魏 強

（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所，北京 100021）

實驗動物的10個“不愿意”

魏 強

（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所，北京 100021）

（接上期）

10 它們對未做好動物實驗準(zhǔn)備的人可以說不

動物實驗的過程既是科學(xué)研究的過程，也是人和動物相互“碰撞”的過程。動物不理解人類拿它們在干什么，一定會對操作、傷害做出反抗、攻擊，可能會傷害到人。動物實驗可能帶來的危害主要有：一是動物咬傷、抓傷等直接危害；二是動物攜帶人獸共患病病原，在操作過程中通過空氣、分泌物、直接接觸等途徑感染人類；三是人類高致病性病原感染動物實驗，從動物或環(huán)境再感染人。

實驗動物、分泌物、排泄物、樣品、器官、尸體等控制、操作不當(dāng)會變成病原污染的擴大器，造成大范圍傳播，因此，了解實驗動物特性，就知道了動物實驗首先要做好思想準(zhǔn)備，并通過不斷實踐，掌握動物操作的基本技術(shù)和處置、護理技能，防備于未然。

動物實驗的基本操作技術(shù)包括很多方面，都應(yīng)該熟悉掌握，如：實驗動物的抓取和固定方法、標(biāo)記方法、被毛的去除方法、給藥途徑和方法、取血及采樣方法、手術(shù)方法以及處死方法等。只有熟練掌握了這些方法，做好充分的實驗準(zhǔn)備，才能順利完成動物實驗。

曾經(jīng)見過這樣的動物實驗：10只小鼠被灌胃后，馬上口鼻出血，翻滾掙扎很快死亡。原因是根本沒有掌握動物實驗技術(shù)，不練習(xí)、想當(dāng)然，結(jié)果藥物沒灌入胃內(nèi)，卻灌入了肺中。

我們怎樣做呢？面對實驗動物的“不愿意”，面對實驗動物、動物實驗我們做好準(zhǔn)備了么？在動手之前，你認真思考了以下問題嗎？

1.你有關(guān)護、善待動物的意識嗎？動物福利，大的方面講就是讓動物在康樂的狀態(tài)下生存，其標(biāo)準(zhǔn)包括動物無任何疾病、無行為異常、無心理緊張壓抑和痛苦等?；驹瓌t包括：讓動物享有不受饑渴的自由、生活舒適的自由、不受痛苦傷害的自由、生活無恐懼感和悲傷感的自由以及表達天性的自由。小的方面就是在實驗的每個環(huán)節(jié)，貫徹對動物盡可能的照料。有了這種意識，就會在實驗過程中同情、關(guān)護實驗動物，使動物實驗具有人文性、文明性和科學(xué)性，在相對舒適的、感謝的氛圍中完成科學(xué)實驗，同時形成良好的文化操行。

實驗人員要求熟練操作動物實驗。

國外和國內(nèi)的許多單位，都設(shè)有實驗動物感謝紀(jì)念碑。開學(xué)伊始，實驗之后，大家手捧鮮花，鞠躬再三，感謝實驗動物對人類的貢獻。

2.你真的了解實驗動物么？動物種類不同，生物學(xué)特性也不相同，對實驗的要求也不同。在做動物實驗之前，一定要弄清動物的特性。如嚙齒類動物，課本上一般介紹，嚙齒類動物是晝伏夜動的雜食動物，喜啃咬硬物，性情較溫順，雄鼠好斗，汗腺不發(fā)達，嗅覺靈敏，對噪音敏感，對于濕度要求嚴(yán)格，雄鼠具有分泌醋酸氨臭氣的特性，是引起飼養(yǎng)環(huán)境產(chǎn)生特異臭氣的重要原因。它們的垂體、腎上腺功能發(fā)達，應(yīng)激反應(yīng)敏感，行為表現(xiàn)多樣，情緒敏感。對于空氣中的灰塵、氨氣、硫化氫極為敏感，如飼育間不衛(wèi)生，可引起大鼠患肺炎或進行性肺組織壞死而死亡。噪音能使它們內(nèi)分泌系統(tǒng)紊亂，性功能減退，食仔或死亡，所以飼育的環(huán)境必須安靜。但在實際使用中，能充分理解么？

講幾個小故事，對這些動物特性的生物學(xué)意義，可能理解的更好。有人在做動物實驗時，覺得小鼠、大鼠很可愛，因此，他在食堂吃什么，就給小鼠、大鼠帶回來一些。并且隨時打開鼠盒，查看動物情況。這樣做，嚴(yán)重干擾了嚙齒類動物“喜啃咬硬物”和“晝伏夜動”等習(xí)性。

