李　靜，孟　迪，楊　璐，楊　舒

（棗莊礦業(yè)集團(tuán)中心醫(yī)院，山東　棗莊　277800）

·藥品不良反應(yīng)·

沙利度胺聯(lián)合CIK細(xì)胞治療淋巴瘤的臨床研究

李靜，孟迪，楊璐，楊舒

（棗莊礦業(yè)集團(tuán)中心醫(yī)院，山東棗莊277800）

目的評價(jià)沙利度胺聯(lián)合自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）治療B細(xì)胞淋巴瘤的有效性和安全性。方法選擇2011年1月至2014年1月住院治療的淋巴瘤患者64例，隨機(jī)分為觀察組（32例）和對照組（32例），觀察組采用沙利度胺聯(lián)合自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療，對照組采用單純自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療，比較兩組治療效果及不良反應(yīng)，隨訪觀察生存情況。結(jié)果治療后觀察組和對照組患者均未出現(xiàn)不良反應(yīng)，β2微球蛋白、乳酸脫氫酶值均顯著下降（P＜0.05），觀察組下降的更明顯（P＜0.05）。所有患者均癥狀改善，生活質(zhì)量顯著提高，觀察組總有效率84.3％，對照組總有效率60％（P＜0.05）；觀察組1年無進(jìn)展生存率82.3％，對照組1年無進(jìn)展生存率為62.7％（P＜0.05）；觀察組1年總生存率為96.8％，對照組1年總生存率為77.4％（P＜0.05）。結(jié)論沙利度胺聯(lián)合自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞治療B細(xì)胞淋巴瘤較單純自體CIK細(xì)胞治療更能有效提高患者緩解率，延長患者生存期，且無明顯毒副作用，值得進(jìn)一步研究。

沙利度胺；細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞；淋巴瘤

非霍奇金淋巴瘤為淋巴組織的惡性腫瘤，多數(shù)起源于B淋巴細(xì)胞［1］。自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine-induced killer cells，CIK）治療是目前抗腫瘤過繼細(xì)胞免疫治療最有效的方案，具有增殖性高、殺瘤活性強(qiáng)、殺瘤譜廣泛等特點(diǎn)［2～4］。沙利度胺被認(rèn)為是一免疫調(diào)節(jié)和抗血管生成藥物，本研究采用沙利度胺聯(lián)合自體CIK細(xì)胞治療64例淋巴瘤，取得了較好療效，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1臨床資料本組64例患者為2011年1月至2014年1月收治于我院的住院患者，均經(jīng)組織病理學(xué)確診為B細(xì)胞來源的非霍奇金淋巴瘤Ⅲ～Ⅳ期。患者隨機(jī)分為兩組：觀察組32例（男21例，女11例，中位年齡68歲），采用沙利度胺聯(lián)合自體CIK細(xì)胞治療；對照組32例（男20例，女12例，中位年齡69歲），采用單純自體CIK細(xì)胞治療?；颊甙l(fā)病初期均

有結(jié)外器官侵犯，經(jīng)病理證實(shí)為淋巴細(xì)胞侵潤，4例有骨髓侵潤?；颊叨枷群蠼?jīng)過CHOP方案（環(huán)磷酰胺+多柔比星+長春新堿+潑尼松）化療6周期、受累野放療50～55 Gy，臨床未達(dá)到完全緩解，預(yù)計(jì)生存期大于6個(gè)月，患者均簽訂參加臨床試驗(yàn)知情同意書。

1.2方法

1.2.1自體CIK細(xì)胞的制備及回輸64例患者均抽取靜脈血100 mL，送至山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院行體外細(xì)胞培養(yǎng)，約7 ～14天后行自體CIK細(xì)胞回輸治療2個(gè)療程。

1.2.2沙利度胺口服觀察組用藥：抽血時(shí)即開始口服沙利度胺100 mg，每天2次，共3月。

1.3臨床療效觀察指標(biāo)

