楊蓓，劉功成，楊慧敏，劉絨歡，王菲，李江濤，屈勇剛?，張新銀，成池杰，王闖

(1.石河子大學動物科技學院，新疆石河子832003；2.新疆石河子畜牧獸醫(yī)站，新疆石河子832000；3.新疆泰昆集團，新疆昌吉831100)

新疆石河子地區(qū)某規(guī)模化豬場豬常見傳染病抗體檢測及分析

楊蓓1，劉功成1，楊慧敏1，劉絨歡1，王菲1，李江濤1，屈勇剛1?，張新銀2，成池杰3，王闖3

(1.石河子大學動物科技學院，新疆石河子832003；2.新疆石河子畜牧獸醫(yī)站，新疆石河子832000；3.新疆泰昆集團，新疆昌吉831100)

為了解新疆石河子地區(qū)某豬規(guī)?；i場O型口蹄疫病毒（FMDV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）的抗體水平以及豬偽狂犬野毒（PRV）感染情況，本研究應用ELISA檢測技術對該場84份血清進行了FMDV、CSFV、PRRSV、PCV-2、PRV gE蛋白抗體檢測。結果發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)MDV抗體陽性率為70.24%；CSFV抗體陽性率為82.14%；PRRSV抗體陽性率為97.62%；PCV-2抗體陽性率為54.76%；PRV gE蛋白抗體陽性率為75.00%。該結果為了解該豬場5種常見傳染病的整體免疫水平，進一步制定合理的免疫程序和防制措施提供參考。

豬O型口蹄疫；豬瘟；豬繁殖與呼吸綜合征；豬圓環(huán)病毒2型；豬偽狂犬病

隨著畜牧養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展，新疆養(yǎng)殖業(yè)的規(guī)模在逐年擴大，生豬養(yǎng)殖數(shù)量不斷增多。與此同時，豬只流動頻繁，養(yǎng)殖場自身不能及時做好有效檢疫，不少養(yǎng)殖戶還沒有意識到免疫監(jiān)測對全場豬群的免疫防控的重要作用，為傳染病的流行提供了便利條件，疫病的發(fā)生也變得更加復雜，給生豬養(yǎng)殖場帶來了不小的經(jīng)濟損失，嚴重影響了養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。為掌握新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場豬常見傳染病的免疫水平，本研究對全場2000頭豬中采集到的84份樣品血清進行了FMDV、CSFV、PRRSV、PCV-2和PR-gE蛋白抗體的檢測，現(xiàn)將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 血清樣品檢測FMDV、CSFV、PRRSV和PCV-2是為了評估該豬場的免疫是否達標，檢測PRV-gE是為了判斷野毒感染情況。所采血清均為臨床表現(xiàn)健康的豬只，由新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i養(yǎng)殖場提供，共84份，采血后自然凝固，分離血清，置4℃冰箱保存。

1.2 診斷試劑盒本試驗診斷試劑盒分別為豬O型口蹄疫病毒ELISA抗體檢測試劑盒（批號：141213）、豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒（批號：150101）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測試劑盒（批號：141010）、豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體檢測試劑盒（批號：150101）、豬偽狂犬病毒gE蛋白阻斷ELISA抗體檢測試劑盒（批號：140605），均購自武漢科前動物生物制品有限責任公司。

1.3 檢測方法與結果判定

1.3.1 檢測方法按照上述ELISA試劑盒說明書進行FMDV、CSFV、PRRSV、PCV-2抗體和PRV-gE抗體水平的檢測。

1.3.2 結果判定

1.3.2.1 抗體陽性率測定對于FMDV，樣品OD630nm值≥0.4時判為陽性，樣品OD630nm值＜0.4時判為陰性；對于CSFV，樣品OD630nm值＞0.35，判為陽性；樣品OD630nm值＜0.35，判為陰性；對于PRRSV，計算KQ值，KQ=樣品OD630nm值÷陽性對照OD630nm平均值× 100，KQ≥20判為陽性；KQ＜20判為陰性；對于PCV-2，樣品OD630nm值＞0.42，判為陽性；樣品OD630nm值介于0.38到0.42之間，判為可疑；樣品OD630nm值＜0.38，判為陰性。對上述四項抗體檢測結果判定為陽性的樣品，顯示動物機體對所檢測項目產(chǎn)生了免疫應答，免疫合格；反之，結果判定為陰性的樣品顯示該機體產(chǎn)生的免疫應答效果不達標，或者沒有產(chǎn)生免疫應答，即免疫不合格。對于PRV-gE，計算S/N比值，S＝樣品孔OD630nm值，N＝陰性對照孔平均OD630nm值，若S/N比值≤0.35，樣品判為陽性；S/N比值＞0.4，判為陰性；S/N介于0.35和0.4之間，判為可疑；在該檢測項目中判為陰性的樣品提示可能存在PRV野毒感染。

