石 偉，鄭 華，蒙小云，夏代剛，李 青，池騰江

（深圳市農(nóng)牧實業(yè)有限公司，廣東 深圳 518023）

克隆豬在集約化豬場育成情況跟蹤觀察

石 偉，鄭 華*，蒙小云，夏代剛，李 青，池騰江

（深圳市農(nóng)牧實業(yè)有限公司，廣東 深圳 518023）

通過跟蹤觀察9窩45頭克隆豬從出生到育肥的死淘情況，探討克隆豬的存活力。結(jié)果表明，克隆豬死淘率太高，哺乳階段死淘率為48.89%（22/45），保育階段死淘率為43.48%（10/23），生長階段死淘率為30.77%（4/13），育肥階段死淘率為66.67%（6/9），全期死淘率高達93.33%（42/45）。臨床癥狀和病理剖解結(jié)果顯示，克隆豬死淘原因主要是抗病力差、普遍存在呼吸系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)障礙，與克隆豬心肺功能異常有關(guān)。

克隆豬；育成；集約化豬場

盡管體細胞克隆在許多動物上都獲得了成功，但同時也出現(xiàn)了一些問題。人們發(fā)現(xiàn)在獲得體細胞克隆動物的同時，克隆動物的出生率比正常受精動物的出生率低很多，而且在出生的克隆動物中，會發(fā)現(xiàn)一些異常的生理表型，其中包括出生時體質(zhì)量過重、胎盤過大、圍產(chǎn)期高死亡率、心肺功能不全、早衰等，因而克隆動物的健康安全性逐漸受到人們的普遍關(guān)注。陳會蘭（2012）[1]曾對克隆的巴馬小型豬和楓涇豬部分組織病理學和生理生化指標進行分析。張德福等（2013）[2]對克隆的巴馬小型豬主要性能指標進行了測定。目前，對杜洛克、長白和大白等外來品種的克隆豬的跟蹤觀察鮮有報道，本研究主要是觀察杜洛克克隆豬后代在集約化豬場育成情況，為克隆豬產(chǎn)業(yè)化提供參考。

1??材料與方法

1．1 試驗材料

選用深圳市農(nóng)牧實業(yè)有限公司遺傳指數(shù)高、生產(chǎn)性能好的杜洛克公豬作為供體，采用手工克隆技術(shù)建系和生產(chǎn)克隆胚胎。用手術(shù)法移植26頭受體母豬，結(jié)果分娩8窩、產(chǎn)41頭活仔豬；利用內(nèi)窺鏡法移植20頭受體母豬，結(jié)果分娩1窩、產(chǎn)4頭活仔豬。以這45頭克隆仔豬為試驗對象。

表1 克隆豬死淘情況跟蹤表

1．2 飼養(yǎng)管理

按深圳市農(nóng)牧實業(yè)有限公司飼養(yǎng)管理規(guī)程飼養(yǎng)，并考慮克隆仔豬相對普通仔豬而言體弱的特點，整個飼養(yǎng)管理規(guī)程更加精細，哺乳仔豬和保育豬溫濕度滿足生長發(fā)育要求，飼喂公司自己生產(chǎn)的全價配合料，自由采食，自由飲水。免疫和保健程序、衛(wèi)生和消毒程序等均嚴格按公司已有的程序執(zhí)行。

1．3 試驗方法

記錄豬只的死亡和淘汰情況，對部分死淘豬只進行解剖，分析其死因。

2??結(jié)果與分析

2．1 死淘結(jié)果

45頭克隆豬從出生到出欄的死淘情況跟蹤結(jié)果見表1。全期死淘42頭，僅育成3頭，全期育成率6.67%。分階段來看，哺乳階段死淘22頭，產(chǎn)房死淘率為48.89%（22/45）；保育階段死淘10頭，保育死淘率為43.48%（10/23）；生長階段死淘4頭，生長死淘率為30.77%（4/13）；育肥階段死淘6頭，育肥死淘率為66.67%（6/9）。

同期豬場的產(chǎn)房死淘率為5.60%，保育死淘率4.90%，生長死淘率1.5%，育肥死淘率1.2%，全期育成率為87.37%?？梢钥闯?，無論是哺乳階段、保育階段、生長階段，還是育肥階段，克隆豬的死淘率均明顯高于非克隆豬。

