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      大孔樹脂純化樺褐孔菌多酚及其成分分析

      2015-12-20 08:54:07曹龍奎
      食品科學(xué) 2015年22期
      關(guān)鍵詞:孔菌大孔流速

      董 琦,高 珊,曹龍奎,2,*

      (1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)食品學(xué)院,黑龍江 大慶 163319;2.國家雜糧工程技術(shù)研究中心,黑龍江 大慶 163319)

      大孔樹脂純化樺褐孔菌多酚及其成分分析

      董 琦1,高 珊1,曹龍奎1,2,*

      (1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)食品學(xué)院,黑龍江 大慶 163319;2.國家雜糧工程技術(shù)研究中心,黑龍江 大慶 163319)

      采用大孔吸附樹脂對樺褐孔菌多酚進(jìn)行純化,并采用高效液相色譜-電噴霧-質(zhì)譜(high performance liquid chromatography-electrosprary ionization-mass spectrometry,HPLC-ESI-MS)技術(shù)對樺褐孔菌多酚純化物進(jìn)行分離鑒定分析。實驗結(jié)果表明,D101樹脂不僅靜態(tài)吸附量、吸附率最大,且解吸性能優(yōu)良,適合分離純化樺褐孔菌多酚。最佳純化工藝條件為上樣質(zhì)量濃度1.0 mg/mL、上樣流速1.0 mL/min、洗脫液乙醇溶液體積分?jǐn)?shù)70%、洗脫流速1.0 mL/min,在此條件下,其純度由16.52%提高到了49.77%;根據(jù)HPLC-ESI-MS檢測分析結(jié)果推測樺褐孔菌多酚中含有9 種物質(zhì),分別為無色花色素、花旗松素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、仙茅苷、像黃素-3-O-己糖苷、7-木糖苷兒茶酚、雪膽素乙、桔皮素、兒茶素、蘆丁。

      大孔樹脂;純化;樺褐孔菌多酚;成分分析

      樺褐孔菌(Inonotus obliquus),是主要分布在北歐、俄羅斯、中國北部等高寒地區(qū)白樺樹上的一種珍稀的藥用真菌,對腫瘤、心臟病、糖尿病、胃病及艾滋病等疾病有顯著療效且沒有明顯的不良反應(yīng)[1]。樺褐孔菌中主要化學(xué)成分包括葉酸衍生物、多糖類化合物、芳香物質(zhì)、多酚類化合物、三萜類化合物及生物堿類化合物等[2-3],具有抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、防治糖尿病等多種生理功能,其中含有的多酚類化合物是抗氧化作用的主要物質(zhì),具有廣泛的開發(fā)價值和應(yīng)用前景[4-13]。

      大孔吸附樹脂是一種理化性質(zhì)穩(wěn)定,不溶于酸、堿、有機(jī)溶劑的高分子吸附劑。大孔吸附樹脂的純化原理是:大孔吸附樹脂的吸附作用主要依靠分子間的范德華力,運用大量的比表面積進(jìn)行吸附,從而使化合物被洗脫劑分開達(dá)到分離純化的目的[14]。大孔吸附樹脂按極性大小分為極性、中極性、非極性樹脂三類,一般極性較大的分子適合在中極性樹脂中純化,極性較小的分子適合在非極性樹脂中純化。由于大孔樹脂的獨特的三維空間立體孔結(jié)構(gòu)而使得其孔徑和比表面積都比較大,因此具有吸附量大、吸附速度快、高穩(wěn)定性、高選擇性、易解吸、易再生處理、節(jié)省資源費用等諸多優(yōu)點[15]。

      目前,關(guān)于純化樺褐孔菌多酚及對樺褐孔菌多酚的鑒定分析的報道較少。本實驗比較5 種大孔樹脂對樺褐孔菌多酚吸附解吸性能,從中選出一種適合分離純化樺褐孔菌多酚的樹脂,并確定其最佳工藝條件。采用高效液相色譜-電噴霧-質(zhì)譜(high performance liquid chromatography-electrosprary ionization-mass spectrometry,HPLC-ESI-MS)技術(shù)對樺褐孔菌多酚純化物進(jìn)行初步分離鑒定分析,為樺褐孔菌資源的開發(fā)及利用提供一條新途徑,提高樺褐孔菌的利用率及綜合效益,同時為進(jìn)一步對樺褐孔菌的研究提供了理論依據(jù)和參考,為有效地尋找樺褐孔菌多酚中抗氧化物質(zhì)提供一定的理論依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 材料與試劑

