歐克芳

摘要：鑒定了在湖北省武漢市解放公園、月湖公園濕地植物種植區(qū)的再力花（Thalia dealbata）葉片上發(fā)現(xiàn)的1種病原未知的再力花病害的病原菌種類。從葉片上分離得到病菌，經(jīng)柯赫氏法則驗(yàn)證為致病病原菌，據(jù)病原菌培養(yǎng)性狀和形態(tài)特征將該病原菌鑒定為新月彎孢菌[Curvularia lunata （Wakker） Boed]。彎孢菌危害再力花，引起葉枯病。

關(guān)鍵詞：再力花；葉枯??；病原鑒定；新月彎孢菌

中圖分類號： S432.4+4文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號：1002-1302（2015）09-0164-02

再力花（Thalia dealbata）別稱水竹芋，原產(chǎn)于北美地區(qū)，為竹芋科再力花屬多年生草本植物，1992年再力花作為觀賞植物自日本引入中國[1]。再力花對氮、磷的去除效果好，易成活、繁殖快，具有一定的耐寒性，因此被廣泛應(yīng)用于人工濕地[2]。2008年7月，筆者在湖北省武漢市解放公園、月湖公園濕地植物種植區(qū)的再力花葉片上發(fā)現(xiàn)了1種病原未知的再力花病害，發(fā)病率達(dá)30%。本研究鑒定了該病害的病原菌種類，旨在為做好該病害的防治工作提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

病原菌采自武漢市解放公園、月湖公園再力花發(fā)病典型的病葉。

1.2癥狀描述

按常規(guī)方法對病株出現(xiàn)的癥狀進(jìn)行描述。

1.3病原菌的分離和菌種純化

采用常規(guī)組織分離法進(jìn)行分離。切取發(fā)病典型的再力花葉片病健交界處5 mm×5 mm小塊，用70%乙醇消毒5 s，01%HgCl2表面消毒30 s，滅菌水沖洗3～4次，無菌操作接種到馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）上，28 ℃培養(yǎng)，培養(yǎng)5 d待產(chǎn)孢后進(jìn)行單孢分離純化，再轉(zhuǎn)入試管斜面保存。

1.4病原菌致病性的測定及形態(tài)觀察

將純化、產(chǎn)孢的病原菌孢子用無菌水配制成106個/mL的孢子懸浮液，選取健康再力花植株葉片，用無菌水將再力花葉片表面蠟粉洗凈，噴灑孢子懸浮液于葉片上，以無菌水作為對照；保濕，觀察并記錄葉片發(fā)病情況。將病原菌接種于PDA培養(yǎng)基上，于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)3 d，觀察菌落顏色、形狀、大小，產(chǎn)孢后觀察分生孢子顏色、形態(tài)及分生孢子梗形態(tài)。

2結(jié)果與分析

2.1癥狀描述

該病主要危害葉片，葉尖、葉緣發(fā)生多（圖1），發(fā)病初期葉出現(xiàn)褪綠斑，病斑逐漸擴(kuò)展成不規(guī)則形，中央灰白色，周緣有褪綠暈圈。高溫高濕時(shí)病斑擴(kuò)展快，葉尖葉緣褪綠成青枯狀，葉片卷曲，嚴(yán)重時(shí)病斑聯(lián)合形成大面積組織壞死，導(dǎo)致葉片枯死。潮濕條件下，病斑正面、反面均可產(chǎn)生分生孢子梗及分生孢子，呈灰黑色霉?fàn)钗铮▓D2）。田間發(fā)病始于4月中下旬，7—9月發(fā)病嚴(yán)重。

2.2病原菌培養(yǎng)性狀及形態(tài)

PDA培養(yǎng)基上菌絲初期為白色，逐漸轉(zhuǎn)為墨綠色至黑色，菌落圓形、平展，周緣整齊（圖3）。分生孢子梗褐色，有隔，直或彎曲，頂部呈屈膝狀合軸式延伸。分生孢子褐色，大多3個隔分成4個細(xì)胞；從基部數(shù)第3個細(xì)胞向一側(cè)膨大，深褐色，第2個細(xì)胞為淡褐色，頂部、基部細(xì)胞色淺。分生孢子光滑，彎月形、廣梭形、棍棒形或近橢圓形，少數(shù)丫形（三角形）。分生孢子大小為（22.5～32.5）μm×（7.5～15.0）μm（圖4）。根據(jù)病原菌分生孢子梗、分生孢子及菌絲形態(tài)特征，認(rèn)定該菌為半知菌亞門絲孢綱絲孢目暗梗孢科彎孢霉屬新月彎孢菌[Curvularia lunata （Wakker） Boed][3-6]。

2.3致病性測定

接種7 d，用孢子懸浮液接種的葉片均發(fā)病，病斑初期為褪綠小點(diǎn)，隨著病害的發(fā)展，病斑中央灰白色有褪綠暈圈，從病斑上重新分離到相同的病原菌，遵循柯赫式法則。對照葉片均不發(fā)病。

3結(jié)論與討論

再力花是觀賞價(jià)值極高的優(yōu)良的濕地挺水植物。近年來，再力花葉枯病在武漢市發(fā)生日益嚴(yán)重，葉枯病造成再力花葉片干枯卷曲，影響觀賞價(jià)值。本研究結(jié)果表明，新月彎孢菌[Curvularia lunata （Wakker） Boed]是武漢市再力花葉枯病的致病菌。朱明旗等對新月彎孢菌的生物學(xué)特性進(jìn)行了初步研究，該菌生長、孢子萌發(fā)最適溫度為25～35 ℃，相對濕度在98%以上時(shí)，孢子萌發(fā)率達(dá)78%以上[7]。武漢市7—9月為高溫高濕天氣，適合菌絲生長、孢子萌發(fā)。新月彎孢菌在PDA培養(yǎng)基、瓊膠燕麥培養(yǎng)基上，采用28 ℃恒溫培養(yǎng)，12 h光照和12 h黑暗交替誘導(dǎo)產(chǎn)孢的方法產(chǎn)孢量均很大，說明光暗交替有利于孢子形成，符合朱明旗等的結(jié)論[7]。戴法超等研究結(jié)果表明，干燥是彎孢病菌存活、越冬的首要條件，在潮濕環(huán)境下，菌絲不復(fù)存在[8]。再力花存在于濕地環(huán)境中，其病菌越冬、發(fā)生規(guī)律、病害循環(huán)及防治措施有待進(jìn)一步研究。

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