有人將10只成年KM小鼠放在一個鼠盒中，第一天發(fā)現(xiàn)它們打斗非常厲害，第二天面部、尾巴等部位出現(xiàn)外傷，等第三天找來新鼠盒，準(zhǔn)備分開飼養(yǎng)時發(fā)現(xiàn)，動物不再打斗了，安定下來了。問為什么，答曰經(jīng)過打斗，動物各自地位明確了，不再爭斗了。其實不然，小鼠因是晝伏夜動動物，打斗在夜間更兇殘，甚至將其他動物的睪丸咬掉，這樣打斗才會停止。如果不注意觀察，不了解動物習(xí)性，如果做雄鼠相關(guān)實驗，那么一定要注意，這些動物還是雄性的嗎？

還有這樣的事情發(fā)生，一個動物室在做雌性小鼠性周期相關(guān)實驗，其他人帶入雄性小鼠。如果了解動物習(xí)性，就會知道雄鼠會分泌醋酸氨，這也是鼠類特有的臭味。醋酸氨對人來講非常難聞，但對雌性小鼠，是最強的誘導(dǎo)氣味，就像雄鹿分泌的麝香，具有環(huán)境激素的作用，會嚴(yán)重干擾雌性相關(guān)實驗。

3.你具備動物實驗的能力嗎？動物實驗不同于體外實驗，任何對動物帶來的不良操作，都會影響實驗結(jié)果。動物實驗的結(jié)果應(yīng)該是客觀、公正、準(zhǔn)確的，要求實驗人員必須了解正確的操作和結(jié)果判斷。北京地區(qū)在這方面做得非常好，要求所有從事實驗動物和動物實驗的人員，包括臨時實驗人員，必須經(jīng)過一定時間的培訓(xùn)，考試合格，并取得上崗證后，才能進行動物實驗。動物實驗的能力，包括動物飼養(yǎng)能力、對動物認知能力、操作能力、信息采集能力、分析能力和關(guān)護能力。具備了這些能力，才能完成良好的動物實驗。

以下是一些能力不足的表現(xiàn)：

看過一篇博士生論文，講的是用中藥湯劑，治療裸鼠移植性腫瘤。具體方法為，每次3ml灌胃，每天3次，10天后腫瘤體積減少，得出結(jié)論為治療有效。其實，結(jié)果不對。成年小鼠一般體重40g，胃容量0.8～1.5 mL，怎么灌進去3ml？即使灌進去了，一天的量為9 mL，如果換算成40 Kg人的話，每天得喝9 L湯藥，大致20瓶礦泉水，誰受得了？人還能正常飲食么？還能保證營養(yǎng)么？小鼠肯定痛苦不堪、迅速消瘦。腫瘤細胞較正常組織對營養(yǎng)的依賴更大，變小是肯定的，但不是湯藥的作用，是“饑餓療法”的結(jié)果。腫瘤重量的變化測定應(yīng)該考慮動物體重變化，測定臟器系數(shù)比較客觀。

有人做流感的動物實驗，臨床表現(xiàn)是這樣描述的：動物第一天開始發(fā)燒、流涕、乏力、頭疼、惡心、嘔吐、無食欲、關(guān)節(jié)疼......。你怎么知道動物乏力、頭疼、惡心、無食欲、關(guān)節(jié)疼這些主觀體驗?zāi)兀縿游飳嶒灥男畔⒉杉?，一定要客觀描述，如使用動物活動減少、攝食量減少、精神萎靡、被毛臟亂等術(shù)語。有些人類出現(xiàn)的主觀體驗，如乏力、惡心等對動物來講是不得而知的，動物實驗是為人類服務(wù)，不能反過來把人類的臨床主訴，強加于動物。

動物采血是最常見的操作，如果不了解準(zhǔn)確的部位，加之血管非常細小，如小鼠的尾靜脈，不通過反復(fù)練習(xí)，臨時或匆忙上陣，會造成動物反復(fù)損傷。在一項猴動物實驗中，要求每次采血10ml，一周3次，連續(xù)3月。這點血對人來說不算什么，對4Kg的猴是不可以的。4Kg的猴血量大致350ml，算一算就知道為什么不行了。其他動物也是這樣，采血過多過頻，是最易忽視的。

動物活體檢測、外科手術(shù)、活體采樣、解剖取材等技能更是要求人員能夠熟練掌握。必須經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)，才能實際應(yīng)用。

動物實驗根據(jù)病原危害程度可采取不同的實驗環(huán)境，但必須通過風(fēng)險評估確認。山羊非病原性實驗可在清潔的“場地”進行；嚙齒類動物實驗要求控制在良好的設(shè)施內(nèi)。實驗室擺放食物和飲料、在實驗環(huán)境中飲水、吃食、抽煙、化妝等一般不被許可。（中圖由徐平提供）

