牛瑞菊

(贊皇縣醫(yī)院,河北 贊皇 051230)

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中藥方劑對(duì)尋常型銀屑病患者外周血Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的影響

牛瑞菊

(贊皇縣醫(yī)院,河北 贊皇 051230)

目的 探討自擬中藥方對(duì)尋常型銀屑病患者外周血Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的影響。方法 分析我科2013年4月—2015年4月收治的20例銀屑病患者，采用自擬中藥方治療，檢測(cè)治療前后Th17細(xì)胞相關(guān)因子IL-17、IL-17F、IL-21、IL-22的表達(dá)水平。結(jié)果 治療后PBMC中IL-17、IL-17F、IL-21、IL-22的mRN表達(dá)水平明顯低于治療前，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 Th17細(xì)胞及相關(guān)因子與銀屑病密切相關(guān)，采用自擬中藥方治療銀屑病，可能通過(guò)抑制Th17細(xì)胞活化及下調(diào)IL-17、IL-17F、IL-21、IL-22 mRNA水平，而達(dá)到有效治療的目的，臨床檢測(cè)IL-17、IL-17F、IL-21、IL-22 mRNA水平，或可作為銀屑病進(jìn)展和預(yù)后的免疫學(xué)指標(biāo)。

尋常型銀屑?。蛔詳M中藥方；外周血；Th17細(xì)胞

銀屑病是一種以皮膚淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和角質(zhì)形成細(xì)胞增殖為特征的慢性、反復(fù)復(fù)發(fā)性、炎癥性、自身免疫性皮膚病,是由多種致病因子刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)引起T淋巴細(xì)胞免疫異常、角化不全等[1]。近年研究表明Th17細(xì)胞參與著銀屑病的發(fā)病,為具有獨(dú)立的分化和發(fā)育調(diào)節(jié)機(jī)制的輔助性T淋巴細(xì)胞,其產(chǎn)生的IL-17、IL-17F、IL-21和IL-22為銀屑病重要的促炎性細(xì)胞因子，于角質(zhì)形成細(xì)胞增殖及炎癥形成過(guò)程中發(fā)揮重要作用[2-3]。臨床治療常采用阿維A、窄譜中波紫外線、中藥等治療，筆者采用自擬中藥方，以清熱解毒、涼血活血法治療血熱型銀屑病，檢測(cè)銀屑病患者外周血細(xì)胞因子IL-17、IL-17F、IL-21及IL-22水平，探討其與銀屑病發(fā)病的相關(guān)性。

1 臨床資料

1.1 一般資料 分析我科2013年4月—2015年4月收治的20例銀屑病患者，其中男13例，女7例；年齡19～62歲；病程2周～3年；皮損面積5%～25%；PASI評(píng)分2.7～25.8分；所有患者均符合《皮膚性病學(xué)》中相關(guān)尋常性銀屑病診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，表現(xiàn)為以斑丘疹、丘疹為主的新皮損不斷出現(xiàn)，刮去鱗屑有點(diǎn)狀出血面，并慢性反復(fù)復(fù)發(fā)等。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)[4-5]納入標(biāo)準(zhǔn)：符合銀屑病診斷標(biāo)準(zhǔn)，近3個(gè)月內(nèi)未用過(guò)糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑及阿維A等藥物，未進(jìn)行過(guò)光療等，患者及家屬同意并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除紅皮病型、關(guān)節(jié)炎型、膿皰型銀屑病，排除患有嚴(yán)重心腦血管疾病、免疫性疾病、肝腎功能障礙疾病，排除妊娠期及哺乳期婦女。

1.3 方法 給予自擬中藥方(生槐花30 g，赤芍10 g，蟬蛻9 g，牡丹皮10 g，生地黃30 g，白鮮皮10 g，土茯苓30 g，防風(fēng)15 g，金銀花15 g，牛蒡子15 g)，1劑/d，早晚各1次，6周為1個(gè)療程。采集治療前后清晨空腹肘靜脈血5 mL，以2 000 r/min離心30 min，分離出單一核細(xì)胞(PBMC)，提取RNA，并進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)，分析Th17細(xì)胞相關(guān)因子IL-17、IL-17F、IL-21、IL-22的表達(dá)水平。

2 結(jié)果

觀察組治療前后Th17細(xì)胞相關(guān)因子mRNA表達(dá)水平 治療后PBMC中IL-17、IL-17F、IL-21、IL-22的mRNA表達(dá)水平明顯低于治療前，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

組 別IL?17IL?17FIL?21IL?22治療前1 875±1 3151 309±0 8521 405±1 2100 987±0 895治療后1 105±0 8820 947±0 7250 651±0 2050 432±0 213

3 討論

銀屑病是一種常見的、慢性易復(fù)發(fā)性的炎癥性皮膚病，發(fā)病機(jī)制尚不清楚，目前多認(rèn)為是T細(xì)胞介導(dǎo)的以Th1型細(xì)胞免疫應(yīng)答、致炎因子、中性粒細(xì)胞共同參與的慢性炎癥性皮膚病[6]。隨著Th17細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子的研究，諸多學(xué)者認(rèn)為,Th17細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子參與著銀屑病的發(fā)病發(fā)展過(guò)程，IL-17、IL-17F、IL-21和IL-22是Th17分泌的主要效應(yīng)細(xì)胞因子，越來(lái)越多學(xué)者認(rèn)為在介導(dǎo)銀屑病、炎癥性疾病及自身免疫性疾病中發(fā)揮重要作用[7]。

