李艷青 朱秀高

1.濰坊科技學院生物研發(fā)中心，山東壽光 262700；2.中國農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院，北京 100000；3.武漢回盛生物科技有限公司，武漢 430042

1 發(fā)病情況

2014年3月份，某養(yǎng)豬企業(yè)負責人反應其場內(nèi)體質(zhì)量30～50kg左右的生長育肥豬從2013年開始經(jīng)常出現(xiàn)呼吸道疾病，使用多種藥物預防和治療均沒有明顯效果，發(fā)病率約為30%以上，病死率約5%，很多病豬后期成為僵豬，給生產(chǎn)成績帶來極大影響。

該豬場存欄母豬為700多頭，在同一個場內(nèi)采用分區(qū)式飼養(yǎng)，母豬和保育豬群為A區(qū)，生長育肥豬群為B區(qū)，兩區(qū)之間為單一通道、設(shè)有大門和消毒池、直線距離約為200m，除技術(shù)人員外均為獨立負責。對豬群進行全面檢查發(fā)現(xiàn)問題豬群主要存在以下癥狀：母豬群的淚斑出現(xiàn)率約為60%、返情率約為13%；保育豬群20%左右出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹、消瘦，有的有輕微腹式呼吸等呼吸道癥狀；生長育肥豬群的發(fā)病豬主要表現(xiàn)為消瘦、咳嗽、腹式呼吸、體溫升高（平均為39℃左右）、有的耳尖出現(xiàn)干性壞死。

對5頭發(fā)病保育豬和生長育肥豬放血致死后解剖觀察，發(fā)現(xiàn)保育豬腫脹的關(guān)節(jié)內(nèi)有清亮或淡黃色的液體，心包液明顯增多、有的渾濁，肝臟表面有纖維素滲出形成的包膜，腹腔內(nèi)有零星纖維素滲出形成的淡黃色干酪樣凝塊；生長育肥豬的表現(xiàn)有少量與保育豬相似，普遍性的癥狀為肺臟腫脹、間質(zhì)明顯增寬，其他臟器無特征性病變。

現(xiàn)場采集不同胎次母豬血液30份、外觀健康與發(fā)病保育豬血液20份、外觀健康與發(fā)病生長育肥豬血液10份，共60份。同時采集解剖豬的肺臟、脾臟、淋巴結(jié)、肝臟等送實驗室進行抗體和抗原檢測。

2 診斷與處理

2.1 診斷

綜合臨床觀察、病豬解剖及實驗室檢測（圖1、2和表1）結(jié)果，確診豬群的癥狀是由副豬嗜血桿菌引起，同時群內(nèi)存在藍耳病病毒感染，且豬場流行毒株與疫苗免疫毒株存在基因差異。

圖1 組織病料及血清PCR檢測結(jié)果

圖2 PRRSV分離株與常用疫苗株的進化分析

表1 各階段豬血清的抗體檢測結(jié)果

2.2 處理

分別對豬群采取如下措施。

1）全場的藍耳疫苗免疫停止6個月；

2）母豬群每噸飼料中加入5%泰萬菌素1.5kg+定喘散1kg+綠益態(tài)1kg，每月1次，每次10d，全群飼喂，連續(xù)用5個月；

3）產(chǎn)房母豬每噸飼料中加入10%氟苯尼考600 g+復方磺胺氯達嗪鈉300g+綠益態(tài)1kg，臨產(chǎn)前飼喂7d；

4）現(xiàn)有保育豬及生長育肥豬每噸飲水中加入10%氟苯尼考800g+5%強力霉素1kg+復方磺胺氯達嗪鈉300g+綠益態(tài)1kg，連用5d，有嚴重呼吸道癥狀的用2.5%硫酸頭孢喹肟注射液按0.1mL/kg的劑量，每天注射1次，連用3d；

5）以后斷奶豬群在斷奶后，于每噸飼料中加入10%氟苯尼考600g+5%強力霉素1kg+定喘散1kg+綠益態(tài)1kg，連用7d；轉(zhuǎn)群后，于每噸飼料中加入10%氟苯尼考600g+5%強力霉素1kg+復方磺胺氯達嗪鈉300g+定喘散1kg，連用7d。

3 分析與討論

豬場使用處理方案1個月后回訪，反饋原有發(fā)病豬的癥狀已經(jīng)消失，生長恢復正常，個別成為僵豬的仔豬進行了淘汰處理，后續(xù)斷奶仔豬及生長育肥豬應用后的發(fā)病率明顯降低，母豬正在按計劃方案繼續(xù)使用。

