理囊散對奶牛產(chǎn)后子宮復舊的影響

木爾扎提·阿勒騰別克　王銀龍　加米拉　黃增文　賽務加甫　谷新利

摘要：為探討中藥理囊散對產(chǎn)后奶牛子宮機能恢復的治療效果，通過對荷斯坦奶牛產(chǎn)后2、15 d口服中藥理囊散處理，直腸檢查子宮形態(tài)、觀察子宮內惡露排放情況以及發(fā)情時間，統(tǒng)計受胎率，血清學分析理囊散對產(chǎn)后促黃體素（LH）、促卵泡素（FSH）、孕酮（P4）、雌二醇（E2）濃度的影響。結果表明，處理組（A組）第1情期受胎率為65%，處理組中惡露排盡的時間、子宮孕角以及子宮頸恢復的時間要比對照組（B組）提前5 d；A組血清中FSH、E2含量均出現(xiàn)2個高峰期，F(xiàn)SH含量在產(chǎn)后15、30 d達到最大值，E2含量在產(chǎn)后20、30 d達到最大值，相比B組同一時期FSH、E2含量差異極顯著（P

關鍵詞：理囊散；產(chǎn)后；子宮復舊；奶牛；生殖激素

中圖分類號： S858.23 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）10-0267-04

奶牛子宮復舊是指產(chǎn)后子宮恢復到未孕時的形態(tài)和功能的生理過程，產(chǎn)后子宮復舊的過程和狀態(tài)決定著奶牛產(chǎn)后第一次發(fā)情的時間，如果產(chǎn)后發(fā)情時間推遲，產(chǎn)犢間隔就會延長。我國大多數(shù)中、小型奶牛場的產(chǎn)犢間隔時間能達到365～380 d的僅占很小的一部分，90%的牛產(chǎn)犢間隔在400 d以上，有的甚至達到455 d，產(chǎn)后母?？諔褧r間有半數(shù)在 90～120 d[1]，嚴重影響了奶牛場的經(jīng)濟效益，制約了我國奶牛業(yè)的發(fā)展。為了縮短奶牛的產(chǎn)犢間隔，除了對產(chǎn)后母牛進行科學的飼養(yǎng)管理，產(chǎn)后早期還應進行相應的處理。傳統(tǒng)治療奶牛產(chǎn)后子宮恢復多采用抗生素療法和激素療法，此方法易造成抗生素和激素殘留，導致奶品質下降，影響人體健康。中藥具有療效確切、無殘留、毒副作用小等優(yōu)點，開發(fā)利用中草藥促進產(chǎn)后奶牛子宮恢復具有重要意義。谷新利等研究證明，促孕散對動物無毒副作用[2]；邵會娟等研究促孕散的化學成分及其提取工藝，提出促孕散的主要成分為黃酮和生物堿[3-4]；劉勤興等報道，促孕散對小鼠激素和子宮、卵巢具有顯著調節(jié)作用[5-6]。少量雌二醇（E2）可以促進雌性動物的發(fā)情表現(xiàn)以及生殖道的生理變化[7]。目前，理囊散對產(chǎn)后奶牛子宮機能恢復的研究尚未見報道，本試驗以理囊散對奶牛產(chǎn)后子宮內惡露排放情況、子宮形態(tài)、受胎率以及生殖激素的影響為切入點，探討理囊散加強產(chǎn)后子宮機能恢復的作用機理。本研究旨在通過理囊散對產(chǎn)后奶牛的處理，縮短子宮恢復時間，提高早期受胎率，縮短產(chǎn)犢間隔，為中獸藥治療產(chǎn)后疾病提供一定的理論基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗時間、地點

本研究臨床試驗于2013年4—11月在新疆志翔牧業(yè)奶牛場、 西部牧業(yè)奶牛場進行，后期實驗室內試驗于2013年6—11月在石河子大學動物科技學院臨床獸醫(yī)實驗室和預防獸醫(yī)實驗室進行。

1.2 材料與儀器

1.2.1 儀器 PowerWave XS2 BioTek酶標儀；-80 ℃超低溫冰箱；Eppendorf Research移液器；50S型Tringa Vet便攜式獸用B型超聲波掃描儀（Piemed ICAL，Nederland）。

