康文彪 宋建國 周峰 薛喜娟 張莉 康新華

摘 要：了解規(guī)模化豬場PR野毒感染狀況和免疫效果，為規(guī)模化豬場偽狂犬病控制和凈化提供科學(xué)依據(jù)。采用阻斷ELISA方法，對采自11個規(guī)模場戶的379份血清進行PR-gE野毒抗體檢測，對其中的195份血清進行PR-gB抗體檢測。被調(diào)查的11個規(guī)模場中有6個規(guī)模場PR-gE抗體為陽性，群體陽性率為54.55 %，個體陽性率54.09 %。陽性率公豬為58.33 %、母豬為83.44 %，仔豬為5.08 %、育肥豬為39.10 %；PR-gB抗體陽性率公豬為100 %、母豬為100 %，仔豬為73.33 %。甘肅省規(guī)模豬場PR-gE抗體的群體陽性率和個體陽性率處于較高水平；免疫豬群的高PR-gE抗體陽性率是值得重視的問題；甘肅省豬偽狂犬病上升勢頭明顯。

關(guān)鍵詞：PR；gE抗體；gB抗體；阻斷ELISA

中圖分類號：S855.3 文獻標識碼：A 文章編號：1001-0769（2015）11-0050-03

豬偽狂犬?。≒seudorabies，PR）是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的一種高度接觸性傳染病。種豬主要表現(xiàn)為繁殖障礙：母豬產(chǎn)死胎、木乃伊胎和流產(chǎn)，對仔豬危害最嚴重，死亡率可達100 %；成年豬多為隱性感染。PRV感染會引起機體免疫抑制，而且豬體可長期帶毒和排毒，容易并發(fā)感染其他疫病。2001年，我省首次發(fā)現(xiàn)了本病，感染陽性率為39.06 %[1]，2006年感染陽性率為15.28 %，免疫抗體陽性率為60.70 %[2]，2007年免疫抗體陽性率為63.52 %[3]。為了解當前甘肅省規(guī)模養(yǎng)豬場豬PR感染情況，我們選擇中小規(guī)模養(yǎng)豬比較集中地區(qū)的11個養(yǎng)殖場進行了感染抗體檢測，現(xiàn)將結(jié)果報告如下：

1 材料與方法

1.1 樣品采集

隨機選擇全省9個市州的11個規(guī)模場戶采集并分離血清。共采集血清379份，其中公豬24份、母豬163份、仔豬59份、育肥豬133份。

1.2 檢測方法與結(jié)果判定

1.2.1 阻斷ELISA

按試劑說明書操作。

1.2.2 結(jié)果判定

陰性對照平均OD630nm—陽性對照平均OD630nm≥0.3（gB為0.4）時試驗成立，計算S/N值。其中：S=樣品孔OD630nm值，N=陰性對照平均OD630nm值。

1.2.2.1 PR-gE抗體

當S/N≤0.35，判定為陽性；0.350.4，判為陰性。

1.2.2.2 PR-gB抗體

當S/N≤0.6，判定為陽性；0.60.7，判為陰性。

1.3 試劑來源

ELISA試劑盒購自武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司，批號：PR-gE抗體：20140813、150301；PR-gB抗體：150101、150403。

2 檢測結(jié)果與分析

2.1 PR-gE抗體檢測

對采自11個規(guī)模養(yǎng)豬場的378份血清進行PR-gE抗體檢測，11個場中6個場檢出PR-gE抗體豬，群體陽性率為54.55 %；檢出PR-gE抗體陽性血清205份，個體陽性率54.09 %。其中7個育肥豬群中有4個育肥豬群PR-gE抗體為陽性，群體陽性率為57.14 %，個體陽性率為39.10 %；2個仔豬群中有1個仔豬群PR-gE抗體為陽性，群體陽性率50 %，個體陽性率為 5.08 %；2個公豬群中有1個公豬群PR-gE抗體為陽性，群體陽性率50 %，個體陽性率為58.33 %；3個母豬群有兩個群PR-gE抗體為陽性，群體陽性率66.67 %，個體陽性率為80.21 %（150/187）；各場結(jié)果見表1。

