陳應(yīng)林，段建友，梅竹蓮

(浙江九旭藥業(yè)有限公司 質(zhì)量部，浙江 金華 321016)

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原子吸收-石墨爐法測(cè)定鹽酸丁卡因注射液中重金屬元素Pb,Cd,Sb的方法學(xué)研究

陳應(yīng)林Δ，段建友，梅竹蓮

(浙江九旭藥業(yè)有限公司 質(zhì)量部，浙江 金華 321016)

目的 建立原子吸收-石墨爐法外標(biāo)法測(cè)定鹽酸丁卡因注射液中鉛(Pb)、鎘(Cd)、銻(Sb)3 種重金屬元素的方法。方法 采用微波消解對(duì)樣品進(jìn)行前處理，石墨爐法對(duì)3種重金屬元素進(jìn)行測(cè)定和方法驗(yàn)證。結(jié)果 Pb,Cd,Sb含量的線性范圍0～80.0 ng/mL、0～2.0 ng/mL、0～40.0 ng/mL，所對(duì)應(yīng)元素加標(biāo)回收率為：92.7%～105.7%、95.8%～103.4%、92.1%～103.5%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD均小于6.0%(n=9)。結(jié)論 該方法不但精確度和檢出率高，且重復(fù)性好，能用于鹽酸丁卡因注射液中鉛、鎘、銻的控制。

原子吸收-石墨爐法；鹽酸丁卡因注射液；重金屬

鹽酸丁卡因注射液主要成份為鹽酸丁卡因，其化學(xué)名稱為：4-(丁氨基)-苯甲酸-2-(二甲氨基)乙酯鹽酸鹽，分子式C15H24N2O2·HCl，分子量：300.83。用于硬膜外阻滯、蛛網(wǎng)膜下腔阻滯、神經(jīng)傳導(dǎo)阻滯、粘膜表面麻醉，神經(jīng)傳導(dǎo)阻滯：常用濃度0.1%～0.2%，一次常用量為40～50 mg，極量為100 mg，為不同用法用量中最大量。根據(jù)《化學(xué)藥品注射劑與藥用玻璃包裝容器相容性研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》，檢測(cè)直接接觸藥用包裝材料中的有害元素向藥品中釋放量。本實(shí)驗(yàn)利用Agilent Spectr AA 240 DUO原子吸收光譜儀，對(duì)鹽酸丁卡因注射液中鉛、鎘、銻3種元素進(jìn)行檢測(cè)，前處理采用微波消解法，因微波消解具有消化樣品能力強(qiáng)、速度快、消耗化學(xué)試劑少、金屬元素不易揮發(fā)損失、污染小及空白值低，一次樣品處理后就可同時(shí)測(cè)定幾種元素等優(yōu)勢(shì)。國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)未有對(duì)鹽酸丁卡因注射液中重金屬測(cè)定的研究，故本文能為鹽酸丁卡因注射液重金屬的檢測(cè)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥品與試劑：鹽酸丁卡因注射液(批號(hào)：20140801、20140802、20140803；規(guī)格 5mL:50 mg，浙江九旭藥業(yè)有限公司)；鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1000 μg/mL)、鎘單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1000 μg/mL)、銻單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(100 μg/mL)(中國(guó)科學(xué)計(jì)量院)；超純水；硝酸(優(yōu)級(jí)純)。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器：Agilent Spectr AA 240 DUO原子吸收光譜儀[安捷倫科技(中國(guó))有限公司]；Multiwave PRO全自動(dòng)微波消解儀(奧地利安東帕有限公司)、55mL聚四氟乙烯消解內(nèi)襯罐、BHW-09A 趕酸電熱板(上海博通化學(xué)科技有限公司)；Milli-Q Integral 10純水、超純水機(jī)(美國(guó)密理博公司，電導(dǎo)率大于等于18.2 MΩ/cm)；W58D無(wú)油空氣壓縮機(jī)(上海復(fù)宏機(jī)電有限公司)；Agilent G1879B循環(huán)水機(jī)[安捷倫科技(中國(guó))有限公司]。

