豬O型口蹄疫不同廠家疫苗的免疫效果評(píng)估

張四化倪楊帆萬 云李 東程莉莉程 敏阮 征*

1.湖北省武漢市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，武漢 430016；2.湖北省武漢農(nóng)業(yè)檢測(cè)中心，武漢 430016；3.湖北省武漢市黃陂區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，武漢 430300

豬O型口蹄疫不同廠家疫苗的免疫效果評(píng)估

張四化1倪楊帆2萬 云1李 東1程莉莉3程 敏1阮 征1*

1.湖北省武漢市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，武漢 430016；2.湖北省武漢農(nóng)業(yè)檢測(cè)中心，武漢 430016；3.湖北省武漢市黃陂區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，武漢 430300

從湖北省強(qiáng)制免疫疫苗品種中選取3個(gè)不同廠家的O型口蹄疫疫苗，在同一個(gè)豬場(chǎng)選取條件相同的3個(gè)未免疫仔豬群體，分別進(jìn)行2次疫苗免疫，在二次免疫后28 d、58 d進(jìn)行采血監(jiān)測(cè)，評(píng)估不同廠家口蹄疫疫苗的免疫效果。監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，免疫合成肽疫苗豬群的抗體合格率明顯優(yōu)于另外2種疫苗，且群體免疫抗體合格率在長(zhǎng)時(shí)間能保持在一個(gè)較高的水平。疫苗的抗體效價(jià)是否與疫苗的保護(hù)力呈線性關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。

豬；O型口蹄疫疫苗；免疫效果；評(píng)估

口蹄疫是當(dāng)今世界上最為嚴(yán)重的家畜傳染病，危害牛、豬、羊等偶蹄類動(dòng)物，以傳播迅速，感染率高而著稱，國(guó)際獸疫局將其列為A類傳染病之首。而豬O型口蹄疫（FMD）是由O型口蹄疫病毒（FMDV）引起的豬的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。除感染豬外，還可感染牛、羊等偶蹄動(dòng)物。該病傳播迅速，發(fā)病率高，是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）規(guī)定必須報(bào)告的傳染病之一，中國(guó)政府規(guī)定為一類動(dòng)物疫病。該病不但引起幼畜死亡，生產(chǎn)性能下降，而且嚴(yán)重影響家畜及畜產(chǎn)品流通和貿(mào)易活動(dòng)。

在口蹄疫防控方面，疫苗免疫接種仍是多數(shù)國(guó)家防控口蹄疫的關(guān)鍵措施之一，我國(guó)采取的是強(qiáng)制免疫政策。目前市面上的O型口蹄疫種類有很多，疫苗所使用到的毒株也不盡相同，用戶在疫苗的選擇上存在一定的困惑。本試驗(yàn)旨在按照武漢市2014年各疫苗企業(yè)供應(yīng)的豬O型口蹄疫疫苗品種，針對(duì)不同生產(chǎn)廠家的疫苗進(jìn)行免疫效果監(jiān)測(cè)工作，評(píng)估不同廠家豬O型口蹄疫疫苗免疫效果之間的差異，為后續(xù)疫苗的選擇和使用提供有力的試驗(yàn)依據(jù)?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 試驗(yàn)情況

1.1 豬場(chǎng)情況

本試驗(yàn)選擇以武漢市黃陂區(qū)棟梁豬場(chǎng)為試驗(yàn)點(diǎn)。該場(chǎng)目前存欄量為1 700頭，母豬存欄140頭，年出欄量約2 100頭，品種以長(zhǎng)大為主。該場(chǎng)地處偏遠(yuǎn)，遠(yuǎn)離公路，飼養(yǎng)主防控意識(shí)較強(qiáng)，免疫檔案清晰，近幾年無重大動(dòng)物疫病發(fā)生，適合作為本試驗(yàn)要求。本試驗(yàn)從棟梁豬場(chǎng)中隨機(jī)挑選90只35日齡的仔豬，隨機(jī)分為3組，每組30只。