1.3.2.2 變異系數(shù)計算

2 結果與分析

2.1 豬O型口蹄疫病毒抗體檢測結果84份血清樣品中豬O型口蹄疫病毒抗體陽性率為70.24%（59/ 84），陰性率為29.76%（25/84），其OD630nm平均值為0.60，變異系數(shù)為0.61，結果見表1。豬O型口蹄疫病毒抗體水平曲線圖見圖1。

2.2 豬瘟病毒抗體檢測結果84份血清樣品中豬瘟病毒抗體陽性率為82.14%（69/84），陰性率為17.86%（15/84），OD630nm平均值為0.76，變異系數(shù)為0.49，結果見表1。豬瘟病毒抗體水平曲線圖見圖2。

2.3 豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測結果84份血清樣品中豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體陽性率為97.62%（82/84），陰性率為2.38%（2/84），KQ平均值為123.36，變異系數(shù)為0.93，結果見表1。豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體水平曲線圖見圖3。

2.4 豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測結果84份血清樣品中豬圓環(huán)病毒2型抗體陽性率為54.76%（46/84），陰性率為35.71%（30/84），可疑率為9.52%（8/84），測得OD630nm值平均數(shù)為0.53，變異系數(shù)為0.58，結果見表1。豬圓環(huán)病毒2型抗體水平曲線圖見圖4。

2.5 豬偽狂犬病毒g E蛋白抗體檢測結果84份血清中豬偽狂犬病毒gE蛋白抗體陽性率為75.00%（63/ 84），陰性率為14.29%（12/84），可疑率為10.71%（9/84），檢測平均S/N值為0.25，變異系數(shù)為0.25，結果見表1。豬偽狂犬病毒g E蛋白抗體水平曲線圖見圖5。

表1 新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場豬常見傳染病抗體檢測結果Tab le1 The detection results o f antibodies to common in fectious diseases

圖1 新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場豬O型口蹄疫病毒抗體水平Fig.1 The detection result of FMDV antibody level

圖2 新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場豬瘟病毒抗體水平Fig.2 The detection resu lt o f CSFV antibody level

圖3 新疆石河子地區(qū)某規(guī)?；i場豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體水平Fig.3 The detection result of PRRSV antibody leve l

圖4 新疆石河子地區(qū)某規(guī)模化豬場豬圓環(huán)病毒2型抗體水平Fig.4 The detection result o f PCV-2 antibody leve l

3 討論

當前我國針對FMDV、CSFV和PRRV采取疫苗免疫為主的綜合防控措施，疫苗的免疫效果成為有效預防疫病的技術關鍵，國家規(guī)定其保護率不應低于70%。此次檢測結果顯示FMDV抗體陽性率為70.24%，勉強達標。根據(jù)眾多從業(yè)者所提供的FMDV跟蹤及抗體檢測試驗[1-3]，建議該豬場對口蹄疫補免一次。CSFV檢測抗體陽性率為82.14%，免疫水平達到國家標準，但根據(jù)周珍輝等[4]對抗體監(jiān)測程序防治的建議、修金生等[5]對CSFV抗體不合格豬只的建議，認為該豬場需要對CSFV抗體檢測不合格的母豬進行豬瘟免疫，再次采血檢測抗體，如仍為陰性進行淘汰，對仔豬進行補免。PRRSV在生豬養(yǎng)殖中常常是制約其規(guī)模大小的主要因素之一，為降低該病毒對養(yǎng)殖場的危害和損失，該場選擇疫苗免疫健康豬進行防控。本次檢測中PRRSV疫苗抗體陽性率為97.62%，認為該場PRRSV免疫防控效果較好。PCV-2是近年發(fā)現(xiàn)可導致豬免疫抑制的病毒，是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征的主要病原。世界各地獸醫(yī)及從業(yè)者認為使用疫苗是抑制該病的最理想辦法。在本次檢測中，PCV-2陽性率較低，為54.76%，造成此種后果的原因可能是多樣的[6]，具體原因有待進一步深入調查。豬感染偽狂犬病毒后會引起發(fā)熱、母豬流產(chǎn)、仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀、高死亡率等臨床表現(xiàn)[7]。近年來周緒斌等[8]、解偉濤等[9]報道PRV呈爆發(fā)式流行，本次檢測結果陽性率高達75.00%，證明了PRV感染在該場處于一個較高的水平。針對這一現(xiàn)狀，筆者提議該豬場需要通過凈化淘汰感染豬只，以避免該病更大程度流行及經(jīng)濟損失。

