從×線影像學(xué)觀測(cè)布依藥鹿角壯骨煎液對(duì)大鼠骨折模型的作用

王羿 何先游

摘要：目的從X線影像學(xué)的改變來(lái)觀察布依藥“鹿角壯骨煎液”對(duì)大鼠骨折模型修復(fù)的作用。方法 手術(shù)造成SD大鼠脛骨中下段骨折模型60只，隨機(jī)分成治療組30和對(duì)照組30，治療組以布依藥鹿角壯骨煎液灌胃，對(duì)照組給予等量0.9%生理鹽水灌胃。在造模后的第15、21、30、42d分別取兩組大鼠行骨折處X線攝片并評(píng)分。結(jié)果 治療組與對(duì)照組相比較，在造模第15天及以后治療組X線影像學(xué)與對(duì)照組有明顯差異（P<0.05）。結(jié)論布依藥鹿角壯骨煎液可促進(jìn)骨痂生長(zhǎng)，提高影像學(xué)評(píng)分，對(duì)骨折愈合有修復(fù)作用。

關(guān)鍵詞：骨折；布依藥；大鼠骨折模型；影像學(xué)

中圖分類號(hào)：R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1007 - 2349（ 2015） 02 - 0059 - 02骨折是機(jī)械性超負(fù)荷，致使骨結(jié)構(gòu)遭到破壞，骨失去支撐及杠桿作用的一種表現(xiàn)。很多骨折都源于高能量外傷，導(dǎo)致骨小連及延緩愈合發(fā)生率較高，是臨床需要解決的問(wèn)題。祖國(guó)醫(yī)學(xué)和民族醫(yī)藥在骨折治療上有悠久的歷史，能夠使骨骼延緩愈合和不愈合重新獲得較迅速的愈合[1]。本課題組在臨床觀察中發(fā)現(xiàn)“鹿角壯骨煎液”在骨折的治療中療效確切，本文從動(dòng)態(tài)觀察骨折愈合過(guò)程中骨折端的影像學(xué)變化來(lái)驗(yàn)證“鹿角牝骨煎液”對(duì)骨折大鼠模型的修復(fù)作用，從而為臨床治療提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)支撐。1 材料和方法1.1 動(dòng)物 本課題實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是清潔級(jí)健康Sprague Dawley（ SD）雄性大鼠60只，6月齡，體重280～320g，重慶滕鑫比爾實(shí)驗(yàn)動(dòng)物銷售有限公司提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（渝）2012- 0004、1.2藥物及制備本實(shí)驗(yàn)布依藥鹿角壯骨煎液由黔南州中醫(yī)院藥劑科提供。將告獨(dú)六、蘿卜難、印乃岜、龍自然、戈難鞏、專雄等（各100g）放入鋁鍋中，加入6000ml，蒸餾水，常溫下浸泡24h后加熱沸騰，紗布過(guò)濾后得到3000ml.含生藥量為lg/mL的濃縮液，裝瓶冷藏備用.1.3主要試劑與儀器1.3.1 主要試劑，蘇木素伊紅染色試劑盒（HE試劑盒），產(chǎn)品編號(hào)：AR1180，在博士德生物工程有限公州購(gòu)買(mǎi)1.3.2主要儀器，C型臂電視X光機(jī)（德國(guó)西門(mén)子公司），Im-agePro Plus5.0圖像分析軟件（美國(guó)Media Cyberneties公ngk ），數(shù)碼照像機(jī)（E-500型，日本Olymupus公司）。1.4方法1.4.1模型建立[2]適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后進(jìn)行造模，方法如下：以10%水合氯醛按0.3mL/100g腹腔麻醉大鼠，麻醉顯效后將大鼠以仰臥位固定于操作臺(tái)上，左下肢剝毛、消毒，無(wú)菌操作下取內(nèi)側(cè)縱行切口約1.5cm，逐層切開(kāi)皮膚及皮下，顯露脛骨，在脛骨中下1/3交界處，用手術(shù)刀片切開(kāi)3 mm寬的骨膜，顯露骨膜下骨質(zhì)，以骨刀造成橫斷骨折，左膝關(guān)節(jié)髕韌帶處剝毛、消毒，無(wú)菌操作下取前側(cè)縱行切口約1.5 cm，分開(kāi)髕韌帶于止點(diǎn)處進(jìn)針，順行穿直徑為1.1mm克氏針，通過(guò)斷端并至脛骨遠(yuǎn)端有阻力后回抽，折彎、剪斷埋于軟骨面下，然后逐層縫合。術(shù)后進(jìn)行3d抗感染治療，肌肉注射青霉素8萬(wàn)U/100 g，1次/d。1.4.2動(dòng)物分組及給藥方法造模成功后的大鼠隨機(jī)分為治療組30，對(duì)照組30分籠喂養(yǎng)，在室溫22～ 270C、相對(duì)濕度80%的清潔環(huán)境中飼養(yǎng)，使用標(biāo)準(zhǔn)飼料，自由攝食和攝水。治療組給予布依藥鹿角壯骨煎液按劑量5g/（kg·d）灌胃，根據(jù)大鼠對(duì)人等效劑量的2倍[3]，每日早晚2次。對(duì)照組給予等量0. 9%生理鹽水灌胃，方法同治療組。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均在造模后12h給藥。1.4.3影像學(xué)觀察2組大鼠均在術(shù)后第7、15、21、30、42d隨機(jī)選取大鼠行腹腔麻醉后進(jìn)行X線攝片，觀察骨痂生長(zhǎng)及骨折愈合情況并進(jìn)行評(píng)分。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[4]：1分，骨折斷端邊緣趨向性模糊，骨膜輕度反應(yīng)，無(wú)骨痂可見(jiàn)；2分，斷端邊緣模糊，骨膜反應(yīng)淺淡，骨痂少量，密度較淡，邊緣不整齊；3分，斷端邊緣仍可見(jiàn)，但接近消失，骨膜反應(yīng)較深，骨痂量增多，但未填滿缺損，密度增深，邊緣較清；4分，斷端邊緣完全消失，骨膜反應(yīng)密度近似骨影，骨痂填滿缺損，與骨皮質(zhì)密度相同并相互連接。2結(jié)果2.1 布依藥鹿角壯骨煎液對(duì)大鼠骨折后X線影像學(xué)的作用 在造模的第15、21、30、42 d分別隨機(jī)取2組大鼠予以X線攝片觀察？在第15d時(shí)，治療組骨折斷端周同大量軟組織增高影；而對(duì)照組骨折線較清晰；第21天時(shí)，治療組骨折斷端骨密度有所增加，骨膜反應(yīng)漸深，生成較多骨痂，斷端邊緣仍可見(jiàn)，對(duì)照組僅有少量骨痂生長(zhǎng)。第30天時(shí)，治療組大量骨痂已包繞骨折斷端，骨折線模糊，對(duì)照組出現(xiàn)較多骨痂。第42天時(shí)，治療組骨折線基本消失，骨小梁力學(xué)結(jié)構(gòu)漸為合理，對(duì)照組骨折處大量骨痂生長(zhǎng)，骨折線可見(jiàn).2.2布依藥鹿角壯骨煎液對(duì)大鼠骨折后X線影像評(píng)分影響 根據(jù)造模后第15、21、30、42d大鼠骨折處X線影像，對(duì)其骨折愈合及骨痂生成情況進(jìn)行評(píng)分（表1）。表l示，在第15d、21d、30d、42d差異均顯著（P<0.05），且這種差異逐步加大，但在3周后差異更加明顯，治療組較對(duì)照組提高影像學(xué)評(píng)分更為顯著。3討論

