方草，王德立，陳德力，惠鴻運

(1.海南省農(nóng)墾總醫(yī)院，海南 ?？?570311；2.中國醫(yī)學科學院 藥用植物研究所 海南分所，海南 萬寧 571533)

·基礎研究·

不同產(chǎn)地牛大力塊根的營養(yǎng)品質(zhì)與藥用品質(zhì)分析△

方草1，王德立2*，陳德力2，惠鴻運2

(1.海南省農(nóng)墾總醫(yī)院，海南 ?？?570311；2.中國醫(yī)學科學院 藥用植物研究所 海南分所，海南 萬寧 571533)

目的：了解海南和廣西兩地產(chǎn)牛大力的營養(yǎng)品質(zhì)差異和主要成分高麗槐素的含量差異，比較兩地產(chǎn)牛大力的品質(zhì)優(yōu)劣。方法：采用常規(guī)的食品營養(yǎng)成分分析方法測定多個營養(yǎng)指標含量及總灰分含量；采用高效液相色譜法測定牛大力中高麗槐素的含量。結(jié)果：海南和廣西兩地產(chǎn)牛大力中多種營養(yǎng)成分的含量分別為：糖，24.12%和7.83%；淀粉，4.93%和26.96%；纖維素，14.54%和60.49%；蛋白質(zhì)，2.58%和0.031%；氨基酸，0.067%和0.011%；總膳食纖維，0.67%和0.82%；粗脂肪，0.315%和0.59%；維生素B2，0.166、0.156 mg·g-1；維生素C：1.67、1.02 mg·g-1。海南和廣西兩地產(chǎn)牛大力中含高麗槐素分別為0.064、0.012 4 mg·g-1。海南產(chǎn)牛大力中糖、淀粉、蛋白質(zhì)、總氨基酸、維生素C和高麗槐素的含量顯著高于廣西產(chǎn)牛大力(P<0.05)，而廣西產(chǎn)牛大力中纖維素、總膳食纖維和脂肪含量顯著高于海南產(chǎn)牛大力(P<0.05)，總灰分與維生素B2含量在兩地樣品間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結(jié)論：海南與廣西兩地產(chǎn)牛大力的營養(yǎng)品質(zhì)及藥用品質(zhì)有明顯差異。

牛大力；營養(yǎng)品質(zhì)；藥用品質(zhì)；高麗槐素

牛大力為蝶形花科植物美麗崖豆藤MillettiaspeciosaChamp.的干燥塊根，又稱牛古大力、山蓮藕等[1]，為海南特色南藥和黎藥，在廣西為著名壯藥，且被《廣西中藥材標準》收載[2]。美麗崖豆藤主要分布在海南、廣西和廣東等地。牛大力味甘、性平，歸肺、脾、腎經(jīng)，具有補脾潤肺、強筋活絡的功效，常用于治療腰肌勞損、陰虛咳嗽、風濕痹痛等癥[3]，該藥是壯腰健腎丸及強力健腎膠囊等中成藥的原料藥。在海南，牛大力被認為是藥食同源產(chǎn)品，常用于煲湯或加工成食品，如牛大力酒、牛大力湯包、牛大力沖劑等，隨著對牛大力研究的不斷深入，更多的牛大力保健品或食品將逐步上市。

現(xiàn)代藥理研究表明，牛大力具有調(diào)節(jié)免疫[4-5]、祛痰、鎮(zhèn)咳平喘[6]、抗癌[7]、保肝[8]及輻射損傷保護與修復[9]等作用。這些藥理作用與其所含的化學成分密切相關，研究表明牛大力主要含有多糖類、三萜類、黃酮類、木質(zhì)素類物質(zhì)[10-11]，其中高麗槐素、芒柄花素、異甘草素[12-13]等黃酮類成分含量較高，且高麗槐素已被證實具有抗菌、抗癌及抗寄生蟲的作用[14-16]，因此本研究以高麗槐素為指標評價牛大力藥用品質(zhì)的優(yōu)劣。

前人對牛大力的研究主要集中在化學成分方面，對其營養(yǎng)價值鮮有介紹。牛大力中含有豐富的微量元素鐵、錳、鋅、銅[17]，及鈣、鎂等元素[18]。牛大力除含有微量元素外，淀粉、蛋白質(zhì)、膳食纖維、氨基酸及維生素等營養(yǎng)成分也是牛大力保健產(chǎn)品或食品的重要參考指標，但目前對牛大力中這類營養(yǎng)成分的含量情況尚無研究報道。本研究通過測定海南和廣西兩地產(chǎn)牛大力塊根中營養(yǎng)指標含量，結(jié)合高麗槐素含量測定，對其營養(yǎng)價值和藥用品質(zhì)進行分析，比較兩地產(chǎn)牛大力的品質(zhì)差異。

