段玉敏

（黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院·哈爾濱 150036）

吳秉純研究員是我國(guó)著名的藥學(xué)專家，全國(guó)老中醫(yī)藥專家學(xué)術(shù)經(jīng)驗(yàn)師承導(dǎo)師，擅長(zhǎng)運(yùn)用扶正固本法，針對(duì)不同虛證，通過(guò)辨證論治，分別選擇補(bǔ)氣、補(bǔ)血、補(bǔ)陰和補(bǔ)陽(yáng)藥及復(fù)方制劑進(jìn)行方藥研究，如刺五加、人參等即能提高機(jī)體非特異性免疫功能，也能增強(qiáng)對(duì)機(jī)體的特異性免疫功能，是良好的生物免疫調(diào)節(jié)劑。復(fù)方滿山紅、復(fù)方齊墩果酸等扶正祛邪，調(diào)節(jié)整體功能等中醫(yī)特色的復(fù)方制劑、臨床收到較好療效[1]。導(dǎo)師多年來(lái)致力于中藥新藥的研究與開發(fā)，立足本省天然藥物資源優(yōu)勢(shì)，以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，結(jié)合臨床、面向生產(chǎn)，在繼承和發(fā)揚(yáng)中醫(yī)藥優(yōu)勢(shì)和特色基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)和方法，研究中藥和開發(fā)防治常見病、多發(fā)病的中藥新藥。加芪微丸正是基于導(dǎo)師的學(xué)術(shù)思想建立在大量中藥新藥研發(fā)寶貴經(jīng)驗(yàn)基礎(chǔ)上的結(jié)晶 。本方由刺五加、黃芪、黃芩三味中藥組成。其中刺五加為我省道地藥材、資源十分豐富，民間應(yīng)用刺五加根及根莖泡酒，用作強(qiáng)壯健身之劑。黃芪為東北地道藥材，具有補(bǔ)氣升陽(yáng)，益衛(wèi)固表，利水消腫，托毒生肌功效，被稱為補(bǔ)氣藥之長(zhǎng)。二藥均為吳秉純導(dǎo)師多年來(lái)倡導(dǎo)中醫(yī)治則下的扶正固本補(bǔ)氣藥的代表，并圍繞兩味中藥做了大量的實(shí)驗(yàn)研究。黃芩的現(xiàn)代藥理研究證明，具有抗菌、抗病毒、抗炎、提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分率和吞噬指數(shù)，并使血清溶菌酶含量及紅細(xì)胞補(bǔ)體升高的免疫調(diào)節(jié)功能、有輔助抗腫瘤作用[2]。三藥配伍采用刺五加、黃芪扶正與黃芩祛邪相結(jié)合，三藥在方中有攻有補(bǔ)，攻補(bǔ)兼施，共同發(fā)揮調(diào)節(jié)荷瘤機(jī)體免疫機(jī)能而實(shí)現(xiàn)抑制腫瘤生長(zhǎng)，提高荷瘤機(jī)體的生存質(zhì)量，延長(zhǎng)生存期。

1 材料與方法

1.1 藥物

加芪癓丸由黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院中藥所制備；環(huán)磷酰胺片，由天津金世制藥有限公司提供。批準(zhǔn)文號(hào)國(guó)藥準(zhǔn)字H12021006。

1.2 動(dòng)物

清潔級(jí)昆明種小鼠由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物合格證號(hào)：Scxk(吉)2007-0003。

1.3 瘤株

肉瘤S180 由吉林腫瘤研究所提供。

1.4 主要儀器與試劑

超凈工作臺(tái)（蘇州凈化有限公司）；酶標(biāo)儀（ TECAN ）；顯微鏡(日本OLYMPUS)；電熱恒溫水浴鍋（天津泰斯特儀器有限公司）；離心機(jī)（金壇市醫(yī)療儀器廠制造）；2,4-二硝基氯苯（2,4-DNCB）；

1.5 方法

1.5.1 對(duì)肉瘤S180 荷瘤小鼠體內(nèi)抑瘤作用 實(shí)驗(yàn)用荷瘤小鼠均按常規(guī)方法接種腫瘤細(xì)胞。從傳代7 天的小鼠腹中取出生長(zhǎng)良好的乳白色腹水，以1：3 無(wú)菌生理鹽水稀釋至細(xì)胞數(shù)為1.8×107 個(gè)/mL，以0.1mL/只接種于小鼠腋下。接種次日，隨機(jī)分為5 組，均為ig 給藥，每天1 次，連續(xù)10d。停藥次日，稱體重，剝?nèi)∑は聦?shí)體瘤瘤塊，稱重，計(jì)算出瘤重及抑瘤率。