      樺褐孔菌購于黑龍江大興安嶺漠河洪峰山特產(chǎn)加工經(jīng)銷有限公司,經(jīng)40 ℃烘干粉碎過40目篩;沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品 北京科奧科技有限公司;福林酚 天津市大茂化學(xué)試劑廠;無水乙醇、無水碳酸鈉(均為分析純)、甲醇(色譜級) 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;AB-8、D101、X-5、NKA-9大孔樹脂 天津市大茂化學(xué)試劑廠;HP-20大孔樹脂 北京綠百草科技發(fā)展有限公司。

      1.2 儀器與設(shè)備

      高速萬能粉碎機(jī) 天津市泰斯特儀器有限公司;EG720KG4-NA美的微波爐 廣東美的廚房電器制造有限公司;AR2140電子天平 奧豪斯國際貿(mào)易有限公司(上海);SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵 鞏義市英峪予華儀器有限責(zé)任公司;RE-5298旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器廠;DGG-9070A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海森信實驗儀器有限公司;T6新世紀(jì)紫外-可見分光光度計 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;HL-2D型定時數(shù)顯恒流泵 上海精科實業(yè)有限公司;SBS-16OF電腦自動部分收集器 上海精科實業(yè)有限公司;HZQ-Q智能型全溫振蕩器 哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司;Coolsafe110-4冷凍干燥機(jī) 丹麥LaboGene公司;YDA388型HPLC-MS系統(tǒng)(含二元高壓泵、自動進(jìn)樣器、柱溫箱、電噴霧離子源、Masslynx V4.1色譜工作站) 美國Waters公司;XS205分析天平 梅特勒-托利多國際股份有限公司;移液器 德國Eppendorf公司。

      1.3 方法

      1.3.1 樺褐孔菌多酚粗提液的制備

      精確稱取一定量的樺褐孔菌粉末以料液比1∶50浸于體積分?jǐn)?shù)為50%的乙醇溶液中,在微波功率為560 W條件下進(jìn)行微波輔助提取180 s,抽濾,將粗提液于50 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮,置于4 ℃保存,使用時配成所需要的質(zhì)量濃度。

      1.3.2 樺褐孔菌多酚含量的測定

      采用Folin-Ciocalteu法測定樺褐孔菌中多酚含量[16]。以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品,以吸光度為縱坐標(biāo),以沒食子酸質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=71.568x+0.012 5(R2=0.999 0)。根據(jù)式(1)計算樺褐孔菌多酚含量。

      式中:C為樺褐孔菌多酚含量/(mg/mL);A為吸光度;N為稀釋倍數(shù)。

      1.3.3 樺褐孔菌多酚純度的測定

      取一定體積的粗提液與純化液,冷凍干燥后,稱取一定質(zhì)量的粗提物與純化物,復(fù)溶。根據(jù)式(2)計算樺褐孔菌多酚純度。

      式中:P為樺褐孔菌多酚純度/%;C為樺褐孔菌多酚含量/(mg/mL);V為復(fù)溶的溶液體積/mL;m為凍干后質(zhì)量/mg。

      1.3.4 大孔樹脂的預(yù)處理

      室溫條件下,將HP-20、X-5、D101、NKA-9、AB-8這5 種樹脂用無水乙醇溶液浸泡24 h,充分溶脹后,倒除浮在表面上的雜物及碎片,用無水乙醇沖洗至不再渾濁,用蒸餾水將樹脂洗至無醇味。用5% HCl溶液浸泡樹脂8 h,用蒸餾水洗至中性,再用5% NaOH溶液浸泡樹脂8 h,后用蒸餾水洗至中性,濾紙吸干水分備用[17]。