1 材料、試劑與儀器

1.1 材料

2014年6月，在海南五指山市毛陽鎮(zhèn)收集牛大力干品2 kg，廣西產(chǎn)牛大力干品1 kg購于海南萬寧興隆鎮(zhèn)廣安堂大藥房。將收集的牛大力切片、粉碎，過60目篩，備用。

1.2 儀器和試劑

Waters 1525高效液相色譜儀(美國WATERS公司)，XS105DU電子分析天平[梅特勒-托利多(上海)有限公司]，Mill-Q Advantage A 10超純水器(Advantage A10 USA)，KQ-500DE超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，UV-2450紫外可見分光光度計(日本島津)。

甲醇、乙醇、乙腈均為色譜純(Sigma-Aldich)。高麗槐素對照品(上海源葉科技有限公司，批號：19908-48-6，純度>98%)，維生素B2、維生素C、牛血清蛋白對照品(上海源葉科技有限公司，純度：99%)。

2 方法

2.1 營養(yǎng)成分含量測定

營養(yǎng)成分測定方法參考《現(xiàn)代食品分析實驗》[19]，并進行適當修改。 除測定樣品的灰分和水分外，還測定9個營養(yǎng)指標含量。蒽酮法測定可溶性糖含量、淀粉含量及纖維素含量；酶水解法測定膳食纖維含量；考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量；酸水解法測定粗脂肪含量；分光光度計法測定氨基酸含量；分光光度計法測定維生素B2和維生素C含量。

2.2 高麗槐素含量測定

2.2.1 線性關系考察 精密稱取高麗槐素對照品2.50 mg 置于25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。分別精密吸取高麗槐素對照品儲備液適量，用甲醇分別稀釋為100、50、25、12.5、6.25、3.125 μg·mL-1的系列對照品溶液，搖勻。精密吸取上述對照品溶液各10 μL注入HPLC色譜儀，于310 nm處測定。

2.2.2 樣品制備 精密稱取樣品粉末1.0 g，置50 mL圓底燒瓶中，加入70%甲醇15 mL，稱重，65 ℃水浴加熱回流提取45 min，超聲(400 W，400 kHz)提取45 min，冷卻至室溫，以甲醇補足減失的重量，濾過，精密吸取續(xù)濾液7.5 mL，濃縮至干，殘渣用甲醇溶解并定容至2 mL，搖勻，過0.45 μm微孔濾膜，取濾液，即得。

2.3 數(shù)據(jù)收集與處理

慕思捷介紹，德馬泰克在開辟市場的過程中，非常重視對市場情報的收集和分析。“在采取行動之前，我們會對市場進行分析，了解不同地區(qū)市場的不同發(fā)展趨勢，接下來我們會考慮為了順應這些發(fā)展趨勢，我們需要采用哪些產(chǎn)品解決方案。等到這一切都確定之后，我們才會去考慮這些方案需要用到哪些設備。這是一種逆向思維，與開發(fā)出產(chǎn)品之后再去考慮它可以用在哪些產(chǎn)品解決方案中的方式大不相同。我們會根據(jù)我們所在市場的特點，采取不同的思維方式來觀察和分析。”正是對市場的了解和對方案的靈活掌握，德馬泰克才能在中國、馬來西亞、北美等差異巨大的市場都具有強大的市場競爭力，這正是德馬泰克成功的關鍵。

每個樣品的每個指標重復測定4次，對收集的數(shù)據(jù)用SPSS 16.0進行均值比較。

3 結(jié)果與分析

3.1 營養(yǎng)成分含量測定結(jié)果

分別測定了海南和廣西產(chǎn)牛大力中10個營養(yǎng)成分含量，見表1。其中海南產(chǎn)牛大力中糖類、淀粉、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素C含量高于廣西樣品；灰分和維生素B2含量兩地樣品間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；廣西產(chǎn)牛大力中纖維素、膳食纖維和粗脂肪高于海南樣品。

表1 海南產(chǎn)和廣西產(chǎn)牛大力營養(yǎng)成分比較

注：a、b表示兩材料差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

3.2 高麗槐素含量測定

3.2.1 線性關系考察 根據(jù)2.2.1實驗結(jié)果得出線性回歸方程為Y=1.053×106X-5 345.853，r=0.999 4，其對照品和樣品在310 nm處的色譜圖見圖1。

注：A.高麗槐素對照品；B.樣品；1.高麗槐素。圖1 牛大力樣品及高麗槐素對照品HPLC圖

3.2.2 精密度試驗 精密吸取高麗槐素對照品儲備液適量，用甲醇稀釋至10.0 μg·mL-1，連續(xù)進樣6次，分別測定高麗槐素的峰面積，其RSD=0.91%(n=6)。

3.2.3 穩(wěn)定性試驗 取海南產(chǎn)牛大力供試品溶液，分別于配置后0、2、4、6、8、10、12 h進樣，測定高麗槐素的峰面積，其RSD=0.86%(n=7)，結(jié)果表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