1.3.1主要指標(biāo)包括①一般情況：治療前后觀察患者癥狀變化及主觀感受，并仔細(xì)查體；②腫瘤相關(guān)生物學(xué)指標(biāo)：每2周復(fù)查1次β2微球蛋白及乳酸脫氫酶（LDH）水平，動(dòng)態(tài)觀察變化；③血常規(guī)及肝腎功能：每2周定期復(fù)查血常規(guī)及肝腎功能，觀察血細(xì)胞及肝、腎功能變化；④生活質(zhì)量（QOL）及生存期：治療前后采用卡爾諾夫斯基行為表現(xiàn)量表（KPS）評價(jià)QOL變化，并記錄生存情況。

1.3.2近期療效按世界衛(wèi)生組織（WHO）標(biāo)準(zhǔn)評價(jià)療效。完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、無變化（NC）進(jìn)展（PD），總有效（OR）率=（CR+PR）×總病例數(shù)×100％。

1.3.3遠(yuǎn)期療效無進(jìn)展生存（PFS）時(shí)間指治療開始到疾病進(jìn)展的時(shí)間，總體生存（OS）時(shí)間為治療開始至死亡或末次隨訪時(shí)間，隨訪時(shí)間為治療開始至隨訪截止日期或死亡的時(shí)間。

1.4不良反應(yīng)評價(jià)按照WHO抗癌藥物急性和亞急性毒性反應(yīng)評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以±s表示，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1近期療效比較兩組患者均完成3個(gè)月的治療，其中觀察組CR 19例、PR 8例、NC 3例、PD 2例，總有效率84.3％；對照組CR 15例、PR 5例、NC 6例、PD 6例，總有效率60％。觀察組總有效率顯著高于對照組（P＜0.05）。

2.2毒副反應(yīng)在沙利度胺聯(lián)合CIK細(xì)胞治療過程中及治療之后，患者生命體征、血常規(guī)、尿常規(guī)指標(biāo)均無明顯變化，無肝腎功能損害。

2.3淋巴瘤相關(guān)生物學(xué)指標(biāo)的變化治療前1周、治療后復(fù)查LDH及β2微球蛋白水平，治療前高于正常水平的患者，治療后LDH、β2微球蛋白水平較治療前下降，且隨著療程增加呈逐漸下降趨勢，觀察組下降的更明顯（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖1、2）。治療前LDH及β2微球蛋白水平正常的患者，治療后仍維持在正常水平。

2.4生活質(zhì)量評價(jià)及生存期患者的生活質(zhì)量均得到顯著提高，觀察組平均KPS狀態(tài)評分由治療前40分上升至治療后70分，對照組由治療前40分上升至治療后60分。截至隨訪，觀察組平均生存時(shí)間為43個(gè)月，中位生存時(shí)間為22個(gè)月；對照組平均生存時(shí)間為32個(gè)月，中位生存時(shí)間為16個(gè)月。

圖1　兩組LDH水平比較

圖2　兩組β2微球蛋白水平比較

2.5兩組患者生存率比較所有患者均獲隨訪，隨訪至2015年1月，隨訪時(shí)間12～36個(gè)月，中位隨訪時(shí)間22個(gè)月。兩組（觀察組比對照組）患者治療后，1年P(guān)FS率為82.3％ 比 62.7％（χ2=3.74，P＜0.05）；1年總生存率為96.8％比77.4％（χ2=4.81，P＜0.05）。觀察組治療后1年P(guān)FS率及1年總生存率均顯著高于對照組。

3　討論

非霍奇金淋巴瘤中B細(xì)胞來源占絕大多數(shù)。即使大劑量的化療后也容易復(fù)發(fā)和產(chǎn)生耐藥性［5］，且Ⅲ、Ⅳ期的患者經(jīng)過大劑量的化療后體質(zhì)較差，不能耐受進(jìn)一步的解救化療，這類患者急需通過新的臨床試驗(yàn)治療來延長生存期。CIK細(xì)胞是具有自然殺傷細(xì)胞（NK）活性的T細(xì)胞，主要是CD3+/CD56+細(xì)胞，可表達(dá)CD4或CD8，具有T細(xì)胞的抗腫瘤活性和NK細(xì)胞的非主要組織相容性復(fù)合體（MHC）限制性殺瘤優(yōu)點(diǎn)，并可特異地聚集于腫瘤局部發(fā)揮抗腫瘤作用［6，7］，具有增殖性高、殺瘤活性強(qiáng)、殺瘤譜廣泛等特點(diǎn)，是目前抗腫瘤過繼細(xì)胞免疫治療最有效的方案。

