朱彬等
摘 要 本研究以鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)為研究目標(biāo),以4氨基鄰苯二甲酸二甲酯為半抗原,通過重氮化法偶聯(lián)載體蛋白并免疫動(dòng)物,制備針對(duì)DMP的特異性兔多克隆抗體。通過棋盤滴定法和單因素實(shí)驗(yàn)確定最佳的實(shí)驗(yàn)參數(shù),即包被原濃度為50 μg/L,一抗?jié)舛葹?2.5 μg/L,二抗?jié)舛葹? μg/mL,藥物稀釋液為pH 6.0的純水,競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)時(shí)間為40 min,基于此建立了間接競(jìng)爭(zhēng)化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫分析法檢測(cè)DMP。本方法對(duì)DMP的檢出限為0.29 μg/L,線性檢測(cè)范圍為0.74~30.32 μg/L,與13種結(jié)構(gòu)和功能類似物的交叉反應(yīng)率均<5%,通過倍比稀釋降低白酒、醬油樣品基質(zhì)干擾,對(duì)樣品的平均回收率在80.2%~116.0%之間,平均相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<3.6%,結(jié)果與GCMS法的測(cè)定結(jié)果相符。本方法適用于食品樣品中DMP的快速檢測(cè)。endprint