2.2 PR-gB抗體檢測

共對2個大型規(guī)模場的195份血清進行了PR-gB抗體檢測。陽性份數(shù)187份，陽性率為95.90 %。各場結(jié)果詳見表2。

3 小結(jié)與討論

3.1 群體和個體陽性率

甘肅省規(guī)模豬場PR-gE抗體的群體陽性率和個體陽性率處于較高水平。本次調(diào)查結(jié)果表明，11個場的群體陽性率為54.55 %，個體陽性率為54.09 %；而江西省規(guī)模種豬場的PR-gE抗體群體陽性率為40.00 %[4]。本次調(diào)查中育肥豬群群體陽性率為57.14 %，個體陽性率為39.10 %；而川渝地區(qū)育肥豬的PR-gE抗體個體陽性率為18.11 %[5]。本次調(diào)查中種豬的群體陽性率為60.00 %，個體陽性率為90.91 %（150/165），而福建省的種豬個體陽性率為19.39 %[6]。

3.2 免疫豬群PR抗體陽性率

免疫豬群的高PR-gE抗體陽性率是值得重視的問題。本次調(diào)查中，對兩個規(guī)模場的195份樣品同時進行了PR-gB和PR-gE抗體檢測，結(jié)果PR-gB抗體陽性187份，陽性率為95.90 %；PR-gE抗體陽性153份，陽性率為78.46 %。說明在免疫抗體水平很高的情況下，豬群仍然存在高感染抗體的現(xiàn)象，這種現(xiàn)象在豬偽狂犬病的防控中應(yīng)當引起高度重視。

3.3 甘肅省豬偽狂犬病發(fā)病趨勢

甘肅省的豬偽狂犬病上升勢頭明顯。本次對11個規(guī)模養(yǎng)豬場的379份血清進行PR-gE抗體檢測，個體陽性率為54.09 %。2001年我省對39個養(yǎng)豬場的調(diào)查結(jié)果表明，個體陽性率為39.06 %[1]；2006年的調(diào)查結(jié)果為個體陽性率15.28 %[2]；2011年的調(diào)查結(jié)果為18.4 %[3]。

4 防控建議

4.1 陽性場

陽性場應(yīng)定時監(jiān)測gE和gB抗體，特別是對母源抗體快要消失的后備豬。根據(jù)豬場血清學(xué)檢測結(jié)果，結(jié)合臨床實際情況，制定適合本場豬群的免疫程序和綜合控制（凈化）方案施，盡力遏制場內(nèi)偽狂犬病的流行。

4.2 疫苗與器械的選擇

選用優(yōu)質(zhì)gE基因缺失疫苗強化后備豬免疫，注重后備豬的選擇，加強定期監(jiān)測工作。仔豬采用滴鼻免疫方式，以建立牢固的局部粘膜免疫和早期的主動免疫力，有效預(yù)防野毒的潛伏感染和杜絕母源抗體的干擾。滴鼻免疫建議采用專用的滴鼻器，將疫苗液滴噴成均勻的霧狀，以利于疫苗的吸收。

4.3 建議使用的免疫方案

陽性豬場對仔豬采取如下方法進行免疫：0日齡滴鼻免疫1次，30日齡和70日齡各進行肌肉注射免疫1次。12～13周齡及配種前1個月再各免疫1次。

陰性豬場種豬可采用一年3次普免，仔豬8～9周齡和11～12周齡各免疫1次，后備豬在配種前間隔1個月免疫2次，末次在配種前1個月進行。

4.4 新引進種豬

新引進種豬必須進行偽狂犬病檢疫，并隔離飼養(yǎng)。 2個月后抽血樣檢查，抗體或野毒感染抗體為陰性者方可與本場其他豬混群飼養(yǎng)；所有豬群每半年應(yīng)作一次血清學(xué)鑒別檢查，嚴格隔離檢測出的野毒感染陽性豬，并將其淘汰不作種豬用或進行撲殺；健康豬場每3個月應(yīng)進行1次血清學(xué)抽查，抽檢母豬數(shù)量不得少于25 %。檢測發(fā)現(xiàn)的陽性豬立即淘汰，同時免疫陰性豬，并加強監(jiān)測。

參考文獻：（6篇，略）