IL-17是Th17細(xì)胞標(biāo)志性細(xì)胞因子，參與中性粒細(xì)胞的增生、趨化與成熟，參與皮損部位毛細(xì)血管的增生與擴(kuò)張，并誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞移行至皮損部位，促使血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子生成[3,8]。IL-17作為炎癥遞質(zhì)，可以促進(jìn)多種細(xì)胞產(chǎn)生IL-6、IL-8等促炎因子，促進(jìn)炎癥反應(yīng)，而IL-6又可促進(jìn)IL-17分泌，進(jìn)而加重皮損部位慢性炎癥反應(yīng)，臨床治療上通過(guò)阻斷IL-17受體，抑制皮損部位進(jìn)一步發(fā)展。有研究發(fā)現(xiàn)，銀屑病皮損部位IL-17AmRNA含量明顯高于正常皮膚，且與嚴(yán)重程度呈正比，經(jīng)治療后，皮損部位IL-17AmRNA的表達(dá)明顯降低[9,10]。IL-17F和IL-17為同一家族，具有高度同源性，具有與IL-17相似的生物學(xué)活性，在銀屑病中的表達(dá)水平明顯升高[11]。Fujishima等給小鼠皮膚注射IL-17F，炎癥因子IL-6的mRNA水平明顯升高，銀屑病患者真皮中檢出大量IL-17F陽(yáng)性的CD4+T細(xì)胞，認(rèn)為IL-17F誘導(dǎo)IL-6產(chǎn)生，是引起炎性浸潤(rùn)與角質(zhì)形成細(xì)胞增生的主要原因[12]。 IL-21參與Th17細(xì)胞的活化與增生，在銀屑病中IL-21通過(guò)促進(jìn)Th17細(xì)胞的分化與成熟，分泌IL-17參與銀屑病皮損的炎癥反應(yīng)，與角質(zhì)形成細(xì)胞受體作用促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞增生，在銀屑病移植模型中，阻斷IL-21的功能，可以減弱角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖及消除炎癥，發(fā)現(xiàn)患者皮損處IL-21mRNA水平高于非皮損處及健康人[7，13]。IL-22由Th17和Th22細(xì)胞產(chǎn)生，IL-22與角質(zhì)形成細(xì)胞上的受體結(jié)合，激活STAT3途徑，促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞增生與遷移，誘發(fā)角化不全，下調(diào)表皮分化相關(guān)基因的表達(dá)，同時(shí)參與誘導(dǎo)IL-8釋放，引起或加重炎癥反應(yīng)，在IL-17與IL-22的相互協(xié)調(diào)下，增強(qiáng)皮膚炎癥反應(yīng)，造成損傷，從而促進(jìn)皮損部位Munro微膿瘍的形成[3，14]。

中醫(yī)認(rèn)為，銀屑病多因素體虧虛，血熱內(nèi)蘊(yùn)，化燥生風(fēng)而成，發(fā)病以血熱為關(guān)鍵，熱傷營(yíng)陰、陰血不足、肌膚失養(yǎng)；又血熱生風(fēng)，風(fēng)性主動(dòng)，引動(dòng)內(nèi)伏之熱毒導(dǎo)致熱毒瘀痹肌膚誘發(fā)本病。治以清熱解毒、涼血活血為原則[15-19]。本研究表明，采用清熱解毒、涼血活血中藥治療后，銀屑病患者外周血IL-17、IL-17F、IL-21、IL-22 mRNA水平明顯減低，與治療前比較差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。說(shuō)明中藥可能直接或間接下調(diào)Th17細(xì)胞相關(guān)效應(yīng)因子的表達(dá)，達(dá)到治療銀屑病的目的，由于樣本偏小，故有待今后臨床進(jìn)一步研究。

綜上所述，Th17細(xì)胞及相關(guān)因子與銀屑病密切相關(guān)，采用自擬中藥方治療銀屑病，可能通過(guò)抑制Th17細(xì)胞活化及下調(diào)IL-17、IL-17F、IL-21、IL-22 mRNA水平，而達(dá)到有效治療的目的，臨床檢測(cè)IL-17、IL-17F、IL-21、IL-22 mRNA水平，或可作為銀屑病進(jìn)展和預(yù)后的免疫學(xué)指標(biāo)。

[1]劉旭星.阿維A聯(lián)合窄譜中波紫外線治療65例中重度尋常型銀屑病療效觀察[J]．中國(guó)藥物與臨床,2012,12(6):786-787.

[2]MURDACA G,COLOMBO B M,PUPPO F.The role of Th17 lymphocytes in the autoimmune and chronic inflammatory diseases[J].Internal and Emergency Medicine,2011,6(6):487-495.

