寇彥杰

（四川大學華西醫(yī)院生物治療國家重點實驗室，成都610041）

萊鮑迪苷A熱穩(wěn)定性影響因素試驗研究

寇彥杰

（四川大學華西醫(yī)院生物治療國家重點實驗室，成都610041）

研究不同加熱溫度條件下影響萊鮑迪苷A穩(wěn)定性的因素，方法采用高效液相色譜法測定試驗前后樣品萊鮑迪苷A含量，試驗結果表明影響萊鮑迪苷A熱穩(wěn)定性的主要因素包括干燥方式、水分含量和加熱時間。

甜葉菊；萊鮑迪苷A；穩(wěn)定性；影響因素

甜葉菊為菊科（Composital）斯臺維亞屬（Stevia），拉丁名為Stevia rebaudiana Bertoni，多年生草本植物。甜菊糖甙（steviol glycosides）是從甜葉菊的葉和莖中提取出來的高甜度、低熱量天然甜味劑，它主要含九種[1]不同甜味成分，其中萊鮑迪苷A（rebaudioside A）為主要成分，其甜度是蔗糖的300～450倍。在2008年美國食品藥品管理局（FDA）肯定了萊鮑迪苷A安全性后，萊鮑迪苷A作為新型高倍甜味劑或作為替代蔗糖的產品之一顯示了較好的發(fā)展和應用前景。因此隨著萊鮑迪苷A產品的大量生產和廣泛應用，對萊鮑迪苷A物理及化學性質研究具有重要意義。本文采用高效液相色譜法在不同溫度條件下對萊鮑迪苷A的穩(wěn)定性進行研究，確定影響其熱穩(wěn)定性的主要因素，為萊鮑迪苷A產品的生產提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器和材料

Agilent 1200高效液相色譜儀（配備在線脫氣機、四元梯度泵、自動進樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測器）；CP225D型電子分析天平（Sartorius公司）；DHG-9140型電熱恒溫鼓風干燥箱；PHS-25C型pH酸度計；KQ-250B型超聲波清洗器。萊鮑迪苷A對照品（含量96.2%）購自美國ChromaDex公司；萊鮑迪苷A樣品（含量≥97%）由成都華高藥業(yè)有限公司提供。乙腈（色譜純）購自美國Sigma-Aldrich公司；其它試劑均為國產分析純；水為超純水。

1.2 實驗方法

1.2.1 萊鮑迪苷A樣品含量測定萊鮑迪苷A樣品依據(jù)糧農組織/世界衛(wèi)生組織食品添加劑聯(lián)合專家委員會（Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives）2010年發(fā)布的Steviol Glycosides標準（以下簡稱JECFA 2010）[1]進行含量測定。實驗采用高效液相色譜條件為色譜柱：Phenomenex C18 4.6 mm×250 mM5 μm；流動相：乙腈-10 mmol/L磷酸鹽緩沖溶液pH 2.6（32:68）；流速：1.0 mL/min；檢測波長：210 nm；柱溫：40℃；進樣量：20μL，對照品和供試品按JECFA 2010標準規(guī)定方法進行制備檢測并記錄色譜圖（見圖1）。

圖1 萊鮑迪苷A對照品和供試樣品高效液相色譜圖

1.2.2 考察干燥方式對萊鮑迪苷A的熱穩(wěn)定性影響取經噴霧干燥和烘干干燥方式下得到的萊鮑迪苷A（水分含量均約為2.0%）的樣品適量，分別在50、85、105、145和185℃下烘烤2h，采用高效液相色譜法測定不同溫度烘烤后萊鮑迪苷A樣品的含量（以干品計）。

1.2.3 考察水分含量對萊鮑迪苷A的熱穩(wěn)定性影響取經噴霧干燥和烘干干燥方式下得到的水分含量約為2.0%、4.0%和6.0%萊鮑迪苷A的樣品適量，分別在105、145和185℃下烘烤2h，采用高效液相色譜法測定不同溫度烘烤后萊鮑迪苷A樣品的含量。

1.2.4 考察加熱時間對萊鮑迪苷A的熱穩(wěn)定性影響取經噴霧干燥和烘干干燥方式下得到的萊鮑迪苷A（水分含量約為2.0%）的樣品適量，分別在105、145和185℃下分別烘烤2、4、6、8和12h，采用高效液相色譜法測定不同溫度及時間下烘烤后萊鮑迪苷A樣品的含量。

圖2 不同干燥方式萊鮑迪苷A含量

2 結果與分析

2.1 不同干燥方式下萊鮑迪苷A的含量結果分析

按“1.2.2”項下“考察干燥方式對萊鮑迪苷A的熱穩(wěn)定性影響”方法進行試驗，以溫度為橫坐標x軸，萊鮑迪苷A百分含量（以干品計）為縱坐標y軸繪制折線圖，見圖2。