4.你具備生物安全防護能力嗎？提起實驗室生物安全，大家會想到發(fā)生過的許多“著名”事件和事故，包括實驗室人員感染結(jié)核、出血熱、猴 B病毒，甚至SARS等。其實，實驗室生物安全事件造成的實驗人員得病、死亡只是極端例子。而無時無刻發(fā)生在實驗室涉及的化學(xué)品、藥品、試劑、輻射、熱、電、水、病原微生物、實驗材料以及實驗動物等造成的潛在或一般性事件，很容易被忽略。

大家知道，實驗室操作主要分為體內(nèi)和體外實驗，也就是說動物操作和試管操作。動物實驗相關(guān)實驗室既涵蓋了一般實驗室的生物安全要求，同時也使得實驗室生物安全變得更加復(fù)雜和多變，人員要求更加嚴(yán)格，生物安全事件也相對較多。

我們時常感到不適、乏力、精神差，有時發(fā)燒、局部瘙癢、疼痛，血清檢測發(fā)現(xiàn)許多病原抗體陽性，等等諸多情況發(fā)生時，可能意味者受到了實驗室不安全因素干擾，使我們健康受到了傷害。特別是病原微生物的感染，不僅威脅到個人，可能還會造成不同程度的擴散，導(dǎo)致環(huán)境、外部人員感染，甚至成為疾病傳染源。

實驗室生物安全是每個實驗室人員應(yīng)該高度重視的問題，實驗的每個環(huán)節(jié)都會有潛在風(fēng)險。大家往往想，這些事件總是發(fā)生在別人身上，不會在我身上發(fā)生。其實不然，大家是在一個環(huán)境中工作，從事類似的操作，面臨相似的問題，加之我國教育體系中缺乏良好的實驗室生物安全教育、培訓(xùn)課程。大家并沒有嚴(yán)格、專業(yè)的實驗室風(fēng)險識別和風(fēng)險控制的意識和技能，實驗室環(huán)境也沒能形成安全、清潔的文化氛圍，只要查一查，每天都會有許許多多程度不同的生物安全隱患和風(fēng)險。

動物存在哪些危害，怎樣防護？對某種化學(xué)品的危害你了解多少？濺到身上怎么處置？生物安全柜怎樣正確使用？等等問題，都需要我們認真思考，至少先要有良好的安全意識，然后形成實驗室安全操作規(guī)范，通常國際上稱為SOP，大家在進行動物實驗之前，應(yīng)該了解清楚，才能及時應(yīng)用。

在做動物實驗操作時不戴手套、不戴口罩、不戴面具、野蠻操作、忽視防護等是非常不負責(zé)任的行為。

5.你知道動物實驗要經(jīng)過審查批準(zhǔn)么？一般實驗人員不太關(guān)注動物福利、倫理，或不夠?qū)I(yè)。因此，國際上提倡成立動物實驗福利、倫理委員會，負責(zé)審查動物實驗，對每個環(huán)節(jié)把關(guān)。

動物實驗福利、倫理審查的基本原則是兼顧動物福利和人員利益，在綜合評估動物所受的傷害和使用動物的必要性基礎(chǔ)上進行科學(xué)審查。涉及動物保護、動物福利、倫理、科學(xué)需要等各方面內(nèi)容。遵循動物保護原則，禁止無意義濫養(yǎng)、濫用、濫殺實驗動物，制止沒有科學(xué)意義和社會價值或不必要的動物實驗。

動物福利原則強調(diào)保證實驗動物的權(quán)利。倫理原則，既要考慮動物的利益，善待動物，又要保證實驗動物項目的科學(xué)性，還要保證實驗人員的安全，同時，要求動物實驗方法和目的應(yīng)該符合人類的道德倫理標(biāo)準(zhǔn)和國際慣例。

動物實驗方案審查的內(nèi)容應(yīng)該包括：實驗人員是否符合操作要求；設(shè)施設(shè)備是否符合動物要求；飼料、墊料、飲水是否符合動物要求；動物運輸是否符合要求；實驗方案是否符合動物福利要求；動物處置是否符合倫理規(guī)范；動物處死是否符合安樂死原則；動物尸體處理是否符合環(huán)保要求等等方面。

動物實驗福利倫理審查中應(yīng)注意的問題非常多，主要有以下一些：

人員培訓(xùn)情況：動物實驗人員必須經(jīng)過操作培訓(xùn)，包括：動物基本知識、動物操作、麻醉方法、手術(shù)方法、給藥方法、取材方法、解剖方法等各種操作，最好持有專業(yè)培訓(xùn)證書。

獸醫(yī)監(jiān)護：動物實驗中必須配備獸醫(yī)人員。獸醫(yī)的基本職責(zé)之一就是代表動物利益，維護動物權(quán)利。認為對動物傷害過大時，可建議、勸告、終止實驗。

