李再友，程順財，范吉平

（1.四川省榮縣古文鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，四川 榮縣 643107；2.四川省榮縣過水鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，四川 榮縣 643107）

近年來，高致病性禽流感對我國禽類養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的損失，也對人類健康造成了極大的威脅。因此，我國已將其列入I類烈性傳染病。免疫接種是當前防控該疫病的有效措施。禽流感病毒（AIV）是該病主要的致病原，屬正粘病毒科，流感病毒屬[1]。隨著AIV的不斷變異，現(xiàn)已形成了160多種亞型，目前還尚未找到有效的預防性免疫接種辦法來顯著降低禽流感的病死率。因此，本研究用H5N1 Re-1株與rL-H5株進行免疫試驗，觀察H5N1 Re-1株的免疫效果，以期為養(yǎng)殖生產提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 從同一肉雞場中選擇300只肉雞進行試驗，肉雞品種與批次均相同。

1.2 疫苗 本次試驗所用的重組禽流感滅活疫苗（H5N1 Re-1株）由遼寧一公司生產，禽流感-新城疫重組二聯(lián)活疫苗（rL-H5株）由廣東肇慶公司生產。

1.3 試驗方法 將肉雞隨機分為A、B、C三組（100只/組），從每組選取 20只，分別在 1、5、10日齡檢測母源抗體水平。然后分別作如下處理：

A組：10日齡接種重組禽流感滅活疫苗（Re-1株），隨后在 10、20、25、30、45、55、65 日齡隨機選擇 20 只檢測抗體水平；B組：10日齡時接種禽流感-新城疫重組二聯(lián)活疫苗（rL-H5 株），隨后在 10、20、25、30、45、55、65日齡隨機選擇20只檢測抗體水平；C組：不接種上述疫苗，作為空白對照。

1.4 HI抗體效價檢測 根據《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T 18936-2003）中關于血凝抑制試驗（HI）評價禽類HI抗體水平的相關規(guī)定操作。運用t檢驗對所得數據進行統(tǒng)計分析。

2 結果

三組母源抗體平均水平與接種疫苗后的抗體水平見表1。

表1 三組母源抗體與免疫后抗體的平均水平 log2

三組肉雞在1、5、10日齡時的母源抗體水平基本一致，直到20日齡母源抗體降至0。試驗A組在10日齡免疫，15d后生效（即25日齡），隨后抗體水平慢慢升高，45日齡時達到最大值8.0log2，高抗體滴度持續(xù)20d左右，隨后慢慢降低。A組兩月齡肉雞的抗體水平約為4log2。

B組也在10日齡免疫，疫苗為rL-H5株，15d后開始生效，隨后抗體水平慢慢升高，35 d（即45日齡）后達到最大值7.2log2，高抗體滴度保持15 d左右，然后慢慢降低。B組兩月齡肉雞的抗體水平約為4log2。

3 討論

禽流感是由AIV造成的一種高致病性禽類傳染病，具有極大的危害性。目前，世界動物衛(wèi)生組織（OIE）已將其劃入A類動物疫病，我國也將其作為I類動物疫病[2]。根據病毒表面糖蛋白血凝素蛋白（HA）與神經氨基酸酶(NA)的抗原組合，可將禽流感病毒分為多種亞型：H有16種，分別為H1～H16；N有10種，分別是N1～N10。二者組合在一起可形成160種亞型。根據臨床研究發(fā)現(xiàn)，最常見的禽流感病毒是H5N1與H9N2兩個亞型[3]。由于該病毒具有變異性的特點，目前尚未找到一種切實可行的防控措施來減小禽流感的危害。盡管經過多年的研究與實踐，已研制出多種疫苗，但不同廠家生產的疫苗，其效果參差不齊。因此，為了更好地防控禽流感，筆者開展了本次試驗。

試驗結果顯示，1日齡肉雞體內的母源抗體處于較高水平，但隨著日齡增加，抗體逐漸減少，直到20日齡時母源抗體降為0。由于10日齡時母源抗體水平在4 log2以下（4log2是農業(yè)部要求的有效抗體滴度），因此，筆者將10日齡作為首免時間。禽流感-新城疫重組二聯(lián)活疫苗（rL-H5株）包括很多疫苗成分，可極大地節(jié)約疫苗成本與勞力成本，還能減少免疫應激。但就免疫效果來說，該疫苗效果遠低于重組禽流感滅活疫苗（Re-1株）。本次研究結果證實，重組禽流感H5N1滅活疫苗的免疫原性良好，肉雞在免疫35 d后抗體水平達到最大值，同時，也未發(fā)現(xiàn)明顯的不良反應。因此，筆者建議在家禽養(yǎng)殖生產中選擇重組禽流感病毒滅活疫苗進行預防接種。另外，為刺激機體生成相關抗體或使抗體保持在有效范圍內，應在恰當的時機進行加強免疫，以鞏固免疫效果?？啥ㄆ跈z測養(yǎng)雞場內的禽流感抗體平均水平，以確定最佳免疫時機。由于疫苗生產廠家不同，同一疫苗的免疫效果也有一定的差異，因此，免疫流程應嚴格按照各廠家的疫苗說明書進行，不能一成不變。

[1] 孫建宏，劉景利，胡井雷，等.重組禽流感滅活苗和禽流感滅活苗對雞免疫效果的觀察[J].動物醫(yī)學進展，2006，27（11）：80-83.

[2] 許崇現(xiàn)，蔡聯(lián)喜，李國進，等.重組禽流感滅活疫苗(（H5N1，Re-1株）免疫效果比較試驗[J].中國畜牧獸醫(yī)，2008，35（2）：96-97.

[3] 陳建祥，袁金錢，孫勇艇，等.重組禽流感病毒H5亞型二價滅活苗（H5Nl，Re-5株+Re-4株）的免疫效果評價[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2009，13（5）：3-4.