圖5 新疆石河子地區(qū)某規(guī)模化豬場豬偽狂犬病毒gE蛋白抗體水平Fig.5 The detection resu lt o f PRV-gE antibody level

[1]朱安民，王國防，姚戰(zhàn)生，等.豬口蹄疫疫苗免疫后跟蹤抗體檢測試驗及建議[J].畜禽業(yè)，2014（11）：5-7.

[2]王劍鋒，楊宗照.豬口蹄疫免疫程序研究[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2010（01）：7-8.

[3]金大春，王躍川.豬口蹄疫免疫程序和抗體水平研究[J].畜禽業(yè)，2003（08）：30-31.

[4]周珍輝，向雙云，楊久仙，等.規(guī)模豬場豬瘟、豬藍耳病、豬圓環(huán)病毒病的抗體檢測和防治[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2013（10）：92-93.

[5]修金生，吳順意，周倫江，等.淘汰豬瘟抗體不合格種豬對母豬繁殖性能和仔豬生長性能的影響研究[J].中國農學通報，2010（20）：1-6.

[6]孟紀萍，王建梅，武曉虎，等.豬圓環(huán)病毒2型和豬瘟病毒抗體檢測與分析[J].中國動物檢疫，2012（12）：39-40.

[7]殷震，劉景華.動物病毒學[M].2版.北京：科學技術出版社，1997：998-1000.

[8]周緒斌，秦云，丹尼，等.2007年規(guī)?；i場偽狂犬病野毒血清流行病學系統(tǒng)監(jiān)測與分析[J].豬業(yè)科學，2008（10）：84-90.

[9]解偉濤，喬松林，王寅彪，等.2013年河南省豬偽狂犬野毒感染血清學調查[J].中國動物傳染病學報，2014（06）：66-70.

Antibody Detection and Analysis of Common Infectious Diseases in a Sw ine Farm from Shihezi District,Xinjiang Province

Yang Bei1,Liu Gongcheng1,Yang Huimin1,Liu Ronghuan1,Wang Fei1,Li Jiangtao1, Qu Yonggang1*,Zhang Xinyin2,Cheng Chi j ie3,Wang Chuang3

(1.Col lege of Animal Science&Technology,Shihezi University,Xinj iang Shihezi 832003；2.Animal Husbandry and Veterinary Station of Shihezi,Xinj iang Shihezi 832003；3.Taikun Group of Xinjiang,Xinj iang Changj i 831100)

To investigate levels of antibodies to several common infectious diseases in a swine farm f rom Shihezi Dist rict,Xinjiang Province，the levels of antibodies to several swine diseases,including Foot and Mouth Disease（FMD）,Classic Swine Fever（CSF）,Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome（PRRS）,Porcine Circovirus Type 2（PCV-2）and Porcine Pseudorabies Virus gE（PRV-gE）,were detected in 84 serum samples f rom the swine farm via ELISA method.The resul ts revealed that positive ratio of antibodies to FMDV、CSFV、PRRSV、PCV-2 and PRV-gE was 70.24%、82.14%、97.62%、54.76%and 75.00%,respectively,providing reference for understanding the general immunity level of these f ive common diseases and fur ther establishment of proper immunity procedures.

Foot and mouth disease;Classic swine fever;Porcine reproductive and respiratory syndrome;Porcine circovirus type 2;Porcine pseudorabies

新疆石河子市農業(yè)科技攻關項目（2013NY04）

S851.3

B

1672-9692(2015)04-0041-05

2015-01-09

楊蓓（1990-），女，在讀碩士研究生，主要從事動物傳染病診斷與防治研究。

屈勇剛（1971-），男，副教授，碩士生導師，主要從事動物傳染病快速診斷及防治技術研究。