1.2 試驗(yàn)疫苗

D公司豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/GX/09-7株+O/XJ/10-11株），生產(chǎn)批號(hào)2014017；E公司蘭州生物藥廠豬口蹄疫O型合成肽（多肽2570+7309），生產(chǎn)批號(hào)201312002；F公司豬O型口蹄疫滅活疫苗（0/MYA98/BY/2010株），生產(chǎn)批號(hào)H140430J。

1.3 主要試劑

口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒，批號(hào)2014092301，有效期至20150323，抗原批號(hào)2014091601，使用濃度1∶14，購(gòu)自蘭州獸醫(yī)研究所。豬口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體酶聯(lián)吸附試驗(yàn)診斷試劑盒，批號(hào)201307004，有效期至20150409，購(gòu)自上海優(yōu)耐特生物醫(yī)藥有限公司。

表1 不同廠家豬O型口蹄疫疫苗免疫效果監(jiān)測(cè)結(jié)果

1.4 試驗(yàn)方法

1）疫苗免疫及分組。隨機(jī)挑選90只35日齡的仔豬，分為3組（A、B、C組），每組30只，分欄飼養(yǎng)。A組于35日齡注射D公司豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/GX/09-7株+O/XJ/10-11株），2 mL/頭；28日后二免，2 mL/頭。B組于35日齡注射E公司豬口蹄疫O型合成肽（多肽2570+7309）疫苗，1 mL/頭；28日后二免，2 mL/頭。C組于35日齡注射F公司豬O型口蹄疫滅活疫苗（0/MYA98/BY/2010株），2 mL/頭；28日后二免，2 mL/頭。

2）監(jiān)測(cè)時(shí)間。分別于二免后28 d、58 d對(duì)3組進(jìn)行血清采集，開展免疫效果抗體監(jiān)測(cè)工作。

3）結(jié)果判定。O型口蹄疫：液相阻斷ELISA的抗體效價(jià)≥26判定為合格；豬口蹄疫病毒VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測(cè)樣品應(yīng)≥0.23×陽性對(duì)照孔平均OD值。

2 不同廠家豬O型口蹄疫疫苗免疫抗體檢測(cè)情況

2.1 母源抗體水平

對(duì)3組仔豬進(jìn)行O型口蹄疫抗體水平檢測(cè)，抗體合格率為0，說明母源抗體不會(huì)對(duì)本試驗(yàn)產(chǎn)生影響（表1）。

2.2 疫苗免疫結(jié)果

免疫效果見表1。由表1可以看出，分別注射了3種疫苗的免疫組抗體水平在二免后28 d的效果均為最好。E公司的豬口蹄疫O型合成肽（多肽2570+7309）疫苗的抗體合格率最高，無論在二免后28 d還是二免后58 d一直能保持在100%的合格率；F公司的豬O型口蹄疫滅活疫苗（0/MYA98/BY/2010株）在二免28 d后的合格率為100%，在二免58 d后合格率降至了69%；D公司的豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/GX/09-7株+O/XJ/10-11株）的免疫合格率相對(duì)前2種疫苗較低，無論在二免后28 d還是58 d均達(dá)不到100%合格率，二免后58 d的合格率甚至低于國(guó)家部頒標(biāo)準(zhǔn)。

根據(jù)3種疫苗的免疫抗體合格率的變化來看，二免后28 d的免疫抗體效果是最好的。本次試驗(yàn)結(jié)果，從免疫抗體水平來看，E公司合成肽疫苗無論從免疫效力還是免疫持續(xù)期等方面均明顯優(yōu)于另外2種，F(xiàn)公司疫苗次之；而D公司疫苗在二免后28 d免疫合格率無法達(dá)到100%，在二免58 d后合格率大幅下降，效果不如另2種疫苗。

3 免疫效果評(píng)估分析

口蹄疫的防控工作是我國(guó)重大動(dòng)物疫病防控的重要內(nèi)容，受各級(jí)政府、業(yè)務(wù)部門的高度重視，我國(guó)實(shí)行重大動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫政策，疫苗接種仍是目前預(yù)防口蹄疫的有效手段，如何選擇和使用安全有效的疫苗是成功防控口蹄疫的重要條件。