      1.3.5 靜態(tài)吸附與解吸實驗

      將預(yù)處理過的HP-20、X-5、D101、NKA-9、AB-8這 5 種樹脂,分別精確稱取1.00 g于250 mL具塞錐形瓶中,加入質(zhì)量濃度為1 mg/mL的樺褐孔菌多酚粗提液20 mL,避光密封置于25 ℃恒溫?fù)u床上進(jìn)行振蕩,在100 r/min條件下振蕩12 h進(jìn)行吸附,充分吸附后,過濾,測定濾液中樺褐孔菌多酚的質(zhì)量濃度,按式(3)、(4)計算各樹脂的吸附量與吸附率。將充分吸附后5 種樹脂用大量蒸餾水沖洗至樹脂表面無提取液殘留,用濾紙吸干水分后,加入體積分?jǐn)?shù)為70%乙醇溶液30 mL,避光密封置于25 ℃恒溫?fù)u床上進(jìn)行振蕩,在100 r/min條件下振蕩12 h,進(jìn)行充分解吸后,過濾,測定濾液中樺褐孔菌多酚的質(zhì)量濃度,按(5)計算解吸率。

      式中:C0為吸附前樺褐孔菌多酚粗提液的質(zhì)量濃度/(mg/mL);C1為吸附后濾液中樺褐孔菌多酚的質(zhì)量濃度/(mg/mL);V1為粗提液體積/mL;m1為樹脂的質(zhì)量/g;C2為解吸后濾液中樺褐孔菌多酚的質(zhì)量濃度/(mg/mL);V2為洗脫液體積/mL。

      1.3.6 大孔樹脂靜態(tài)吸附動力學(xué)曲線

      將預(yù)處理過的HP-20、X-5、D101、NKA-9、AB-8這 5 種樹脂,分別精確稱取1.00 g于250 mL具塞錐形瓶中,加入質(zhì)量濃度為1 mg/mL的樺褐孔菌多酚粗提液20 mL,避光密封置于25 ℃恒溫?fù)u床上進(jìn)行振蕩,在100 r/min條件下振蕩12 h進(jìn)行吸附,每1 h吸取一定量的上清液測定樺褐孔菌多酚的質(zhì)量濃度,繪制靜態(tài)吸附動力學(xué)曲線。根據(jù)吸附率、解吸率及吸附動力學(xué)曲線選出其中最適合純化樺褐孔菌多酚的大孔樹脂型號進(jìn)行后續(xù)實驗。

      1.3.7 樺褐孔菌多酚上樣質(zhì)量濃度對吸附效果的影響

      稱取預(yù)處理過的D101大孔吸附樹脂5 份各1.00 g,于250 mL具塞錐形瓶中,加入20 mL質(zhì)量濃度分別為0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mg/mL的樺褐孔菌多酚粗提液,避光密封置于25 ℃恒溫?fù)u床上進(jìn)行振蕩,在100 r/min條件下振蕩12 h進(jìn)行吸附,充分吸附后,過濾,測定濾液中樺褐孔菌多酚質(zhì)量濃度,計算吸附率。

      1.3.8 洗脫液體積分?jǐn)?shù)對解吸效果的影響

      稱取預(yù)處理過的D101大孔吸附樹脂6份各1.00 g,于250 mL具塞錐形瓶中,加入質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL的樺褐孔菌多酚粗提液20 mL,避光密封置于25 ℃恒溫?fù)u床上進(jìn)行振蕩,在100 r/min條件下振蕩12 h進(jìn)行吸附,充分吸附后,過濾,測定濾液中樺褐孔菌多酚質(zhì)量濃度,將濾出的樹脂用大量蒸餾水沖洗至樹脂表面無提取液殘留,用濾紙吸干水分后,加入30 mL體積分?jǐn)?shù)分別為40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇溶液,避光密封置于25 ℃恒溫?fù)u床上進(jìn)行振蕩,在100 r/min條件下振蕩12 h,進(jìn)行充分解吸后,過濾,測定濾液中樺褐孔菌多酚的質(zhì)量濃度,計算解吸率。