是否正確選擇動物：應(yīng)該選用合適品系和級別的動物用于實驗，提倡在得到足夠結(jié)果時最大限度地減少動物數(shù)量的使用。盡量使用遺傳背景一致性好的動物和微生物控制級別高的動物，可以做到以質(zhì)量代替數(shù)量。

動物實驗的必要性：提倡替代性生命系統(tǒng)、非生命系統(tǒng)、電腦模擬的應(yīng)用。離體培養(yǎng)的器官、組織、細胞、微生物在許多研究中得到廣泛應(yīng)用，能夠利用替代性材料時不使用活體動物。如能進行電子模擬、體外方法進行替代實驗的，就不易進行動物實驗。提倡使用低等動物，代替高價的實驗動物。

動物實驗方案的合理性：嚴(yán)謹合理的方案應(yīng)使動物操作合理正確，減少外傷，減少疼痛。使用合適的統(tǒng)計學(xué)方法，鼓勵用少量動物獲得較多結(jié)果。

動物運輸：運輸過程中要避免碰撞和驚嚇動物，飼料飲水充足。運輸籠盒空間要保證動物活動自如。長途運輸要保證良好的通風(fēng)。運輸最易使動物產(chǎn)生疲憊、不安，甚至死亡，盡量提供良好、舒適的運輸方法。

動物飼養(yǎng)：要正確飼養(yǎng)動物，飼養(yǎng)空間要足夠大，保證飲水質(zhì)量，食物要干凈，室內(nèi)、外環(huán)境要保持衛(wèi)生清潔，最好增添色彩。盡量讓動物感到自己是快樂的。

實驗過程：應(yīng)盡量在麻醉狀態(tài)下進行動物實驗。實驗開始前，準(zhǔn)備工作要充分，各種可能發(fā)生的意外事故和解決方案均要考慮周全。實驗中，要密切關(guān)注動物表現(xiàn)和反應(yīng)，動物麻醉蘇醒后要有人看護，避免出現(xiàn)誤食、磕碰、病情惡化等情況。

控制疼痛：應(yīng)判斷實驗造成動物疼痛的等級。應(yīng)考慮使用一切手段以減少動物在實驗過程中所產(chǎn)生的疼痛，合理使用必要的麻醉劑、鎮(zhèn)痛劑或鎮(zhèn)靜劑。使可能的疼痛降低到最低限度，是我們關(guān)護動物最應(yīng)該做的事情。

減少對動物侵擾：盡量不過多干擾動物，減少對動物的刺激，避免應(yīng)激反應(yīng)。正確而熟練地抓取動物、固定動物，使動物不會劇烈反抗。鼓勵人性化動物保定技術(shù)，必要時對動物進行訓(xùn)練調(diào)教，使其在“我愿意”的情緒下配合實驗，使實驗結(jié)果更加可靠。

具體舒適措施：提倡提供必要的玩具，特別是犬、猴。有條件時可以給動物增加音樂和色彩環(huán)境，對于中大型實驗動物實驗會產(chǎn)生較好效果。盡量保證恒溫恒濕、通風(fēng)換氣、噪音、光照度等的合理，同時，設(shè)置必要的活動場地，創(chuàng)造相對愉悅環(huán)境，對身心。

動物的處死：對實驗結(jié)束后的動物要施行安樂死，注意不能在其它動物可視范圍內(nèi)進行動物解剖、處死等操作。試想一下，動物受到死亡威脅或直接面對死亡會怎樣想，我們永遠不應(yīng)該和動物結(jié)下“死結(jié)”。

實驗人員要時刻尊重并善待實驗動物，營造輕松、愜意的人文環(huán)境（由徐平提供）。

結(jié)束語

有人會問，實驗動物就是被用來做實驗的，如果說不愿意，從根本上講，它們最不愿意被用于實驗。也有科學(xué)家質(zhì)疑動物實驗的結(jié)果，認為目前的實驗結(jié)果大部分不能得出正確結(jié)論，應(yīng)該叫停動物實驗，特別是高等級動物實驗。一般動物保護理念也認為應(yīng)謹慎進行動物實驗，更有甚者，極端反對動物實驗，并付諸各種各樣的行動。

我們?nèi)绾慰创@些問題呢？可能我們目前能做到的就是，充分認識到動物的“不愿意”，要有關(guān)護動物的愛心和意識，盡力提供動物舒適的實驗環(huán)境，熟練掌握實驗技術(shù)，從每個環(huán)節(jié)上將可能的痛苦減到最低，積極探討替代方法，減少或不用動物做意義不大的實驗……。

總而言之，實驗動物“不愿意”的程度，掌握在每個實驗人員的手中。