CIK細(xì)胞的抗腫瘤機(jī)制一般認(rèn)為與如下幾種機(jī)制有關(guān)：①通過直接釋放細(xì)胞顆粒，裂解腫瘤細(xì)胞。最近研究顯示CIK細(xì)胞的免疫效應(yīng)與活化性受體自然殺傷細(xì)胞受體G2D（NKG2D）信號途徑相關(guān)，CD4+T細(xì)胞通過上調(diào)NKG2D及其配體介導(dǎo)從而發(fā)揮溶瘤作用［8］。此外，CIK細(xì)胞還可能保持著細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL）的特性，發(fā)揮抗腫瘤作用［9］；②激活腫瘤細(xì)胞凋亡基因和通過死亡受體（TNF-α、FasL）活化Caspase級聯(lián)反應(yīng)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡；③分泌多種細(xì)胞因子，例如：IL-2、TNF-α、IFN-γ等，發(fā)揮抗腫瘤作用或或者調(diào)節(jié)免疫功能［10，11］。研究者發(fā)現(xiàn)CIK細(xì)胞具有對浸潤到骨髓、肝、脾、淋巴結(jié)的腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生趨化的作用，但對正常骨髓前體細(xì)胞無殺傷，這為CIK細(xì)胞在血液腫瘤治療上發(fā)揮特殊治療價(jià)值提供了可能。

近期研究發(fā)現(xiàn)沙利度胺夠抑制TNF-α活性，其對多發(fā)性骨髓瘤有顯著的療效，對其他腫瘤也顯示出有不同的治療效果。沙利度胺具有調(diào)節(jié)免疫和抗血管生成作用，涉及多種炎癥因子：TNF-α、IL-6、IL-10、IL-12、COX-2等，通過阻斷堿性成纖維因子（bFGF）和血管內(nèi)皮生成因子（VEGF）而實(shí)現(xiàn)，沙利度胺的療效與其抗血管生成有關(guān)［12］。沙利度胺可抑制COX-2，從而下調(diào)前列腺素E2的表達(dá)［13］，繼而抑制血管生成。研究表明，沙利度胺可以介導(dǎo)多種細(xì)胞中核轉(zhuǎn)錄因子（NF-κB）的失活［14］，NF-κB與淋巴系統(tǒng)腫瘤的發(fā)病有關(guān)，NF-κB介導(dǎo)一些細(xì)胞因子及黏附分子的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，維持腫瘤細(xì)胞的生長［15］。

我們采用沙利度胺聯(lián)合自體CIK細(xì)胞治療B細(xì)胞淋巴瘤也取得較好的臨床療效，沙利度胺聯(lián)合自體CIK細(xì)胞較單純自體CIK細(xì)胞治療更能有效提高患者緩解率，延長患者生存期，且其價(jià)格低廉、毒副作用較小、患者耐受性較好，無明顯毒副作用，值得進(jìn)一步研究。未來在沙利度胺的治療劑量、治療方法以及與自體CIK細(xì)胞聯(lián)合治療時(shí)機(jī)等方面仍需進(jìn)一步探討，更可靠的結(jié)論有待于大樣本的臨床試驗(yàn)來驗(yàn)證。

［1］陽文捷，林金盈，許力，等.利妥昔單抗治療老年B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤11例臨床觀察［J］.內(nèi)科，2009，4（5）：734-735.

［2］Schmidt-Wolf IGH，F(xiàn)inke S，Trojaneck B，et al.Phase I clinical study applying autologous immunological effector cells transfected with the interleukin-2 gene in patients with metastatic renal cancer，colorectal cancer and lymphoma［J］.Br J Cancer，1999，81（6）：1009-1016.

［3］梁雪峰，丁震宇，謝曉冬.細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞在腫瘤治療中的作用［J］.國際腫瘤學(xué)雜志，2012，39（5）：344-347.