1.2.2 試劑 促黃體素（LH）、促卵泡素（FSH）、孕酮（P4）、雌二醇（E2）ELISA 試劑盒購于上海藍基生物科技有限公司，其中LH、FSH和P4的靈敏度為0.1 ng/mL，E2的靈敏度為 1 pg/mL。理囊散由女貞子、熟地黃、附子、三棱、藿香、香附子、甘草、青皮等12味中藥組成。

1.3 投藥及采血時間

每頭奶牛分娩完成4 h后，灌服400 g理囊散，1次/d，連續(xù)1個療程（5 d），觀察10 d后繼續(xù)灌服1個療程，灌服理囊散前采血1次；灌服第1個療程結束后第2次采血，每隔5 d采血1次，共采血10次，采血時間為09：00—10：00；對照組每次灌服400 g無菌生理鹽水，灌服和采血時間與處理組相同。

1.4 樣品的采集和方法

清晨空腹尾靜脈采取10 mL血液，室溫靜置自然析出血清，分裝于1.5 mL離心管中，置于-80 ℃冰箱待檢。

1.5 B超檢查時間和方法

B超檢查時間為09：00—10：00，產(chǎn)后5、10、15、20、25、30、35、40、45 d用B超各檢查1次，分別測量子宮孕角的直徑、子宮頸的直徑，共9次。

1.6 療效判定

子宮恢復評判標準：直腸檢查子宮基本如正常大小、子宮沒有惡露排出的可判定為有效；子宮仍有惡露或膿性分泌物排出，直腸檢查子宮龐大或子宮壁腫脹，直腸檢查發(fā)現(xiàn)子宮復原差、弛緩、含有大量的液體，按摩子宮體、子宮頸和陰道前部會促使惡臭分泌物流出陰門則判定為無效。用藥療程結束，產(chǎn)后0～45 d內無發(fā)情情況則判定無效，產(chǎn)后0～60 d人工授精，未受孕者則判定無效。

1.7 統(tǒng)計分析

用SPSS 17.0 軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析。試驗數(shù)據(jù)均以“平均數(shù)±標準差（x±s）”表示。

2 結果與分析

2.1 理囊散對產(chǎn)后奶牛子宮復舊治療效果

從表1可以看出，A組產(chǎn)后奶牛子宮復舊治療第1情期受孕數(shù)為13頭，有效數(shù)為13頭，總有效率為65%；其中第1胎奶牛有效數(shù)為3頭，有效率為60%；在第2胎奶牛中有效數(shù)為4頭，有效率為80%；在經(jīng)產(chǎn)奶牛中有效頭為6頭，有效率為60%。 B組產(chǎn)后奶牛子宮復舊期間第1情期受孕數(shù)為5頭，有效數(shù)為5頭，總有效率為25%；其中第1胎奶牛有效數(shù)為1頭，有效率為20%；在第2胎奶牛中有效數(shù)為3頭，有效率為60%；在經(jīng)產(chǎn)奶牛中有效數(shù)為1頭，有效率為10%。

2.2 理囊散對產(chǎn)后奶牛子宮形態(tài)的影響

從圖1中看出，A組子宮孕角直徑在產(chǎn)后5 d的測量平均值為24.34 cm；產(chǎn)后15 d平均直徑急劇下降到10.75 cm，與B組相比明顯下降；產(chǎn)后20 d可直檢到完整的子宮角，子宮的形態(tài)基本恢復完整；產(chǎn)后25 d后，整體子宮孕角直徑基本持續(xù)穩(wěn)定，變化程度不大；B組中子宮孕角在產(chǎn)后5 d測量平均直徑為25.21 cm，產(chǎn)后20 d下降到8.10 cm，產(chǎn)后30 d后整體子宮孕角直徑基本持續(xù)穩(wěn)定。從圖2中看出，A組子宮頸直徑在產(chǎn)后5 d測量平均值為8.74 cm，產(chǎn)后20 d下降到3.59 cm，產(chǎn)后25 d后整體子宮頸直徑持續(xù)穩(wěn)定；B組子宮頸直徑在產(chǎn)后5 d的平均值為7.93 cm，產(chǎn)后25 d下降到 3.62 cm，產(chǎn)后30 d后整體子宮頸直徑持續(xù)穩(wěn)定?？傮w曲線分析表明：A組對子宮孕角恢復的速度要比B組恢復的速度提前 5 d，同時A組中子宮頸的恢復速度也比B組的恢復提前5 d。endprint

2.3 理囊散對產(chǎn)后奶牛惡露排放的影響

從表2看出，A試驗組中奶牛惡露排放歷期平均為10 d，其中在1周內45%的奶牛產(chǎn)后惡露排放干凈，55%的奶牛產(chǎn)