      1.3.9 上樣流速對吸附效果的影響

      將處理過的D101大孔吸附樹脂濕法裝柱,將質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL的樺褐孔菌多酚粗提液,分別以2.0、1.5、1.0、0.5 mL/min的流速進(jìn)行動態(tài)吸附實驗,每隔100 mL取1 mL測樺褐孔菌多酚含量,以體積為橫坐標(biāo)、樺褐孔菌多酚含量為縱坐標(biāo)繪制曲線,研究上樣流速對吸附效果的影響。

      1.3.10 動態(tài)洗脫曲線

      將處理過的D101大孔吸附樹脂濕法裝柱,選取質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL的樺褐孔菌多酚粗提液以1.0 mL/min的流速上樣得到的樹脂柱,洗脫液為體積分?jǐn)?shù)70%的乙醇溶液,洗脫流速為1.0 mL/min,收集洗脫液并每10 mL收集一管測樺褐孔菌多酚質(zhì)量濃度,以洗脫體積為橫坐標(biāo)、樺褐孔菌多酚含量為縱坐標(biāo)繪制曲線。

      1.3.11 HPLC-ESI-MS鑒定分析樺褐孔菌多酚

      采用H P L C-M S系統(tǒng)對樺褐孔菌多酚純化物進(jìn)行檢測,流動相為A:0.1%甲酸溶液、B:甲醇;流速為0.5 mL/min;色譜柱:Acquity BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);進(jìn)樣量:5 μL;梯度洗脫程序如表1所示。

      表1 HPLC-ESI-MS梯度洗脫條件Table1 Gradient elution conditions for HPLC-ESI-MS

      2 結(jié)果與分析

      2.1 5 種大孔樹脂對樺褐孔菌多酚的靜態(tài)吸附與解吸性能

      表25 種大孔吸附樹脂對樺褐孔菌多酚的靜態(tài)吸附與解吸性能Table2 The adsorption and desorption properties of 5 kinds of resin ffoorr Inonotus obliquus polyphenols

      由表2可知,D101樹脂的吸附量及吸附率最大,其次分別為AB-8、HP-20、NKA-9、X-5。但是要作為純化樺褐孔菌多酚的樹脂不僅要求吸附率高,并且還要要求其解吸率優(yōu)秀才可以。解吸率最高的為X-5樹脂,其次分別為D101、AB-8、HP-20、NKA-9。D101型樹脂吸附率最高,解吸率也很高,適合作為純化樺褐孔菌多酚的樹脂。X-5雖然解吸率最高,但是其吸附量及吸附率都很低,所以不適合純化。其他型號的樹脂的吸附率及解吸率都不如D101樹脂。

      2.2 靜態(tài)吸附動力學(xué)曲線

      圖1 靜態(tài)吸附動力學(xué)曲線Fig.1 Static adsorption kinetic curves

      由圖1可以看出,HP-20、X-5、D101、NKA-9、AB-8這5種樹脂對樺褐孔菌多酚的吸附量隨著吸附時間的延長先增加而后趨于平衡,4~5 h基本達(dá)到吸附平衡,屬快速吸附型樹脂,且這5 種樹脂對樺褐孔菌多酚的吸附量存在一定的差異,D101靜態(tài)飽和吸附量為12.05 mg/g,其次為AB-8,吸附量為10.96 mg/g,X-5吸附量最低,為9.28 mg/g。這說明不同的大孔吸附樹脂對樺褐孔菌多酚的吸附有選擇性,通過對比HP-20、X-5、D101、NKA-9、AB-8這5 種樹脂的理化特性發(fā)現(xiàn)這可能是與樹脂的極性、比表面積和及平均孔徑大小有關(guān)系,可能只有比表面積和平均孔徑都較大有利于樺褐孔菌多酚的擴(kuò)散及吸附[18]。根據(jù)以上實驗結(jié)果分析,綜合吸附量、吸附率、解吸率及動態(tài)吸附曲線考慮,選擇D101大孔吸附樹脂來進(jìn)行純化樺褐孔菌多酚。