2．2 臨床癥狀及病理剖解

哺乳階段有3頭仔豬被母豬壓死，有8頭出現(xiàn)了黃白痢，發(fā)病豬多表現(xiàn)為眼瞼水腫、充血、毛糙、皮膚蒼白、消瘦等癥狀。病理剖解可見心臟肥大、腸腔充氣、腸系膜淋巴腫大、出血等病理變化。

保育階段發(fā)病死亡主要發(fā)生在調(diào)入保育舍后2～4周的時間段里，主要表現(xiàn)為消瘦、皮膚蒼白、喘氣、后肢關(guān)節(jié)腫大、有的出現(xiàn)腹瀉等癥狀，治療效果差。病理剖解可見下頜淋巴、腹股溝淋巴、肺門淋巴及腸系膜淋巴腫大、出血，肺臟粘連，有纖維性滲出物覆蓋，間質(zhì)性肺炎。

生長階段的4頭病死豬表現(xiàn)為生長不良、呼吸困難、淋巴結(jié)腫大。病理解剖可見肺臟腫脹，間質(zhì)增寬，全身淋巴結(jié)，特別是腹股溝、肺門和腸系膜淋巴結(jié)顯著腫大，切面為灰黃色，或有出血，脾臟腫脹，心臟冠狀溝有黃色膠凍樣物。

育肥階段有3頭豬為急性死亡，口鼻流出泡沫血性分泌物，懷疑死于傳染性胸膜肺炎；3頭豬為慢性消瘦性病癥導致死亡，表現(xiàn)為呼吸困難，常呆立或呈犬坐式，張口伸舌，咳喘，并腹式呼吸。病理剖解可見喉頭充滿血樣液體，雙側(cè)性肺炎，在心葉、尖葉和膈葉出現(xiàn)病灶，病灶區(qū)呈紫紅色，堅實，輪廓清晰，肺間質(zhì)積留血色膠樣液體。

3??討論

1）對飼養(yǎng)克隆豬的豬場的血清學調(diào)查和病原調(diào)查表明，該場為藍耳病病毒（以高致病性豬藍耳病病毒為主）和圓環(huán)病毒陽性場，但豬瘟、偽狂犬病均為陰性。克隆豬相對于同期飼養(yǎng)的非克隆豬而言，更易受到疫病影響造成死亡和淘汰，其抗病力不強。

2）死淘的克隆豬普遍存在呼吸系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)障礙，病理剖解結(jié)果表明，克隆豬的高死淘率與其心肺功能異常有關(guān)，而研究人員經(jīng)常在克隆動物身上發(fā)現(xiàn)肺臟的異常。Hill 等（1999）[3]報道生產(chǎn)的13頭克隆牛，4頭牛胎在出生前流產(chǎn)，3頭在出生時或出生后死亡，大部分死亡克隆牛發(fā)現(xiàn)肺臟畸形。李世杰（2004）[4]在9頭新生死亡克隆牛的研究中也發(fā)現(xiàn)，有7頭克隆牛表現(xiàn)出肺臟的發(fā)育異常。

3）克隆豬要真正實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，不僅僅要能克隆出來，還要能存活，且生長發(fā)育要正常，繁殖性能也要正常。本試驗中克隆豬死淘率較高，也有可能是在克隆過程中某些技術(shù)環(huán)節(jié)出現(xiàn)了問題，還需要更加深入研究來解決。

[1] 陳會蘭. 克隆豬部分組織病理學及生理生化指標分析[D]. 上海：上海海洋大學，2012.

[2] 張德福，陳會蘭，顧曉龍，等. 體細胞克隆小型豬主要性能指標的測定[J].中國獸醫(yī)學報， 2013，33（3）：462-465

[3] Hill J R， Roussel A J， Cibelli J B， et al. Clinical and pathologic features of cloned transgenic calves and fetusess(13 case studies)[J]. Theriogenology， 1999(51)：1451-1465.

[4] 李世杰.發(fā)育相關(guān)基因在新生死亡體細胞克隆牛中的表達[D]. 北京：中國農(nóng)業(yè)大學， 2004.

2014-11-13）

深圳市科技計劃項目（編號：JSA200904011807A）。

*通訊作者：鄭華（1973—），男，高級畜牧師，主要從事豬的育種、生產(chǎn)和經(jīng)營管理。E-mail: sznmzhenghua@126.com