喘模型小鼠嗜酸性粒細(xì)胞性炎癥反應(yīng)。
抗腫瘤。麻艷芳等[27]探討佛手揮發(fā)油具有抑制MDA-MB-435癌細(xì)胞增殖的作用。低、中濃度的佛手揮發(fā)油誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡且將細(xì)胞周期阻滯在S期和G2/M期,而高濃度的佛手揮發(fā)油引起細(xì)胞壞死。呂學(xué)維等[28]研究佛手揮發(fā)油可有效殺傷體外培養(yǎng)的小鼠B16黑色素瘤細(xì)胞,低中劑量的佛手揮發(fā)油可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,高劑量的佛手揮發(fā)油可致細(xì)胞壞死。邵鄰相等[29]實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,佛手揮發(fā)油能抑制小鼠B16黑色素實(shí)體瘤的生長(zhǎng),50mg/kg劑量的佛手揮發(fā)油對(duì)雌性荷瘤小鼠的作用最明顯,抑瘤率達(dá)47.2%;50mg/kg劑量的佛手揮發(fā)油能顯著提高雌性荷瘤小鼠肝臟中的超氧化物歧化酶活性,提高機(jī)體的抗氧化能力,從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)。成文召等[30]探討了佛手葉揮發(fā)油對(duì)HeLa細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)的影響,結(jié)果表明佛手葉揮發(fā)油能夠抑制HeLa癌細(xì)胞的增殖,呈劑量和時(shí)間依賴(lài)性。低劑量(200μg/mL)佛手葉揮發(fā)油使HeLa細(xì)胞皺縮,染色質(zhì)凝集,出現(xiàn)凋亡小體,微管解聚,表現(xiàn)為典型的凋亡特征為中、高劑量(400μg/mL和800μg/mL)佛手葉揮發(fā)油使HeLa細(xì)胞膜裂解,內(nèi)容物外泄,細(xì)胞碎片增多,表明細(xì)胞已壞死。
抗氧化。韓林等[31]研究表明川佛手精油含有豐富的多酚和黃酮類(lèi)物質(zhì),具有一定的抗氧化活性,對(duì)DPPH和ABTS自由基清除能力較強(qiáng),EC50分別為3.92,1.88mg/mL。鄧祥等[22]以抗壞血酸(VC)為對(duì)照,測(cè)定川佛手多酚提取物的DPPH和OH的清除率,表明川佛手多酚具有較強(qiáng)的抗氧化活性。楊新周等[32]測(cè)定了佛手花對(duì)DPPH自由基和羥自由基的清除能力,各物質(zhì)清除DPPH自由基的能力為:對(duì)香豆酸<佛手花提取物<香草酸<蘆丁<咖啡酸<沒(méi)食子酸。清除羥自由基的能力為蘆?。伎Х人幔挤鹗只ㄌ崛∥铮忌侥畏樱奸纹に?,表明了佛手花提取物具有很好的抗氧化活性,是一種良好的天然抗氧化劑。楊繼等[33]測(cè)定果葉黃酮對(duì)O2·-、OH和DPPH的清除率。結(jié)果表明果、葉黃酮對(duì)DPPH的清除能力IC50分別為8.25、9.03(mg·L-1),稍弱于Vc和蘆?。粚?duì)O2·-清除能力IC50分別為17.74、20.77(mg·L-1),強(qiáng)于蘆丁但弱于Vc;對(duì)·OH清除能力IC50分別為17.06、15.86(mg·L-1),清除能力強(qiáng)于Vc,與蘆丁相差無(wú)幾。
免疫調(diào)節(jié)作用。徐曉虹等[34]研究顯示佛手醇提液能顯著提高小鼠免疫器官重量,延長(zhǎng)小鼠常溫下的耐疲勞能力和急性抗腦缺氧能力,結(jié)果表明佛手具有一定的增強(qiáng)體質(zhì)、促進(jìn)學(xué)習(xí)和增強(qiáng)免疫機(jī)能的作用。黃玲等[35]研究證實(shí)佛手多糖體外實(shí)驗(yàn)可提高免疫低下小鼠巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-6的水平,表明它對(duì)體液免疫與細(xì)胞免疫的促進(jìn)作用可能與增強(qiáng)巨噬細(xì)胞分泌IL-6有關(guān)。
抑菌、抗炎。郭衛(wèi)東等[36]研究表明佛手果實(shí)揮發(fā)油對(duì)酵母菌、大腸桿菌、枯草桿菌和金黃色葡萄球菌均有較明顯的抑制作用,其中對(duì)枯草桿菌的抑菌效果最強(qiáng),對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用相對(duì)較弱;佛手葉中揮發(fā)油只對(duì)酵母菌有一定的抑制作用,而佛手枝中揮發(fā)油沒(méi)有抑菌作用。王建英等[37]采用小鼠耳殼二甲苯致腫,大鼠角叉菜致炎等方法,結(jié)果表明佛手揮發(fā)油對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹、角叉菜致大鼠足腫脹有一定的抑制作用,金佛手揮發(fā)油有一定的抗炎鎮(zhèn)痛作用。
其他作用。高洪元等[38]研究表明佛手揮發(fā)油的抗抑郁作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)血清CORT水平和海馬組織BDNF表達(dá)水平有關(guān)。佛手揮發(fā)油的抗抑郁作用呈現(xiàn)明顯的劑量依賴(lài)關(guān)系。300mg·kg-1劑量佛手揮發(fā)油給藥即能產(chǎn)生明顯的抗抑郁作用,600mg·kg-1劑量佛手揮發(fā)油與經(jīng)典抗抑郁藥氟西汀10mg·kg-1效果相當(dāng),提示佛手揮發(fā)油有較強(qiáng)的抗抑郁作用。張穎等[39]研究不同劑量的佛手提取液能明顯增加小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間,降低小鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸、尿素氮濃度,并能提高小鼠肝臟中糖原的含量,所以佛手水提取液可顯著增強(qiáng)小鼠抗運(yùn)動(dòng)型疲勞的能力。王宜祥等[40]研究表明金佛手醇提液能明顯增強(qiáng)家兔離體回腸平滑肌的收縮,其作用能被阿托品拮抗;能明顯抑制家兔離體十二指腸平滑肌的收縮,對(duì)乙酰膽堿引起的家兔離體十二指腸痙攣有顯著的解痙作用;對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)有明顯推動(dòng)作用。常雯等[41]通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明佛手對(duì)ACE具有抑制作用,ACE有可能就是佛手降血壓的作用靶點(diǎn),同時(shí)實(shí)驗(yàn)也證明,40%甲醇佛手提取物對(duì)ACE的抑制作用明顯,活性部位的極性較強(qiáng)。
近年來(lái),佛手的研究取得了非常大的進(jìn)展,主要表現(xiàn)在佛手揮發(fā)油、總黃酮、多糖的提取分離研究,化學(xué)成分的測(cè)定研究,藥理作用研究等。佛手含有多種多樣的生物化學(xué)活性物質(zhì),具有抗腫瘤、增強(qiáng)免疫作用、抗氧化等作用。隨著對(duì)佛手研究的不斷深入,利用佛手開(kāi)發(fā)保健品或藥品市場(chǎng)前景將十分廣闊。
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