貴州省是布依族、苗族群居地，民族醫(yī)藥是特色，老百姓對(duì)于民族醫(yī)藥信任程度高，得到廣大群眾的歡迎。布依藥“鹿角壯骨煎液”是貴州省黔南州中醫(yī)院名老中醫(yī)經(jīng)數(shù)十年悉心研究和改進(jìn)布依族民間藥方（院內(nèi)制劑），采用告獨(dú)六（鹿角霜）、蘿卜難（續(xù)斷）、印乃岜（骨碎補(bǔ)）、龍自然（自然銅）、戈難鞏（黨參）、專雄（川芎）等10多種布依藥為原料加工而成，補(bǔ)益肝腎、強(qiáng)筋壯骨的功效確切。我們?cè)诖罅颗R床治療中并結(jié)合“經(jīng)皮微創(chuàng)內(nèi)同定系統(tǒng)（LISS鋼板）配合布依藥鹿角壯骨膠囊治療脛骨中下段骨折的臨床療效”課題進(jìn)行研究，運(yùn)用手術(shù)內(nèi)固定治療骨折的同時(shí)，配合口服布依藥“鹿角壯骨煎液”治療，可縮短骨折愈合時(shí)間，促進(jìn)骨折愈合。

通過(guò)本課題觀察，在第15、21、30、42 d2組大鼠X線影像評(píng)分結(jié)果差異顯著（P<0.05），且這種差異逐步加大。根據(jù)結(jié)果分析，布依藥鹿角壯骨煎液促進(jìn)骨折愈合，可能是通過(guò)促進(jìn)成骨細(xì)胞的增值與分化而促進(jìn)成骨，使軟骨骨痂向骨性骨痂轉(zhuǎn)換，提高了骨的強(qiáng)度，從而加速了骨折愈合[5]臨床和實(shí)驗(yàn)都已證明中醫(yī)藥（民族醫(yī)藥）在治療骨折方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)和潛力，中醫(yī)藥（民族醫(yī)藥）已經(jīng)成為廣泛采用的治療骨折的重要手段[6]。布依藥“鹿角壯骨煎液”已廣泛運(yùn)用于臨床，在促進(jìn)骨折愈合上療效確切，符合臨床用藥特點(diǎn)，無(wú)不良反應(yīng)。本課題從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和影像學(xué)觀測(cè)的角度進(jìn)一步驗(yàn)證了布依藥“鹿角壯骨煎液”的療效，為臨床進(jìn)一步推廣該藥提供了理論依據(jù)。參考文獻(xiàn)：[1]鄭培永，陳繹志，趙光復(fù)，中藥促進(jìn)骨折愈合的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[M].中醫(yī)止骨，1999，11 （1）：53.[2]沈霖，林燕萍，王擁軍.骨傷科實(shí)驗(yàn)研究[M].北京：北京科學(xué)技術(shù)出版社，2005：384.[3]孫永生，溫建民，吳林生，等.骨折三期治療對(duì)骨生長(zhǎng)因子FCF-2表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)骨傷，2004，17（4）：222-226.[4]上海市骨傷科研究所傷科論文匯編[M].第3輯.上海：上?？萍汲霭嫔?，1964，226.[5]潘貴超，王輝奇，張治國(guó).補(bǔ)腎健脾活血方對(duì)大鼠骨質(zhì)疏松骨折愈合的作用及其機(jī)理探討[J].中日中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2011，17（2）：156-157.[6]崔永鋒，王琦，張毅，等.杜仲對(duì)兔骨折愈合影響的x線影像學(xué)研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2003，14（3）：163-165（收稿日期：2014-11-07）