摘 要：目的：建立反相離子對高效液相色譜法，測定頭孢呋辛鈉中乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）的含量。方法：色譜柱為Venusil XBP C18 （4.6mm×250mm，5.0μm）；流動相pH6.5四丁基氫氧化銨溶液，乙腈（80：20）；檢測波長為254 nm；柱溫為30℃。結(jié)果 EDTA二鈉的質(zhì)量濃度在0.66ug/ml-4.95ug/ml （r=0.9992 0，n=6）范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好；平均回收率為100.5%（n=9）。結(jié)論：該方法快速、靈敏，結(jié)果準確可靠，可用于頭孢呋辛鈉中EDTA的檢測。

關(guān)鍵詞：頭孢呋辛；HPLC；EDTA

頭孢呋辛鈉是第二代頭孢抗生素，對多種革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌有效，臨床多用于敏感菌所致的呼吸道，耳鼻喉，尿道，軟組織，骨骼關(guān)節(jié)，產(chǎn)科等感染[1]。華北制藥集團河北華民藥業(yè)有限責(zé)任公司在生產(chǎn)頭孢呋辛鈉的過程中使用EDTA作為絡(luò)合劑，EDTA對人體有害，根據(jù)WHO規(guī)定，EDTA二鈉的每日允許攝入量為0-2.5mg/kg。測定不同介質(zhì)中EDTA的方法有比色法[2]、滴定法和高效液相色譜法[3]、離子色譜法[4]等。滴定法和比色法會受到頭孢呋辛鈉的干擾，測定結(jié)果不能令人滿意。高效液相色譜法是通過檢測EDTA的金屬絡(luò)合物EDTA - Cu對EDTA進行測定，本文通過對EDTA- Cu進行測定，來檢測EDTA在頭孢呋辛鈉中的殘留量。

1 儀器與試劑

1.1 儀器。安捷倫1260液相色譜儀，梅特勒托利多XS105電子天平。

1.2 試劑。頭孢呋辛鈉，華北制藥河北華民藥業(yè)有限責(zé)任公司提供，批號C2091306001；EDTA，優(yōu)級純，含量99.9% ；四丁基氫氧化銨，離子對試劑；乙腈，色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件。色譜柱Venusil XBP C18 （4.6mm×250mm，5.0μm）；柱溫30℃；檢測器波長254nm，流速1.5ml/min。在此情況下，樣品中EDTA獲得了良好的分離。結(jié)果見圖1。

2.2 對照品溶液制備。精密稱取EDTA二鈉約33mg，置100ml量瓶中，加水使溶解并定量稀釋成0.33mg/mlEDTA對照品儲備液。

2.3 樣品溶液制備。精密稱取頭孢呋辛鈉供試品約1.0g，置100ml量瓶中，加水適量使溶解，加1%硫酸銅溶液5ml，加水稀釋至刻度，過濾，即得。

2.4 線性關(guān)系。精密量取貯備液0.2ml、0.5ml、0.8ml、1ml、1.2ml、1.5ml至100ml容量瓶中，加1%硫酸銅溶液5mL用純化水稀釋至刻度，得濃度為0.66μg/ml、1.65μg/ml、2.64μg/ml、3.3μg/ml、3.96μg/ml、4.95μg/ml溶液，依次進樣20μl，按照上述色譜條件測定。以EDTA濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，回歸方程為y=8.3559x-0.2102，R2=0.9992。當信噪比（S/N）為3：1時，EDTA的濃度為0.1674μg/ml。

2.5 中間精密度。按照色譜條件，采用不同人不同時間進行樣品測定，測得EDTA檢測結(jié)果分別為3.35、3.32、3.32、3.33、3.34、3.32，RSD為0.4%。

2.6 回收率實驗。準確稱取0.5g樣品，分別加入不同濃度的對照品，按照上述色譜條件進行檢測的回收率結(jié)果見表1。

3 討論

3.1 本實驗建立了HPLC檢測頭孢呋辛鈉中EDTA的含量，以外標法進行計算，該方法具有檢測限低，準確度及精密度高，樣品檢測時間短的優(yōu)勢。

3.2 由于本法進樣量較大，容易使色譜柱過載，在樣品檢測完后，應(yīng)及時沖洗色譜柱。

參考文獻：

[1]陳新謙，金有豫，湯光主編.新編藥物學(xué)（第15版）[M]北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：59-60.

[2]劉海玲，謝瑞容. 動力學(xué)光度法測定微量乙二胺四乙酸[J].分析化學(xué)2000，28（8）.

[3]施炎炎，丁紅梅，汪晶晶，張霞.淺析食品中乙二胺四乙酸二鈉檢測[J].福建分析測試，2013，22（3）.

[4]朱巖，陳治強，俞建國，王素芬.離子色譜法測定洗滌劑中乙二胺四乙酸、磷酸鹽[J].化學(xué)世界，1998（9）.

作者簡介：陳秀紅，女，1982年7月出生，籍貫，內(nèi)蒙古，漢族，畢業(yè)于成都理工大學(xué)，在華北制藥集團河北華民藥業(yè)有限責(zé)任公司工作，從事藥品檢測方面的研究。