      2.3 樺褐孔菌多酚上樣質(zhì)量濃度對吸附效果的影響

      圖2 樺褐孔菌多酚上樣質(zhì)量濃度對吸附效果的影響Fig.2 Infl uence of sample concentration on the adsorption effi ciency

      由圖2可知,當(dāng)樺褐孔菌多酚上樣質(zhì)量濃度較低時,吸附量較小,這說明D101樹脂并未吸附飽和,隨著樺褐孔菌多酚質(zhì)量濃度不斷增加,吸附量也逐漸增加。當(dāng)質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL,吸附量達(dá)到平衡,這說明D101樹脂已基本吸附飽和。因此,在一定范圍內(nèi)提高樺褐孔菌多酚質(zhì)量濃度,能夠增加樹脂的使用率,但是當(dāng)質(zhì)量濃度過高時,樺褐孔菌多酚上樣液容易產(chǎn)生沉淀和混濁,對樹脂造成污染而導(dǎo)致堵塞[19]。因此,選擇樺褐孔菌多酚上樣質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL較為合適。

      2.4 洗脫液體積分?jǐn)?shù)對解吸效果的影響

      圖3 洗脫液體積分?jǐn)?shù)對解吸效果的影響Fig.3 Effect of eluent concentration on the desorption effi ciency

      考慮到安全及生產(chǎn)成本,本研究選擇乙醇為洗脫液。從圖3可以看出,當(dāng)洗脫液體積分?jǐn)?shù)低于70%時,解吸率隨著洗脫液體積分?jǐn)?shù)的增加而增大,當(dāng)洗脫液體積分?jǐn)?shù)為70%時,解吸率達(dá)到最大值,繼續(xù)增加洗脫液體積分?jǐn)?shù),解吸率卻呈下降趨勢。這可能是由于樺褐孔菌多酚憑借氫鍵的作用力吸附在D101大孔樹脂上,隨著洗脫液體積分?jǐn)?shù)的提高,加大了對氫鍵的斷裂作用,所以解吸率隨著升高[20]。當(dāng)洗脫液體積分?jǐn)?shù)超過70%后,由于洗脫液與樺褐孔菌多酚極性差異變大導(dǎo)致多酚得不到充分的溶解,所以解吸率呈下降趨勢。因此,選擇洗脫液體積分?jǐn)?shù)為70%較為合適。

      2.5 上樣流速對吸附效果的影響

      圖4 上樣流速對吸附效果的影響Fig.4 Effect of sample loading fl ow rate on the adsorption effi ciency

      由圖4可知,隨著樺褐孔菌多酚流出液的增多,流出液中樺褐孔菌多酚質(zhì)量濃度也越來越大,這說明D101大孔樹脂對樺褐孔菌多酚的吸附率正逐漸降低。上樣流速越慢,流出液中樺褐孔菌多酚質(zhì)量濃度越低,有利于樺褐孔菌多酚被樹脂吸附;相反,上樣流速越快,流出液中樺褐孔菌多酚質(zhì)量濃度越高,造成這樣的原因是流速過高,樺褐孔菌多酚還未來得及進(jìn)行吸附就被后加入的液體沖洗下來,從而導(dǎo)致吸附量低,但上樣流速過慢會導(dǎo)致操作時間久,從而影響生產(chǎn)效率[21]。因此,選擇上樣流速為1.0 mL/min較為合適。

      2.6 動態(tài)洗脫曲線

      圖5 動態(tài)洗脫曲線Fig.5 Dynamic desorption curve

      由圖5可以看出,在動態(tài)洗脫條件下,樺褐孔菌多酚在D101樹脂上極易被洗脫下來。樺褐孔菌多酚的洗脫峰相對集中,無拖尾現(xiàn)象。當(dāng)樺褐孔菌多酚洗脫液體積為80~200 mL時,樺褐孔菌多酚含量最高,合并樺褐孔菌多酚洗脫液濃縮后,冷凍干燥,測其純度為49.77%,較純化前的純度(16.52%)提高了2 倍左右。

