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      不同炮制方法對決明子中蒽醌類成分含量的影響

      2015-11-09 15:08賴日明
      關(guān)鍵詞:決明子炮制

      賴日明

      【摘要】目的:分析不同炮制方法對決明子中蒽醌類成分含量的影響。方法:采用分光光度法對決明子生品、清炒炮制品、微波炮制品中蒽醌類含量進行測定。結(jié)果:微波炮制法浸出物得率和游離蒽醌含量最高,該方法比傳統(tǒng)炒制法效果更佳,在微波爐中以中火加熱6min、鋪設(shè)厚度0.5cm能取得最好效果;決明子生品結(jié)合蒽醌含量最高;傳統(tǒng)炒制法在180℃下炒制6min,可取得最佳效果。結(jié)論:決明子有多種炮制方法,對其中蒽醌類成分含量有不同的影響。

      【關(guān)鍵詞】炮制;決明子;微波法;清炒法;蒽醌類含量

      【中圖分類號】R284.2【文獻標志碼】A【文章編號】1007-8517(2015)20-0005-02

      決明子又叫草決明、馬蹄決明,其性微寒,味苦、甘、咸,具有清肝明目、利水通便的功效[1]。研究發(fā)現(xiàn),決明子中含有大黃素、大黃酚等蒽醌類衍生物,具有降脂降壓、保肝、調(diào)節(jié)脂肪代謝的作用[2]。蒽醌類在止血、瀉下、抗菌、利尿等方面頗具優(yōu)勢,而決明子炮制法方法較多,如炒制、醋制、酒制、微波制等,每種炮制方法都會對決明子中蒽醌類成分產(chǎn)生不同影響[3]。為進一步提高決明子炮制工藝,為其飲片質(zhì)量評價提供科學(xué)依據(jù),研究采用分光光度法對幾種不同炮制品中蒽醌類成分的含量進行測定,現(xiàn)報告如下。

      1儀器與材料

      1.1儀器BSA623S-CW準微量天平(蘇州金鉆電子衡器有限公司);紫外可見分光光度計(上海奧析科學(xué)儀器有限公司);微波爐(廣東美的微波爐制造有限公司);烘箱(江蘇高皓工業(yè)爐有限公司);SDHS21-210電磁爐(浙江蘇泊爾股份有限公司)。

      1.2材料1,8-二羥基蒽醌對照品(中國藥品生物制品鑒定所);決明子藥材采自浙江寧波,經(jīng)鑒定為豆科植物決明的干燥成熟種子。所用試劑均為分析純。

      2方法

      2.1清炒炮制分別稱取A、B、C3份決明子,每份300g。A份在150℃下加熱清炒12min,B份在180℃下加熱清炒6min,C份在200℃下加熱清炒3min。炒后粉碎,過60目篩,備用。

      2.2微波爐炮制選取加熱程度Ⅰ、加熱時間Ⅱ、決明子在微波爐內(nèi)鋪設(shè)厚度Ⅲ為因素(見表1),進行L9(34)正交實驗。

      表1正交實驗因素水平表

      2.3總蒽醌的制備取3g篩過后的粉末和3g決明子生品放于索氏提取器,加100ml80%乙醇進行回流,直至提取到無色將提取液合并,定容100ml;然后從中吸取1ml滴入燒瓶,并添加20ml1mol/L鹽酸溶液進行回流水解3h;以氯仿分為20、20、10、10ml依次進行回流萃取,合并氯仿萃取液,再用混合堿溶液萃取,直至蒽醌反應(yīng)結(jié)束,合并堿液定容至100ml,以混合堿液為空白,測定樣品中蒽醌的含量。

      2.4游離蒽醌的制備從樣品溶液制備項下提取液中取1ml,并將之置于蒸餾水20ml中,從“氯仿回流萃取”起即采用“2.3”中相同的方法,對各樣品中游離蒽醌的含量進行檢測。結(jié)合蒽醌含量=總蒽醌含量-游離蒽醌含量。

      2.5測定波長取適量的樣品溶液和對照品溶液,蒸干后加0.5%醋酸鎂-甲醇溶液溶解并定容至10ml量瓶中,以相應(yīng)試劑作空白,在400nm-800nm范圍內(nèi)進行波長掃描,結(jié)果最大吸收波長為493.5nm。

      3結(jié)果

      3.1清炒決明子對蒽醌含量的影響由表2可知,清炒品浸出物得率高于生品;清炒后總蒽醌含量無較大差異,游離蒽醌呈上升趨勢,結(jié)合蒽醌下降。綜合考慮下,清炒最佳方案為溫度180℃,時間為6min。

      表2決明子清炒后蒽醌類成分的含量

      (%)