1.2 方法

1.2.1 樣品制備：精密移取本品10 mL，置于聚四氟乙烯消解內(nèi)襯罐中，濃縮至1～2 mL，加入4 mL硝酸，密封，放入微波消解裝置中，設(shè)定微波消解程序進(jìn)行消解處理，微波消解儀的消解程序?yàn)?00 W，5 min；400 W，5 min；800 W，5 min；800 W,20 min；0 W。待消解結(jié)束后，待冷卻至室溫，打開消解罐，于電熱板上(120 ℃～160 ℃)趕酸至1 mL，用超純水洗滌消化罐3次，洗液合并于100 mL 容量瓶中冷卻，用超純水稀釋至刻度，搖勻，待測(cè)定。

1.2.2 方法學(xué)建立

① 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別以3種單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為母液，以0.2%的硝酸溶液作為稀釋劑和空白，鉛曲線系列為0.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0 ng/mL；鎘曲線系列為0.0、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00 ng/mL；銻曲線系列為0.0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0 ng/mL。每個(gè)濃度標(biāo)樣重復(fù)測(cè)定3次，取平均值。

② 測(cè)定條件：鉛的參考條件為波長(zhǎng)283.3 nm，狹縫0.5 nm，燈電流10 mA，進(jìn)樣量為10 μL。背景校正為塞曼效應(yīng)，氬氣流速為0.3 L/min左右，石墨爐干燥溫度為120 ℃，灰化溫度為400 ℃，原子化溫度為2100 ℃，凈化溫度為2300 ℃。

鎘的參考條件為波長(zhǎng)228.8 nm。狹縫0.5 nm，燈電流4.0 mA，進(jìn)樣量為10 μL。背景校正為塞曼效應(yīng)，氬氣流速為0.3 L/min左右，石墨爐干燥溫度為120 ℃，灰化溫度為300 ℃，原子化溫度為1800 ℃，凈化溫度為2100 ℃。

銻的參考條件為波長(zhǎng)217.6 nm。狹縫0.5 nm，燈電流10 mA，進(jìn)樣量為10 μL。背景校正為塞曼效應(yīng)，氬氣流速為0.3 L/min左右，石墨爐干燥溫度為120℃，灰化溫度為700℃，原子化溫度為1800℃，凈化溫度為2100℃。鉛、鎘和銻的升溫程序見表1。

表1 測(cè)定鉛、鎘和銻的石墨爐升溫程序Tab.1 Determination of lead,cadmium and stibium graphite furnace temperature program

③ 樣品測(cè)定：樣品消解液搖勻后按次序倒入自動(dòng)進(jìn)樣器的樣品杯中。設(shè)置自動(dòng)稀釋，然后進(jìn)行樣品測(cè)定并與曲線進(jìn)行比較，同時(shí)做空白對(duì)照。

④ 檢測(cè)限與定量限：取3種金屬單元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液的3個(gè)不同濃度(0 mg/L、0.5 mg/L、5 mg/L)各進(jìn)行3次重復(fù)測(cè)定，取3次平均值后，按線性回歸方程計(jì)算工作曲線的斜率，同時(shí)測(cè)定11次空白溶液的吸光度，計(jì)算11次空白溶液吸光度的標(biāo)準(zhǔn)偏差，計(jì)算各種元素的檢測(cè)限與定量限。

⑤ 方法回收率及精密度：向10 mL供試品中分別加入適量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，充分溶解后，制得鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為2、20、50 ng/mL；同理，向10 mL供溶液中分加入適量的鎘元素；使其標(biāo)準(zhǔn)溶液的最終濃度為0.5、5、20 ng/mL；同理，銻標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度分別為20、200、900 ng/mL，每種濃度各制備3份，考察樣品的加標(biāo)回收率。同時(shí)，通過對(duì)平行樣重復(fù)測(cè)定考察方法精密度。

⑥ 樣品測(cè)定結(jié)果和精密度：取3批鹽酸丁卡因注射液為試樣，每批進(jìn)行3次重復(fù)測(cè)定，測(cè)定其中鉛、鎘、銻含量，并計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)限與定量限 鉛檢測(cè)限為0.12 pg，定量限為0.40 pg；鎘檢測(cè)限為0.04 pg，定量限為0.12 pg；銻檢測(cè)限為0.40 pg，定量限為1.20 pg，鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程為y=0.0061x+0.0228，R2=0.9947，線性范圍0.0～80.0 ng/mL、鎘標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程為y=0.1356x+0.00149，R2=0.9968，線性范圍0.0～2.0 ng/mL、銻標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程為y=0.0036x+0.0093，R2=0.9960，線性范圍0.0～40.0 ng/mL，各元素線性關(guān)系良好，表明該標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)待測(cè)元素可以準(zhǔn)確定量。見圖1。

