不同程度肝纖維化患者IGF－2及IGFBP－2與MMPs家族相關性分析＊

西安交通大學檢驗科（西安710061） 周凱華 石興民

肝硬化是最常見的肝臟疾病之一，該疾病的發(fā)生是在乙肝病毒等各種致病因素導致肝內結締組織異常增生，假小葉形成，最終出現(xiàn)肝臟正常結構被破壞及肝功能不斷受損，嚴重者可出現(xiàn)肝細胞壞死并有惡變可能［1］。血清胰島素樣生長因子－2（IGF－2）、胰島素樣生長因子結合蛋白－2（IGFBP－2）是主要由肝臟分泌，并激活轉化生長因子（TGF）等因子，使靜止的肝星狀細胞激活［2］，并轉化為肌成纖維樣細胞?；|金屬蛋白酶－2（MMP－2）及其抑制劑TIMP－2是近年來發(fā)現(xiàn)的有效反應細胞外基質（ECM）重構及新生血管形成的重要指標［3］，是導致肝硬化進展的重要因素，但目前對兩者之間的關系尚未明確。我們自2012年12月至2014年12月對就診于我院的肝硬化患者進行了IGF－2、IGFBP－2及MMPs家族檢測，初步明確該類因子在肝硬化進展中的關系。

資料與方法

1 一般資料 選擇自2012年12月至2014年12月期間我院就診的慢性乙型肝炎214例，其中男性122例，女性92例，年齡42～65歲，平均年齡為53.5±11.6歲，入選患者的均符合《病毒性肝炎防治方案》相關診斷標準，并將患者分為慢性乙型肝炎輕度組（A組）、中度組（B組）、重度組（C組）及肝硬化組（D組），分別有65、61、49、39例。

2 檢測指標

2.1 IGF－2、IGFBP－2測定：所有研究對象均于入選后次日晨抽取靜脈血3ml，室溫靜止30min后離心，取血清留存待檢。檢驗由我院檢驗科完成，采用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）法檢測IGF－2、IGFBP－2。

2.2 血清 MMP2、TIMP－2檢測：采用ELISA法檢測MMP－2及TIMP－2，檢測檢測由我院檢驗科完成，操作嚴格按照說明進行，并保證在試劑有效期內使用且保證質控符合國家標準。

3 統(tǒng)計學方法 應用SPSS15.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料均采用ˉx±s表示，組間比較采用方差分析后進行LSD檢驗，以P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。

結 果

1 各組IGF－2、IGFBP－2結果比較 對各組IGF－2、IGFBP－2水平進行分析，B 組患者IGF－2、IGFBP－2較A組出現(xiàn)顯著升高（P＜0.05），C組患者IGF－2、IGFBP－2較A組、B組均出現(xiàn)顯著升高（P＜0.05），D組患者IGF－2、IGFBP－2較 A 組、B組、C 組均出現(xiàn)顯著升高（P＜0.05）。見附表。

附表 各組IGF－2、IGFBP－2結果比較（ˉx±s）

2 各組血清MMP2、TIMP－2水平比較 對各組MMP－2、TIMP－2水平進行分析，B組患者 MMP－2及TIMP－2較 A組均未見顯著差異（P＞0.05），MMP－2／TIMP－2較 A 組顯著升高 （P＜0.05），C 組患者MMP－2及TIMP－2較A組均出現(xiàn)顯著差異（P＜0.05），MMP－2／TIMP－2較 A 組、B組患者均出現(xiàn)顯著升高（P＜0.05），D 組患者 MMP－2、TIMP－2、MMP－2／TIMP－2較A組、B組、C組均出現(xiàn)顯著差異（P＜0.05）。

3 血清IGF－2、IGFBP－2與 MMP－2、TIMP－2相關性分析 分析IGF－2、IGFBP－2與 MMP－2、TIMP－2相關性，IGF－2與 TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈顯著相關 （P＜0.05），與 MMP－2未見顯著相關性 （P＞0.05）；IGFBP－2與 TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈顯著相關 （P＜0.05），與 MMP－2未見顯著相關性 （P＞0.05）。