      3.2微波炮制法正交試驗結(jié)果分別稱取300g決明子放于微波爐中加熱,最終得到9個編號的樣品,粉碎后同樣過60目篩留以備用,經(jīng)對比,實驗號6組浸出物、游離蒽醌測出量最高,結(jié)合蒽醌測出量最低,可見正交實驗中,采用中火、加熱時間6min、決明子在微爐內(nèi)鋪設(shè)厚度Ⅲ為0.5cm測得的浸出物及游離蒽醌在微波炮制中檢出量最高。見表3。

      表3微波炮制后蒽醌類成分的含量

      (%)

      3.3炒制法和微波法對比清炒決明子最佳方案的浸出物得率為5.346%,低于最佳微波炮制品中最佳值5.580%;結(jié)合蒽醌含量為0.319%,高于最佳微波炮制品的0.192%;游離蒽醌含量為0.076%,低于微波炮制品的0.082%。浸出物及游離蒽醌增加意味著療效更佳,所以微波法整體效果要高于炒制法。結(jié)合3.2的結(jié)果可知,利用微波炮制法,并將其條件設(shè)定為:中火、加熱時間6min、決明子在微波爐內(nèi)鋪設(shè)厚度Ⅲ為0.5cm測得的浸出物及游離蒽醌檢出量最高。

      3.4方法學(xué)考察①線性關(guān)系考察:分別吸取2μl、4μl、6μl、8μl、10μl對照品溶液進樣,對色譜圖加以記錄,縱坐標為峰面積,橫坐標為進樣量進行標準曲線繪制。②精密度試驗:吸取對照品溶液10μl進樣,連續(xù)進樣6次,對對照品峰面積進行測定。③穩(wěn)定性試驗:吸取對照品溶液在0h、4h、6h、8h及12h進樣10μl,對對照品峰面積進行測定。④重現(xiàn)性試驗:取6份決明子樣品(每份量為0.5g)并精密成定,跟游離蒽醌供試品溶液制備方法進行樣品制備,展開測定。經(jīng)檢測,采用中火、加熱時間6min、決明子在微波爐內(nèi)鋪設(shè)厚度Ⅲ為0.5cm的工藝條件,方法學(xué)考察相關(guān)系數(shù)高于0.9998,精密度試驗、穩(wěn)定性試驗、重現(xiàn)性試驗結(jié)果均良好。

      4討論

      決明子生品較硬難以粉碎,導(dǎo)致有效成分的溶出有限,直接影響到藥效。炒制后變得酥脆,粉碎后也增加有效成分的溶出,能夠緩和其寒瀉之性。研究[4]表明,不同炮制方法對其應(yīng)用效果有著不同影響。研究對決明子生品、傳統(tǒng)炒制品、微波爐炮制品三種樣品進行比較,考察不同因素,如加熱時間、溫度等,對浸出物得率和蒽醌含量的影響[5]。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),在浸出物得率方面,微波炮制品>清炒品>決明子生品;在結(jié)合蒽醌含量方面,決明子生品最高,其次是清炒品,微波炮制品最低;在游離蒽醌含量方面,微波炮制品最高,清炒品次之,決明子生品再次之。因決明子生品效果有限,炮制時可選擇清炒法或微波法,清炒最佳工藝是在180℃下炒制6min,微波炮制法最佳工藝則是在中火條件下微波爐張加熱6min,而且微波法效果要優(yōu)于炒制法。實際操作中微波炮制法雖然決明子鋪設(shè)厚度影響較小,但也要適中[6],如果太厚或太薄都會影響到均勻性;而炒制過程中需勤加翻動,以防局部過熱。參考文獻

      [1]曹群.炮制方法對決明子中蒽醌類成分含量的影響[J].西部中醫(yī)藥,2012,25(6):21-22.

      [2]蔣亞莉,舒志明,王建.不同炮制方法對決明子中蒽醌含量的影響[J].軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊,2010,34(4):389-391.

      [3]方艷夕,毛斌斌,時維靜,等.炮制方法對決明子中蒽醌和多糖含量的影響[J].宜春學(xué)院學(xué)報,2012,34(4):102-105.

      [4]王瑩.決明子蒽醌類成分的含量測定方法研究及其在藥代動力學(xué)中的應(yīng)用[D].陜西中醫(yī)學(xué)院,2013.

      [5]沈云士.中藥決明子蒽醌類成分含量測定的探析[J].醫(yī)藥前沿,2014,2(5):379-380.

      [6]劉斌,鞏鴻霞,肖學(xué)鳳,等.決明子化學(xué)成分及藥理作用研究進展[J].藥物評價研究,2010,33(4):312-315.

      (收稿日期:2015.08.06)

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