      2.7 HPLC-ESI-MS鑒定分析樺褐孔菌多酚

      圖6 樺褐孔菌多酚純化物的HPLC-ESI-MS總流離子圖Fig.6 HPLC-ESI-MS total ion current chromatogram of polyphenols purifi ed from Inonotus obliquus

      圖7 樺褐孔菌多酚純化物HPLC-ESI-MS離子選擇質(zhì)譜圖Fig.7 Mass spectra of HPLC-ESI-MS of polyphenol purifi ed from Inonotus obliquus under selected ion monitoring mode

      通過HPLC-ESI-MS檢測分析,結(jié)合一些參考文獻(xiàn)[22-26],根據(jù)圖6、7中的m/z、出峰時間及高分辨質(zhì)譜檢測結(jié)果進(jìn)行初步判斷,雖然不夠準(zhǔn)確,但是由于樺褐孔菌多酚類物質(zhì)的成分組成復(fù)雜,大多采用這種方法進(jìn)行判斷,圖7A~I(xiàn)分別為無色花色素、花旗松素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、仙茅苷、像黃素-3-O-己糖苷、7-木糖苷兒茶酚、雪膽素乙、桔皮素、兒茶素、蘆丁,還有很多種物質(zhì)無法辨別,有待于進(jìn)一步分析研究。

      3 結(jié) 論

      HP-20、X-5、D101、NKA-9、AB-8共5種大孔樹脂中,D101大孔樹脂最適合分離純化樺褐孔菌多酚,其純化樺褐孔菌多酚的最佳工藝條件為:上樣質(zhì)量濃度1.0 mg/mL、上樣速率1.0 mL/min、洗脫液乙醇溶液體積分?jǐn)?shù)70%,洗脫流速1.0 mL/min。此條件下制得的樺褐孔菌多酚純化物,純度為49.77%,比純化前(16.52%)提高3 倍;結(jié)合樺褐孔菌多酚的HPLC-ESI-MS分析結(jié)果與相關(guān)文獻(xiàn)報道,推測樺褐孔菌多酚中含有9 種物質(zhì),分別為無色花色素、花旗松素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷、仙茅苷、像黃素-3-O-己糖苷、7-木糖苷兒茶酚、雪膽素乙、桔皮素、兒茶素、蘆丁。

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      Purifi cation of Polyphenols from Inonotus obliquus by Macroporous Resin and Its Component Analysis

      DONG Qi1, GAO Shan1, CAO Longkui1,2,*
      (1. College of Food Science, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163319, China; 2. National Coarse Cereals Engineering Research Center, Daqing 163319, China)

      The crude polyphenol extract from Inonotus obliquus was purified by macroporous resin adsorption and the purifi ed compounds were identifi ed by high performance liquid chromatography-electrosprary ionization-mass spectrometry (HPLC-ESI-MS). The results showed that D101 resin was suitable for the purifi cation of polyphenols from Inonotus obliquus due to the maximum static adsorption capacity and rate, and excellent desorption performance. The optimal conditions for the purifi cation process were determined as follows: the sample containing 1.0 mg/mL of polyphenols was loaded at a fl ow rate of 1.0 mL/min followed by elution with 70% aqueous ethanol at a fl ow rate of 1.0 mL/min. Under these conditions, the purity of polyphenols was increased from 16.52% to 49.77%. HPLC-ESI-MS analysis showed that 9 individual polyphenols were purified from Inonotus obliquus including leucoanthocyanidins, astilbin, curculigoside, quercetin-3-O-glycoside, catechin-7-xyloside, cucurbitacinⅡb, tangeretin, c-atechin, and rutin.

      macroporous resin; purifi cation; Inonotus obliquus polyphenol; component analysis

      TS202.3

      A

      1002-6630(2015)22-0131-06

      10.7506/spkx1002-6630-201522024

      2015-03-23

      黑龍江省教育廳成果產(chǎn)業(yè)化項目(1252CGZH13)

      董琦(1990—),男,碩士研究生,研究方向為農(nóng)產(chǎn)品加工。E-mail:305162016@qq.com

      *通信作者:曹龍奎(1965—),男,教授,博士,研究方向為農(nóng)產(chǎn)品加工。E-mail:caolongkui2013@163.com

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