分析圖2中數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)：經烘干干燥方式制得的供試樣品在常溫（約25℃）至185℃溫度下烘烤2h后檢測萊鮑迪苷A百分含量值的相對標準偏差小于2.0%。經噴霧干燥方式制得的供試樣品在烘烤溫度為105℃以下時，萊鮑迪苷A含量降低不顯著；而在105℃以上時，含量降低明顯，特別是在145℃以上時含量顯著下降，在185℃時萊鮑迪苷A的含量已經下降到44.03%，損失達到54.9%。結果表明經噴霧干燥方式制得萊鮑迪苷A樣品隨著烘烤溫度的增加，其含量逐漸降低，穩(wěn)定性差。而經烘干干燥方式制得的萊鮑迪苷A樣品隨著烘烤溫度的增加，其含量無明顯變化，穩(wěn)定性好。

2.2 不同水分含量下萊鮑迪苷A的含量結果分析

按“1.2.3”項下“考察水分含量對萊鮑迪苷A的熱穩(wěn)定性影響”方法進行試驗，以溫度為橫坐標x軸，萊鮑迪苷A百分含量（以干品計）為縱坐標y軸繪制折線圖，見圖3的A、B。

分析圖3中數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)：經噴霧干燥和烘干干燥方式制得的供試樣品在105℃時烘烤2h后檢測，水分含量約6.0%的樣品中萊鮑迪苷A含量明顯降低，溫度在145℃和185℃時烘烤2h后檢測萊鮑迪苷A含量與常溫下（約25℃）直接檢測的含量比較，絕對差值大小順序為水分2.0%樣品＜水分4.0%樣品＜水分6.0%樣品。結果表明樣品中水分含量越高，隨著烘烤溫度的增加萊鮑迪苷A含量降低越顯著，穩(wěn)定性越差。

2.3 不同加熱時間下萊鮑迪苷A的含量結果分析

按“1.2.4”項下“考察加熱時間對萊鮑迪苷A的熱穩(wěn)定性影響”方法進行試驗，以加熱時間為橫坐標x軸，萊鮑迪苷A百分含量（以干品計）為縱坐標y軸繪制折線圖，見圖4的A、B。

分析圖中數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)：經噴霧干燥和烘干干燥方式制得水分含量約為2.0%的供試樣品在105℃時隨著加熱時間的增加，萊鮑迪苷A含量無顯著變化；在145℃和185℃時隨著加熱時間的增加，萊鮑迪苷A含量逐漸降低。結果表明烘烤溫度在105℃以上時，隨著加熱時間的增加，萊鮑迪苷A的含量逐漸降低，穩(wěn)定性變差。

圖3 不同方式制得不同水分含量的萊鮑迪苷A在不同溫度下含量

圖4 不同方式與加熱時間制得萊鮑迪苷A含量

3 小結與討論

對以上各試驗數(shù)據(jù)結果進行綜合分析發(fā)現(xiàn)，當加熱溫度在105℃以下時，不同物理性質的萊鮑迪苷A樣品含量在各試驗前后均無顯著性變化，穩(wěn)定性較好；當加熱溫度在105℃以上，隨著溫度的逐漸升高，不同物理性質的萊鮑迪苷A樣品含量在各試驗前后變化顯著，穩(wěn)定性變差。其中各因素按顯著性影響大小排列順序依次為干燥方式＞水分＞加熱時間。

本文試驗主要考察外界因素和自身物理性質對萊鮑迪苷A樣品穩(wěn)定性的影響，對萊鮑迪苷A在高溫下的熱降解機制及動力學未進行試驗研究，因此，在以后的研究工作中，應該對萊鮑迪苷A熱穩(wěn)定性各種影響因素的協(xié)同作用進行系統(tǒng)研究，為萊鮑迪苷A產品的生產和應用提供參考。

[1]Joint FAO/WHO Expert ComMittee on Food Additives.Steviol Glycosides[S].published in FAO JECFA,2010,Monographs 10.

[2]John F.Clos,Grant E.Dubois,Indra Prakash.Photostability of Rebaudioside A and Stevioside in Beverages[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2008,56：8507-8513.

[3]楊旭艷，路勇，胡國華.新型天然高倍甜味劑-萊鮑迪苷A[J].中國食品添加劑，2012（S1）：77-81.

[4]陳剛，于淑娟.阿斯巴甜的熱穩(wěn)定性研究[J].食品工業(yè)科技，2011（7）：358-359.

[5]蔡業(yè)彬，曾亞森，胡智華，等.噴霧干燥技術研究現(xiàn)狀及其在中藥制藥中的應用[J].化工裝備技術，2006，27（2）：5-10.

Factors A ffecting Thermal Stability of Rebaudioside A

KOU Yan-jie
(State Key Laboratory of Biotherapy,West China Hospital,Sichuan University,Chengdu 610041)

The rebaudioside A content of Stevia rebaudiana samples were detected by high performance liquid chromatorgraphy to study the effect of different heating temperature on the stability of rebaudioside A.The results indicate that the impact factors on thermal stability of rebaudioside A include drying methods,moisture content and heating time.

Stevia rebaudiana;rebaudioside A;stability;affecting factor

TS202.3

A

1007-2624（2015）03-0040-03

10.13570/j.cnki.scc.2015.03.015

2014-11-10

寇彥杰，男，碩士研究生，研究方向：天然藥物的提取、分離及規(guī)?；a。Email：kouyj@wagott.com