本次所選擇的3種豬O型口蹄疫疫苗是從武漢市2014年各疫苗企業(yè)供應(yīng)的豬O型口蹄疫疫苗品種中選取的使用率較高的疫苗。從試驗(yàn)結(jié)果來看，合成肽疫苗的抗體合格率明顯優(yōu)于另外2種疫苗。合成肽疫苗的制作工藝不同于另外2種疫苗，該疫苗是針對(duì)病毒最重要的抗原位點(diǎn)設(shè)計(jì)，其具備幾個(gè)較明顯的優(yōu)勢(shì)。首先，其制作的工藝決定了該疫苗沒有明顯的免疫副反應(yīng)。該疫苗也被驗(yàn)證對(duì)斷奶仔豬和妊娠母豬都具有良好的安全性。并且該疫苗特異性強(qiáng)，能誘發(fā)有效的免疫應(yīng)答，其有效抗原非常穩(wěn)定，免疫持續(xù)期長(zhǎng)，抗體合格率在長(zhǎng)時(shí)間能保持在一個(gè)較高的水平。同時(shí)，相比滅活疫苗，合成肽疫苗在生產(chǎn)過程中抗原能夠準(zhǔn)確定量，注射1 mL可以保證動(dòng)物體產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的保護(hù)力，接種劑量相比滅活苗接種劑量更小。

雖然豬O型口蹄疫合成肽疫苗克服了滅活疫苗的一些缺陷，具有滅活疫苗不可比擬的優(yōu)點(diǎn)。但是在實(shí)際生產(chǎn)中，許多飼養(yǎng)主并沒有優(yōu)先選擇合成肽疫苗。分析原因認(rèn)為，也同樣是因?yàn)楹铣呻囊呙绲闹谱鞴に?，?huì)存在一些不足，比如缺乏天然蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)，分子質(zhì)量小，無法獲得足夠的免疫原性，很難如蛋白質(zhì)抗原那樣誘導(dǎo)機(jī)體的多種免疫反應(yīng)，且肽疫苗的半衰期短，同時(shí)缺乏足夠多的B細(xì)胞抗原表位的刺激，B細(xì)胞和T細(xì)胞抗原表位很難發(fā)揮協(xié)同作用。其免疫抗體水平雖然很高，但是在面對(duì)病毒時(shí)，其保護(hù)率并不是與其免疫抗體水平成線性上升關(guān)系。可能其抗體合格率均為100%，但是其保護(hù)率卻不高。合成肽疫苗與滅活苗的保護(hù)率水平的比較還需要做進(jìn)一步的試驗(yàn)來探討。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)比較了3種不同的豬O型口蹄疫疫苗，從抗體合格率來看，E公司豬口蹄疫O型合成肽（多肽2570+7309）疫苗免疫效果最好，F(xiàn)公司豬O型口蹄疫滅活疫苗（0/MYA98/BY/2010株）疫苗次之，D公司豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/GX/09-7株+O/XJ/10-11株）第三。但是疫苗的使用受到各方面因素的影響，對(duì)于疫苗的抗體效價(jià)是否與疫苗的保護(hù)力呈線性關(guān)系還有待研究。如何選擇好的豬O型口蹄疫疫苗，還需要做進(jìn)一步保護(hù)力試驗(yàn)來驗(yàn)證。

5 建 議

本試驗(yàn)數(shù)據(jù)在一定程度上反映了不同疫苗廠家豬O型口蹄疫疫苗的不同免疫效果，但是由于疫苗在使用過程中受到多方面的影響，本試驗(yàn)數(shù)據(jù)還不足以確認(rèn)選擇使用哪種疫苗會(huì)達(dá)到最好的保護(hù)力。建議設(shè)計(jì)更有針對(duì)性、更加細(xì)致的試驗(yàn)來探索如何選擇疫苗，如擴(kuò)大試驗(yàn)規(guī)模、檢測(cè)疫苗抗原濃度、增加抗體檢測(cè)密度及在有條件的單位進(jìn)行保護(hù)力試驗(yàn)以確認(rèn)疫苗的優(yōu)劣。

2015-08-14

*通訊作者

張四化，男，1981年生，碩士，獸醫(yī)師。