后仍排出膿血樣，帶有胎衣碎片，黏度較大，帶有較濃的腐敗惡臭的血腥味；2周內85%的奶牛產(chǎn)后惡露排放干凈，只有15%奶牛產(chǎn)后仍排出褐紅或橙色、橙白色、清潔、透明稀薄、線狀、黏度一般、惡臭味一般的惡露；在3周內100%產(chǎn)后奶牛惡露排放干凈。B組試驗中，在1周內5%的奶牛產(chǎn)后惡露排放干凈，95%的奶牛產(chǎn)后仍排出膿血樣，帶有胎衣碎片，黏度較大，帶有較濃的腐敗惡臭的血腥味；2周內40%的奶牛產(chǎn)后惡露排放干凈，60%奶牛產(chǎn)后仍排出褐紅或橙色、橙白色、清潔透明稀薄、線狀、黏度一般、惡臭味一般的惡露；在3周內70%產(chǎn)后奶牛惡露排放干凈，30%奶牛仍排出橙色或偶爾有血絲、稀薄、線狀的惡露；在4周內75%產(chǎn)后奶牛惡露排放干凈，25%患有子宮內膜炎和子宮蓄膿。

2.4 理囊散對產(chǎn)后奶牛血清中生殖激素的影響

根據(jù)表3中數(shù)據(jù)繪制各激素變化的曲線（圖3至圖6）。A組試驗中經(jīng)過理囊散2個療程處理后，產(chǎn)后奶牛在子宮復舊期間血清中FSH、E2含量均出現(xiàn)2個高峰期；B組試驗中血清中FSH含量在產(chǎn)后20、30 d出現(xiàn)了2個高峰期， 而血清中LH、P4、E2含量在子宮復舊期間只出現(xiàn)1個主要高峰期。在A組試驗中，F(xiàn)SH含量在產(chǎn)后15、30 d達到最大值，分別為（11.07±4.93）、（13.49±5.73） ng/mL，相比B組同一時期FSH含量差異極顯著（P

大值，為（15.64±6.77） ng/mL，相比B組同一時期LH含量差異極顯著（P

后20、30 d達到較大值，分別為（337.21±91.24）、（206.9±77.20） pg/mL，相比B組同一時期E2含量差異極顯著（P<0.01）。

3 討論與結論

3.1 理囊散對產(chǎn)后奶牛激素水平的影響

3.1.1 處理組、對照組中FSH、LH含量的變化情況 本研究結果表明，A組、B組在子宮復舊期間FSH、LH均處于較低的水平，與魏學良等報道的產(chǎn)后2周前血清中LH濃度水平較低，3周后上揚，呈現(xiàn)出較劇烈的活動變化，而FSH的水平變化則是在產(chǎn)后12 d前處于較低水平基本一致[8-9]。原因可能是產(chǎn)后2周內促性腺激素釋放激素（GnRH）的釋放脈沖頻率尚未恢復，致使FSH、LH的水平較低；之后變化由于FSH、LH對GnRH的分泌反應不同所致。低頻率的GnRH可引起FSH的釋放，而只有當GnRH脈沖頻率達到1次/h才可會釋放LH[10]。A組經(jīng)過理囊散的處理后，10 d后卵巢開始活動，血清中FSH開始明顯逐漸上升，F(xiàn)SH在產(chǎn)后15、30 d達到最大值，分別為（11.07±4.93）、（13.49±5.73）ng/mL；血清中LH含量在產(chǎn)后15 d后開始逐漸上升，產(chǎn)后20 d后達到最大值，為（15.64±6.77） ng/mL。B組血清中FSH含量在產(chǎn)后15 d開始明顯逐漸上升，LH含量在20 d后才有上升趨勢，且FSH、LH含量明顯低于A組。說明理囊散不但可以提前刺激產(chǎn)后奶牛卵巢活動，而且可以提高奶牛FSH、LH的分泌水平。