圖1 3種金屬元素標(biāo)準(zhǔn)曲線圖Fig.1 The standard curve of three metal elements

2.2 方法回收率及精密度 限量元素Pb：0.0～80 ng/mL、Cd：0.0 ～2.0 ng/mL、Sb：0.0～40 ng/mL，所對(duì)應(yīng)元素加標(biāo)回收率為：Pb：92.7%～105.7%、Cd：95.8%～103.4%、Sb：92.1%～103.5%，同時(shí)，由各元素的RSD 值可以看出，精密度高，該方法能夠滿足鹽酸丁卡因注射液中重金屬痕量檢測(cè)需求?；芈式Y(jié)果見表2、3、4。

表2 鉛回收率Tab.2 Recovery rate of lead

表3 鎘回收率Tab.3 Recovery rate of cadmium

表4 銻回收率Tab.4 Recovery rate of stibium

2.3 樣品測(cè)定結(jié)果和精密度 鉛、鎘、銻含量及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，見表5、6、7。

表5 樣品中鉛含量測(cè)定值Tab.5 Measurement results of lead from sample

表6 樣品鎘含量測(cè)定值Tab.6 Measurement results of cadmium from sample

表7 樣品銻含量測(cè)定值Tab.7 Measurement results of stibium from sample

3 討論

本研究通過對(duì)鹽酸丁卡因注射液中3 種重金屬Pb、Cd、Sb 的微波消解的前處理方法及原子吸收-石墨爐法測(cè)定條件，該方法檢出限低，鉛檢測(cè)限為0.12 pg，定量限為0.40 pg；鎘檢測(cè)限為0.04 pg，定量限為0.12 pg；銻檢測(cè)限為0.40 pg，定量限為1.20 pg、精密度高、重復(fù)性好，RSD均小于6.0%，且實(shí)際樣品元素測(cè)定結(jié)果不存在顯著性差異，該研究方法可以滿足鹽酸丁卡因注射液中重金屬痕量檢測(cè)需求。因國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)中無(wú)相關(guān)研究，無(wú)法進(jìn)行研究對(duì)比。

從實(shí)際操作來看該方法具有樣品前處理過程簡(jiǎn)單。自動(dòng)化程度高，操作方便，便于掌握等優(yōu)點(diǎn)。推薦在用不同型號(hào)儀器在檢驗(yàn)之前，首先優(yōu)化儀器條件，尤其灰化原子化溫度。

在實(shí)驗(yàn)中所使用的器皿如容量瓶、移液管、消解罐等都要經(jīng)過酸浸泡過夜才能使用，并且避免使用玻璃容器，否則影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。通過該實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了本方法對(duì)鹽酸丁卡因注射液中鉛、鎘、銻含量測(cè)定的可行性。

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(編校：王冬梅)

Determination of heavy metals Pb,Cd,Sb in tetracaine hydrochloride injection by atomic absorption spectrometry- graphite furnace

CHEN Ying-linΔ, DUAN Jian-you, MEI Zhu-lian

(Department of Quality, Zhejiang Jiuxu Pharmaceutical Co., Ltd, Jinhua 321016, China)

ObjectiveTo establish an external calibration method of atomic absorption spectrometry-graphite furnace for determination of heavy metals Pb,Cd,Sb in tetracaine hydrochloride injection.MethodsMicrowave digestion for the pretreatment method was used,three kinds of heavy metal elements were determined by graphite atomic absorption spectrometry-graphite furnace Results The linear ranges of Pb,Cd,Sb were 0-80.0 ng/mL,0-2.0 ng/mL,0-40.0 ng/mL,therecovies were 92.7%-105.7%,95.8%-103.4%,92.1%-103.5%,respetively.The relative standard deviationless than 6.0%(n=9).ConclusionThe method is simple and accurate,which can be used for the control of Pb,Cd,Sb in tetracaine hydrochloride injection.

atomic absorption spectrometry-graphite furnace; tetracaine hydrochloride injection; heavy metal

陳應(yīng)林，通信作者，男，本科，主管藥師，研究方向：藥品質(zhì)量檢驗(yàn)和質(zhì)量管理，E-mail:chenylxs123@163.com。

R917

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1005-1678(2015)12-0171-04