[3]唐娟,張曉艷,宋佩華,等.Th17細(xì)胞相關(guān)因子與尋常性進(jìn)行期銀屑病的相關(guān)性研究[J].實(shí)用皮膚病學(xué)雜志,2014,7(3):190-192.

[4]KIMBALL A B,GURIN A,TSANEVA M,et al.Economic burden of comorbidities in patients with psoriasis is substantial[J].Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology :JEADV,2011,25(2):157-163.

[5]LOVE T J,QURESHI A A,KARLSON E W,et al.Prevalence of the metabolic syndrome in psoriasis:results from the National Health and Nutrition Examination Survey,2003-2006[J].Archives of Dermatology,2011,147(4):419-424.

[6]張學(xué)軍.皮膚性病學(xué)[M].6版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2005:129.

[7]趙辨.臨床皮膚病學(xué)[M].3版.南京:江蘇科學(xué)技術(shù)出版社,2001:763-764.

[8]GARBER K.Psoriasis:from bed to bench and back[J].Nature Biotechnology,2011,29(7):563-566.

[9]鐘道清,林玲,羅權(quán).尋常型銀屑病患者外周血中Th17細(xì)胞的表達(dá)及臨床意義[J].皮膚性病診療學(xué)雜志,2012,19(3):154-156.

[10]GULLETTA E,BOTTONI U,FOTI D P.Psoriasis,a new challenge for laboratory medicine[J].Clinical Chemistry and Laboratory Medicine,2013,51(7):1363-1368.

[11]田海剛,胡帥,尤立平,等.涼血解毒湯對(duì)尋常型銀屑病血熱證患者外周血Th17細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的影響[J].中日友好醫(yī)院學(xué)報(bào),2014,28(4):212-215.

[12]ONISHI R M,GAFFEN S L.Interleukin-17 and its target genes:mechanisms of interleukin-17 function in disease[J].Immunology,2010,129(3):311-321.

[13]鄭道城,常樹霞,黃莉?qū)?等.尋常型銀屑病外周血中Th17細(xì)胞及相關(guān)因子的表達(dá)[J].皮膚性病診療學(xué)雜志,2011,18(5):295-299.

[14]ZHANG Li,YANG Xueqin,CHENG Juan,et al.Increased Th17 cells are accompanied by FoxP3(+) Treg cell accumulation and correlated with psoriasis disease severity[J].Clinical Immunology,2010,135(1):108-117.

[15]KUESTNER R E,TAFT D W,HARAN A,et al.Identification of the IL-17 receptor related molecule IL-17RC as the receptor for IL-17F[J].Journal of Immunology,2007,179(8):5462-5473.

[16]FUJISHIMA SAWA,WATANABE H,KAWAGUCHI MIO,et al.Involvement of IL-17F via the induction of IL-6 in psoriasis[J].Archiv Fur Dermatologische Forschung,2010,302(7):499-505.

[17]CARUSO R,BOTTI E,SARRA M,et al.Involvement of interleukin-21 in the epidermal hyperplasia of psoriasis[J].Nature Medicine,2009,15(9):1013-1015.

[18]FUJITA H.The role of IL-22 and Th22 cells in human skin diseases[J].Journal of Dermatological Science,2013,72(1):3-8.

[19]范斌,李峰,李欣,等.血熱證銀屑病患者Th17細(xì)胞與相關(guān)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子的表達(dá)[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2012,23(10):2612-2614.

Chinese medicine formulae on Th17 related cytokines in peripheral blood in patients with psoriasis vulgaris

NIU Ruiju

(Zanhuang Hospital of Hebei Province,Zanhuang 051230，Hebei Province，China)

Objective To explore the relation of self-made traditional Chinese medicine with Th17 related cytokines in the peripheral blood in patients with psoriasis vulgaris.Methods A total of 20 patients with psoriasis vulgaris who were admitted in our department from April,2013 to April,2015 were included in the study.The self-made traditional Chinese medicine was used for treatment.The expression levels of Th17 related cytokines,i.e.IL-17,IL-17F,IL-21,IL-22,before and after treatment were detected.Results The mRNA expression levels of IL-17,IL-17F,IL-21,and IL-22 in PBMC after treatment were significantly lower than those before treatment (P<0.05).Conclusion Th17 related cytokines are correlated with psoriasis vulgaris.Self-made traditional Chinese medicine can treat psoriasis vulgaris probably by inhibiting the activation of Th17 cells and down regulating mRNA levels of IL-17,IL-17F,IL-21,and IL-22,so that the goal of effective treatment can be achieved.Clinical detection of mRNA levels of IL-17,IL-17F,IL-21,and IL-22 can be served as the immunological indicators for the progression and prognosis of psoriasis vulgaris.

psoriasis vulgaris；self-made traditional Chinese medicine；peripheral blood；Th17 cells

10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.12.019

河北省科技成果計(jì)劃外科研(2015)。

牛瑞菊(1973-)，女，大學(xué)本科，主治醫(yī)師，主要從事皮膚疾病研究。

R758.63

A

1003-5699(2015)12-1247-03

王 丹

2015-07-12)