3.2.4 重復性試驗 取海南產(chǎn)牛大力樣品，共6份，按供試品溶液制備方法制備，測定高麗槐素的峰面積，計算RSD=1.0%(n=6)，結(jié)果表明試驗重復性良好。

3.2.5 加樣回收試驗 取海南產(chǎn)牛大力樣品6份，按2.2.2方法制備供試液，分別精密加入一定量(與樣品中含量相當)的對照品，測定高麗槐素含量，計算樣品加樣回收率，平均回收率為97.89%，其RSD=1.59%。

3.2.6 高麗槐素含量測定結(jié)果 測定了海南和廣西產(chǎn)牛大力塊根中高麗槐素含量，二者高麗槐素質(zhì)量分數(shù)分別為0.064、0.012 4 mg·g-1，海南產(chǎn)牛大力中高麗槐素含量顯著高于廣西產(chǎn)牛大力。

4 討論

本研究首次報道了牛大力中糖類、淀粉、蛋白質(zhì)、氨基酸，維生素C、維生素B2、纖維素、膳食纖維及粗脂肪等營養(yǎng)元素含量，并發(fā)現(xiàn)海南產(chǎn)牛大力中糖類、淀粉、蛋白質(zhì)、氨基酸及維生素C的含量均高于廣西產(chǎn)牛大力。其中海南產(chǎn)牛大力中維生素C含量高達1.67 mg·g-1，即每100 g牛大力中含有16.7 mg維生素C，與番茄中的含量相當。廣西產(chǎn)牛大力中纖維素、膳食纖維及粗脂肪含量高于海南產(chǎn)牛大力。兩地樣品的灰分含量為1.75%左右，維生素B2含量為0.166 mg·g-1左右，差異較小。總體而言，兩地產(chǎn)牛大力的營養(yǎng)品質(zhì)差異明顯。

王春華等[20]首次從牛大力中分離得到高麗槐素，并分別測定了購自中藥材市場不同批次的牛大力中高麗槐素含量，為0.031～0.075 mg·g-1[12]，李銳等[21]測定了海南市5個縣和廣西玉林產(chǎn)2批牛大力中該成分含量，海南樣品為0.053 8～0.100 mg·g-1，廣西玉林樣品分別為0.096 1、0.095 8 mg·g-1，這表明不同產(chǎn)地的牛大力中高麗槐素含量不同。本實驗也發(fā)現(xiàn)海南產(chǎn)牛大力中高麗槐素含量與廣西產(chǎn)牛大力不同，產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因可能與環(huán)境有關，也可能與所取材料的生長年限、藥材部位不同有關，尚需深入研究。此外，高麗槐素只是牛大力中的一個主要成分，若要判斷牛大力品質(zhì)優(yōu)劣需要測定多個指標成分含量，進行綜合分析。

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Comparisons of Nutrition and Medicinal Qualities ofMillettiaspecisoaChamnRootfromHainanandGuangxiProvincesinChina

FANG Cao1，WANG Deli2*，CHEN Deli2，HUI Hongyun2

(1.Nongken general hospital of Hainan province，Haikou 570311，China；2.Hainan Branch Institute of Medicinal Plant，Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College，Wanning 571533，China)

Objective：To ascertain difference of nutrition and medicinal quality ofMillettiaspecisoaChamn root collected from Hainan and Guangxi provinces in China.Methods：The conventional nutritional methods were applied to determine carbohydrates，starch，fiber，protein，amino acid，dietary fiber，fat，ash，VB2and VC，and the content of maakiain was determined by HPLC.Results：The contains (%) of ten nutrition indexes ofM.specisoaroot from Hainan and Guangxi provinces were obtained，and they were as following：carbohydrates 24.12 and 7.83，starch 44.93 and 26.96，fiber 14.54 and 60.49，protein 2.58 and 0.031，amino acid 0.067 and 0.011，dietary fiber 0.67 and 0.82，fat 0.315 and 0.59，ash 1.75 and 1.77，VB20.166 mg·g-1and 0.156 mg·g-1，VC1.67 mg·g-1and 1.02 mg·g-1.The contents (mg·g-1) of maakiain were 0.064 (Hainan) and 0.012 4 (Guangxi).According to these results，we found the contents of carbohydrates，starch，protein，amino acid and maakiain in Hainan material were higher than those in Guangxi material.While the contents of fiber，dietary fiber，fat in Guangxi material were higher than those in Hainan.But the contents of ash and VB2were no significant different between these two materials.Conclusion：The nutrition and medicinal qualities of Hainan material were different between Hainan and Guangxi materials.

MillettiaspecisoaChamn；nutrition quality；medicinal quality；maakiain

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.8.011

2014-12-02)

海南省自然科學基金(813242)；海南省中藥現(xiàn)代化專項項目(ZY201316)；海南省中藥現(xiàn)代化專項項目(2010ZY004)

*

王德立，副研究員，研究方向：藥用植物栽培及植物生理；E-mail：wdl101@sina.com