根據(jù)對豬場的現(xiàn)場調(diào)查、實驗室診斷及與豬場各方面人員的溝通，分析本次豬群發(fā)病的主要原因為藍耳疫苗的使用不合理，疫苗毒株與流行毒株匹配度不高，免疫后產(chǎn)生的抗體不能對豬體有充分的保護作用，造成豬群出現(xiàn)PRRSV亞臨床感染，進一步導致其他疾病易感，如副豬嗜血桿菌病等，因此疾病處理過程中應在治標的同時兼顧治本，否則病原很難從場內(nèi)控制。自2006年國內(nèi)暴發(fā)HP-PRRSV感染后，高致病性毒株疫苗的推出雖然暫時控制了豬群的發(fā)病，但高致病性疫苗和經(jīng)典性疫苗的共存給豬場選擇合適的疫苗造成了困難。在豬場服務中，筆者發(fā)現(xiàn)很多豬場由于疫苗選擇不當而造成病毒在場內(nèi)的持續(xù)性蔓延，同時給其他疾病的控制也帶來極大干擾。依據(jù)現(xiàn)有免疫學經(jīng)驗，針對變異性較大的病毒，使用血清型和基因型與流行株一致的毒株制備的疫苗對感染的保護力最高，如禽流感（AI）H5亞型疫苗已經(jīng)根據(jù)流行毒株的變異，進行了多次改進。Frossard等對從2003年到2007年分離到的100株歐洲型PRRSV進行了分析，結(jié)果顯示與90年代的毒株相比病毒已經(jīng)發(fā)生了變異，以O(shè)RF7序列為模型分析顯示每年每個位點的置換率為3.8×10-3[1]。張軍杰等對從502份血清中分離到的HP-PRRSV進行的基因分析顯示，分離株與JXA-1的同源性為87.1%～100%[2]。因此，豬場進行PRRS的免疫時應首先確定場內(nèi)流行毒株與各類疫苗毒株的同源性，選用同源性最高的疫苗毒株進行免疫可從最大程度上獲得高保護力。本案例中，豬場是在免疫某經(jīng)典株疫苗3個月后出現(xiàn)的生產(chǎn)不穩(wěn)定、發(fā)病率增加，聽從建議停用6個月后，再次選用了另一與其場內(nèi)病毒處于同一進化分支的疫苗株進行免疫，至今生產(chǎn)中沒有出現(xiàn)過原有病例。此外，Zhao等研究發(fā)現(xiàn)泰萬菌素具有明顯的抑制PRRSV感染導致的肺炎病變[3]，Stuart的研究指出泰萬菌素能夠抑制PRRSV的細胞內(nèi)復制增殖[4]。PRRS不穩(wěn)定場除了合理選擇使用疫苗，還應在豬群特別是母豬群中使用泰萬菌素以減少PRRSV在場內(nèi)的流行、降低病毒感染造成發(fā)病的機率。

診斷在疾病處理過程中具有重要作用。近年來豬病的表現(xiàn)越來越復雜，很多豬病的典型臨床癥狀已經(jīng)很少見到，且混合感染問題更加突出，影子病的存在進一步增加了疾病誤診的可能，因此當前疾病診斷應采用一些已經(jīng)證實可靠的實驗室方法，以確保診斷結(jié)果的可靠性，這樣才能為疾病的處理提供正確方向。本案例中就同時采用了PCR和ELISA兩種方法進行綜合診斷，并為最終確診提供了重要的參考數(shù)據(jù)。

[1]FROSSARD J P，HUGHES G J，WESTCOTT D G，et al.Porcine reproductive and respiratory syndrome virus：genetic diversity of recent British isolates[J].Veterinary Microbiology，2013，162（24）：507-518.

[2]張軍杰，龍?zhí)遥瑢O瑞芹，等.豬藍耳病病毒分離純化及Nsp2序列分析[J].廣東農(nóng)業(yè)科學，2013（2）：135-138，237.

[3]ZHAO Z，TANG X，ZHAO X，et al.Tylvalosin exhibits anti-inflammatory property and attenuates acute lung injury in different models possibly through suppression of NF-κB activation[J].Biochemical Pharmacology，2014，90（1）：73-87.

[4]STUART A D，BROWN T D K，MOCKETT A P A.Tylvalosin，a macrolide antibiotic，nhibits the in-vitro replication of european and american porcine reproductive and respiratory syndrome virus（prrs）viruses[J].The Pig Journal，2008（61）：42-48.