討 論

隨著慢性乙型肝炎等患者的持續(xù)增多，乙肝相關性肝硬化目前已成為消化科常見的肝臟疾病之一，在HBV等各種損傷因子反復刺激下，肝細胞出現(xiàn)變性壞死，肝星狀細胞激活導致大量細胞外基質產(chǎn)生［4］，并轉化為肌成纖維樣細胞。IGF－2是重要的多功能調節(jié)因子之一，具有促進DNA復制以及蛋白質合成，加速細胞有絲分裂等作用［5］。分泌的IGF－2與IGFBP－2結合，并控制IGF－2生成后轉運至病變組織的釋放過程，是參與病情進展的重要因素。

細胞外基質（Extracellular matrix，ECM）是肝臟細胞外的一個重要組成部分。MMPs是一類被具有重要的細胞調節(jié)的鋅依賴性酶，可對細胞微環(huán)境的多種效應，被認為在各種炎癥、神經(jīng)變性和惡性疾病發(fā)展過程中起著顯著作用。在慢性乙肝相關性肝纖維化的形成過程中，肝細胞壞死后加速炎細胞的募集［6］，Kupffer細胞等激活后刺激轉化生長因子產(chǎn)生，并通過旁分泌途徑刺激肝星狀細胞活化增生，并向肌成纖維細胞樣細胞轉化?；|金屬蛋白酶－2（MMP－2）是參與細胞外基質降解的主要蛋白酶，主要針對Ⅳ型膠原TIMP－2是MMPs的特異性抑制因子，其水平降低可加重細胞外基質降解，其水平下降可以增強 MMP－2等的活性。血清IGFBP－2水平是反映前列腺癌惡性程度及侵襲性的重要指標，表明IGFBP－2等是ECM重構及刺激新生血管形成的重要因素。血清胰島素樣生長因子－2（IGF－2）、胰島素樣生長因子結合蛋白－2（IGFBP－2）是主要由肝臟分泌，并激活轉化生長因子（TGF）等因子，使靜止的肝星狀細胞激活，并轉化為肌成纖 維 樣 細 胞。 分 析 IGF－2、IGFBP－2 與 MMP－2、TIMP－2相關性，IGF－2與 TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈顯著相關，IGFBP－2與TIMP－2、MMP－2／TIMP－2呈顯著相關，因而MMPs家族所致細胞外基質平衡紊亂所導致肝纖維化進展過程與IGF－2及IGFBP－2存在密切關系，該過程可能以IGF－2／IGFBP－2水平失調導致肌成纖維細胞激活，加劇細胞外基質重構，成為肝纖維化病情進展的重要機制。

綜上所述，隨著肝纖維化的進展，IGF－2及IGFBP－2水平與細胞外基質重構密切相關，是反映肝纖維化進展的重要因子，對兩類因子進行監(jiān)測對于探索該系列指標在肝纖維化病情診斷、治療過程中病情變化具有重要臨床意義。

［1］ Anguela X M，Tafuro S，Roca C，etal.Nonviral－mediated hepatic expression of IGF－I increases Treg levels and suppresses autoimmune diabetes in mice［J］.Diabetes，2013，62（2）：551－560.

［2］ Smith T，Sloboda DM，Saffery R，et al.Maternal nutritional history modulates the hepatic IGF－IGFBP axis in adult male rat offspring［J］.Endocrine，2014，46（1）：70－82.

［3］ Slifierz MJ，F(xiàn)riendship R，De－Lange C F，et al.Immunomodulatory factors and infectious agents associated with the hepatic gene expression of the IGF system in nursery pigs［J］.Animal，2014，8（5）：844－851.

［4］ 譚文彬，周廣起，王 霄，等.IRE－BP 1蛋白與肝癌細胞耐藥性發(fā)生機制的研究［J］.國外醫(yī)學（醫(yī)學地理分冊），2013，34（1）：54－56.

［5］ Levi J，Huynh FK，Denroche HC，et al.Hepatic leptin signalling and subdiaphragmatic vagal efferents are not required for leptin－induced increases of plasma IGF binding protein－2 （IGFBP－2）in ob／ob mice［J］.Diabetologia，2012，55（3）：752－762.

［6］ Rehem R N，El－Shikh W M.Serum IGF－1，IGF－2and IGFBP－3as parameters in the assessment of liver dysfunction in patients with hepatic cirrhosis and in the diagnosis of hepatocellular carcinoma［J］.Hepatogastroenterology，2011，58（107）：949－954.