［4］Kawano R，Ohshima K，Karube K，et al.Prognostic significance of hepatocyte growth factor and e-MET expression in patients with diffuse large B-cell lymphoma［J］.Br J Hacmatol，2004，127（3）：305-307.

［5］林桐榆，張紅雨，黃巖，等.R-CHOP與CHOP方案治療初治彌漫大B細(xì)胞性淋巴瘤在中國的多中心隨機(jī)對照研究［J］.癌癥，2005，24（12）：1421-1426.

［6］Schmidt-wolf IG，Leftenova P，Mehta BA，et al.Phenotypic characterization and identification of effecter cells involved in tumor cell recognition of cytokine induced killer cells［J］.Exp Hematol，1993，21（13）：1673-1679.

［7］Nagarai S，Ziske C，Schmidt-wolf IG.Human cytokineinduced killer cellers have enhanced in vitro cytolytic activity via non-viral interleukin-2 gene transfer［J］. Genet Vaccines Ther，2004，2（1）：12.

［8］Zafirova B，Wensveen FM，Gulin M，et al.Regulation of immune cell function and differentiation by the NKG2D receptor［J］.Cell Mol Life Sci，2011，68（21）：3519-3529.

［9］Gritzapis AD，Dimitroulopoulos D，Paraskevas E，et al. Large-scale expansion of CD3+CD56+lymphocytes capable of lysing autologous tumor cells with cytokine-rich supernatants［J］.Cancer Immunol Immunother，2002，51（8）：440-448.

［10］Joshi PS，Liu JQ，Wang Y，et al.Cytokine-induced killer T cells kill immature dendritic cells by TCR-dependent and perforin-dependent mechanisms［J］.J Leukoe Biol，2006，80（6）：1345-1353.

［11］Edinger M，Cao YA，Verneris MR，et al.Revealing lymphoma growth and the efficacy of immune cell therapies using in vivo bioluminescence imagng［J］.Blood，2003，101（2）：640-648.

［12］Guinn BA，Mulherkar R.International progress in cancer gene therapy［J］.Cancer Gene Ther，2008，15（12）：765-775.

［13］Li F.Survivin study：what is the next wave？［J］.J Cell Physiol，2003，197（1）：8-29.

［14］Lu B，Makhija SK，Nettelbeck DM，et al.Evaluation of tumor-specific promoter activities in melanoma［J］. Gene Therapy，2005，12（4）：330-338.

［15］Lo HW，Day CP，Hung MC.Cancer-specific gene therapy［J］.Adv Genet，2005，54：235-255.

Clinical study of Thalidomide combined with CIK cells on the treatment of lymphoma

LI Jing，MENG Di，YANG Lu，YANG Shu
（Central Hospital of Zaozhuang Mining Group，Zaozhuang 277800，China）

Objective To evaluate the effectiveness and security of cytokine-induced killer cells′cure on B-cell lymphoma.Methods 64 cases of lymphoma patients in hospital from Jan.2011 to Jan.2014 were selected and divided into observation group（32 patients）and control group（32 patients）randomly.The observation group was treated by Thalidomide combined with CIK cells，while control group by CIK cells.The treatment effects，adverse reactions of two groups were recorded and compared.Results Adverse reaction was not occurred in two groups.The levels of beta-2-microglobulin and LDH were reduced remarkably，especially in the observation group.Clinical symptoms and living quality of all the patients in both groups were improved.The total effective rates of observation group and control group were 84.3％，60％（P＜0.05），respectively.The PFS rates of observation group and control group in one year were 82.3％，62.7％（P＜0.05），respectively.The total survival rates of observation group and control group in one year were 96.8％，77.4％（P＜0.05），respectively.Conclusion Compared with CIK cells，Thalidomide showed a better performance in improving patient remission rate，extending patient survival without obvious toxic and side effects to be worth for a further research.

Thalidomide；Cytokine-induced killer cells；Lymphama

R969.4

A

2095-5375（2015）12-0734-003

李靜，女，住院醫(yī)師，研究方向：腫瘤的內(nèi)科治療，E-mial：1197388183@qq.com