1.5.2 對(duì)2,4-DNCB 所致S180 荷瘤小鼠遲發(fā)型皮膚超敏反應(yīng)的影響 接種、分組、給藥劑量方法同上。各組于首次給藥后于BaS2 脫毛處皮膚上滴50%DNCB 丙酮溶液20ul/只致敏。第10日在每鼠脫毛處滴2.5%DNCB 丙酮溶液0.1mL/只進(jìn)行激發(fā)。24 小時(shí)后每鼠尾靜脈注射1%伊文思藍(lán)0.1mL/10g。30min 后，處死小鼠，剪下藍(lán)染皮膚，剪碎，置試管中，用1：1 丙酮生理鹽水混合液4mL 浸泡24 小時(shí)，離心取上清液，酶標(biāo)儀于波長(zhǎng)610nm 處測(cè)定吸光度。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)肉瘤S180 荷瘤小鼠體內(nèi)抑瘤作用 見表1

表1 加芪微丸對(duì)S180 小鼠體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果(±S，n=20)

表1實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，除加芪微丸低劑量組外各實(shí)驗(yàn)組均能明顯抑制腫瘤體積的生長(zhǎng)，其中試藥組隨著劑量的增高、給藥時(shí)間的延長(zhǎng)抑瘤作用明顯增強(qiáng)，但均低于環(huán)磷酰胺組。試藥高、中劑量組瘤重同模型組比較具有極顯著性差異P＜0.05；試藥組體重明顯高于模型組和環(huán)磷酰胺片組，其中試藥高、中劑量組體重與模型組和環(huán)磷酰胺片組比較具有顯著性差異P ＜0.05。

2.2 對(duì)2,4-DNCB 所致S180 荷瘤小鼠遲發(fā)型皮膚超敏反應(yīng)的影響 見表2

表2 加芪微丸對(duì)二硝基氯苯（DNCB）所致S180 荷瘤鼠遲發(fā)型皮膚超敏反應(yīng)影響 (±S，n=10)

表2實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，加芪微丸各劑量組吸光度高于模型組和環(huán)磷酰胺組，證實(shí)該藥能刺激荷瘤機(jī)體T 淋巴細(xì)胞增殖，產(chǎn)生大量致敏淋巴細(xì)胞從而提高遲發(fā)超敏反應(yīng)強(qiáng)度，提高機(jī)體細(xì)胞免疫功能。與模型組、環(huán)磷酰胺對(duì)照組比較具有顯著性差異P ＜0.05。

3 討論

通過(guò)參加全國(guó)名老中醫(yī)藥經(jīng)驗(yàn)繼承，師從吳秉純研究員言傳身教3年，總結(jié)導(dǎo)師主要學(xué)術(shù)思想，源流及實(shí)踐應(yīng)用，繼承導(dǎo)師在中藥新藥研制方面的精髓，開發(fā)了加芪微丸。吳老認(rèn)為，腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素是“內(nèi)虛”，因此腫瘤的中醫(yī)治則就是扶正祛邪、平衡陰陽(yáng)、調(diào)節(jié)臟腑氣血功能是病情穩(wěn)定的前提。當(dāng)今，惡性腫瘤危害人類健康已經(jīng)成為全球較大的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一，并不斷衍生為新世紀(jì)人類健康的第一殺手[3]。而對(duì)于腫瘤采用多學(xué)科綜合治療，尤其對(duì)于術(shù)后、放化療后的腫瘤患者，呈現(xiàn)不同程度的免疫抑制狀態(tài)，腫瘤治療獲益的關(guān)鍵性指標(biāo)是努力提高腫瘤患者生存質(zhì)量、延長(zhǎng)其生存期、穩(wěn)定腫瘤病杜、改善相關(guān)癥狀，而中藥通過(guò)免疫途徑或作為抗腫瘤藥物的增效劑而發(fā)揮間接抗腫瘤作用成為國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)腫瘤研究領(lǐng)域的一大熱點(diǎn)[4]。通過(guò)加芪微丸對(duì)遲發(fā)超敏反應(yīng)的影響可證實(shí)，該藥能改善荷瘤機(jī)體T 淋巴細(xì)胞增殖，提高機(jī)體免疫力而實(shí)現(xiàn)間接抗腫瘤的目的。

[1] 李春濤.吳秉純研究院主要學(xué)術(shù)思想經(jīng)驗(yàn)[J].黑龍江中醫(yī)藥,2011,43(6)：6-7.

[2] 徐玉田.黃芩的化學(xué)成分及現(xiàn)代藥理作用研究進(jìn)展[J].光明中醫(yī),2010,25(3)：544-545

[3] 吳 菲,林國(guó)楨,張晉昕,等.我國(guó)惡性腫瘤發(fā)病現(xiàn)狀及趨勢(shì)[J].中國(guó)腫瘤,2012,21(2)：81-85.

[4] 張靜,等.中藥抗腫瘤的免疫學(xué)調(diào)節(jié)作用和作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志,2006,22(6)：386-387