3.1.2 處理組、對照組中P4、E2的變化情況 從圖5看出，P4在產(chǎn)后15 d內處于較低水平，產(chǎn)后20 d開始逐漸上升，產(chǎn)后25 d達到最大值，為（5.67±1.98） ng/mL，產(chǎn)后30 d達到最低值，產(chǎn)后35 d后趨于平穩(wěn)上升。由于P4是黃體與胎盤產(chǎn)生，分娩后孕酮由于妊娠黃體的退化而開始急劇下降，產(chǎn)后1 d左右降到基礎水平，此后一直到產(chǎn)后第1次排卵都維持在較低的水平，直到產(chǎn)后15 d開始有明顯的上升，產(chǎn)后25 d達到明顯的峰值，其原因是產(chǎn)后第1次發(fā)情排卵后，形成黃體，隨著黃體的逐漸發(fā)育，孕酮分泌亦隨著逐漸上升，最終其濃度達到峰值。產(chǎn)后35 d后A組比B組明顯趨于平穩(wěn)上升，經(jīng)直檢表明部分奶牛已受孕，卵巢上形成妊娠黃體，分泌孕酮水平增加，促使整體水平提高。從圖6中看出，A組經(jīng)理囊散處理，血清中E2含量不但在同一時期明顯比B組提高，而且分泌時間提前5 d。理囊散君藥為淫羊藿、補骨脂和益母草，起作用的主要成分有黃酮、生物堿等，植物黃酮又稱為植物激素，具有雌激素樣作用[11-13]，理囊散君藥淫羊藿的主要成分黃酮具有小劑量外源雌激素樣作用[14]，可能是促進和提高產(chǎn)后血清中E2分泌水平的機理之一。

3.2 理囊散對產(chǎn)后奶牛子宮復舊的治則

奶牛產(chǎn)后疾病的發(fā)生率很高，尤其是子宮疾病的發(fā)生，導致子宮恢復時間加長，從而阻礙奶牛受胎率，延長奶牛的產(chǎn)犢間隔。影響產(chǎn)后奶牛子宮機能恢復的因素復雜，其中卵巢對E2的分泌水平是最主要的因素之一。母畜的性周期變化受下丘腦-垂體-卵巢軸的調節(jié)，E2是這種調節(jié)系統(tǒng)中的關鍵激素[15]。E2可以增強子宮的收縮能力，有促進子宮復舊的作用；E2可以刺激子宮黏膜產(chǎn)生大量催產(chǎn)素受體，以利于催產(chǎn)素對子宮的收縮作用。據(jù)報道，卵巢切除的動物其子宮對催產(chǎn)素的敏感性很弱，而經(jīng)E2處理的子宮敏感性則很高，微量的催產(chǎn)素就能引起子宮肌有力地收縮，加強子宮早期恢復[16]。中獸醫(yī)理論又有腎主命門之火，腎虛則導致命門之火不足，從而引起全身陽氣衰弱[17]。生產(chǎn)中，母牛因產(chǎn)犢消耗較大，元氣損傷，腎氣虛衰，沖任不實，氣不能行血，致使氣血瘀滯，產(chǎn)后易發(fā)生淤血內阻的現(xiàn)象[18-19]。理囊散正是采用溫腎壯陽、益氣補血、活血祛瘀的治則，方中淫羊藿、陽起石、補骨脂、菟絲子具有補腎壯陽、祛風除濕、性辛甘溫，辛以潤腎、甘溫益陽氣的功能，當歸、赤芍、益母草具有補血活血、活血祛瘀、調沖任二脈的作用，枸杞子具有滋陰補腎，充沛精血的作用。理囊散不但能促進產(chǎn)后奶牛子宮惡露的排放、子宮形態(tài)的恢復，而且可促進機體內分泌水平的提高，故理囊散對產(chǎn)后奶牛子宮恢復起到了明顯的治療效果。endprint

3.3 結論

本試驗充分驗證了理囊散不但能加快產(chǎn)后奶牛子宮機能的恢復，同時可以有效地提高產(chǎn)后奶牛的受胎率，縮短產(chǎn)犢間距。試驗過程中，產(chǎn)后奶牛早期的受胎率不但受氣候、季節(jié)、管理、飼養(yǎng)水平對機體子宮機能恢復的影響，同時也受早期發(fā)情診斷和人工授精技術水平的影響，所以應加強對產(chǎn)后奶牛的管理、監(jiān)控和技術水平的提高。本研究的檢測指標較少，僅從理囊散對產(chǎn)后子宮形態(tài)、惡露排放、發(fā)情時間、受胎率和生殖激素水平解釋是不夠的，還應探討理囊散對產(chǎn)后子宮內膜變化和機體生化指標的影響，進一步解釋理囊散對產(chǎn)后子宮機能復舊的機理。

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