李 波 郭菊玲

（玉溪市食品藥品檢驗(yàn)所 云南 玉溪 653100）

滇雞血藤為木蘭科植物內(nèi)南五味子Kadsura interior A.C. Smith的干燥藤莖，是一種臨床上常用的中藥材。此藥主要在秋季采收，經(jīng)去枝葉、切片、曬干后即可入藥。滇雞血藤具有活血補(bǔ)血、調(diào)經(jīng)止痛、舒筋通絡(luò)的作用，常用于治療月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、肢體麻木癱瘓、風(fēng)濕痹痛及氣血虛弱諸癥[1]。中成藥復(fù)方滇雞血藤膏具有活血養(yǎng)血、益腎的功效，其君藥即為滇雞血藤[2]。滇雞血藤的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)被載于2015年版《中國(guó)藥典》中。在該標(biāo)準(zhǔn)中，異型南五味子丁素是鑒別滇雞血藤藥材及對(duì)此藥進(jìn)行有效成分含量測(cè)定的重要指標(biāo)。本文主要分析滇雞血藤莖的韌皮部、木質(zhì)部、髓部中異型南五味子丁素含量的差異性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 儀器與試藥

Agilent1260高效液相色譜儀；Agilent Extend-C18（4.6mm×150mm，5μm)色譜柱；賽多利斯BP211D-OCE電子天平；異型南五味子丁素（作為對(duì)照品，中國(guó)食品藥品檢定研究院提供，批號(hào)為111801-201201，供含量測(cè)定用，純度為97.6%）；滇雞血藤藥材（做為供試品，為直徑在5-12cm的未切片藤莖，某藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)）；甲醇、乙腈的純度為色譜純，水為超純水，其余試劑的純度為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 采用薄層色譜法對(duì)供試品進(jìn)行鑒別試驗(yàn) 分別取供試品韌皮部、木質(zhì)部、髓部的粉末狀樣品0.5g，加入10ml的環(huán)己烷，進(jìn)行30分鐘的超聲處理，過濾，將濾液蒸干，在殘?jiān)屑尤氕h(huán)己烷0.5ml使其溶解，將獲得的溶液作為供試品溶液。取異型南五味子丁素對(duì)照品，加入環(huán)己烷制成1mg/1ml的溶液，將其作為對(duì)照品溶液。采用薄層色譜法進(jìn)行測(cè)定：吸取上述的兩種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(2：1)作為展開劑進(jìn)行展開，然后取出晾干，置于紫外光燈(254nm)下進(jìn)行檢視。檢測(cè)結(jié)果顯示，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，供試品三個(gè)部位的色譜分別顯示出相同顏色的斑點(diǎn)。在相同取樣量與點(diǎn)樣量的條件下，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的供試品韌皮部斑點(diǎn)顏色較深，而供試品木質(zhì)部與髓部斑點(diǎn)的顏色逐漸變淺。結(jié)果見圖1。

圖1 供試品三個(gè)部位與對(duì)照品的薄層色譜圖

2.2 對(duì)供試品中異型南五味子丁素的含量進(jìn)行測(cè)定除在制備供試品溶液時(shí)分別取供試品韌皮部、木質(zhì)部、髓部的粉末（過三號(hào)篩）0.5g外，均按照《中國(guó)藥典》2015年版一部滇雞血藤藥材[含量測(cè)定]項(xiàng)下記錄的方法進(jìn)行供試品溶液含量的測(cè)定。

2.2.1 供試品的色譜條件 色譜柱為Agilent Extend-C18（4.6mm×150mm，5μm)；流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水(10：48：42)；流量為1.0mL?min-1；柱溫為30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm；進(jìn)樣量為10μL。理論板數(shù)按異型南五味子丁素峰的計(jì)算應(yīng)不低于8000。

2.2.2 供試品與對(duì)照品溶液的制備

2.2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取10.13mg的對(duì)照品置于10mL的容量瓶中用甲醇稀釋至刻度線，再精密量取該溶液3mL，置于100mL的容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度線，搖勻即得（每1mL該溶液中含異型南五味子丁素29.7μg）。

2.2.2.2 供試品溶液的制備 分別取供試品韌皮部、木質(zhì)部、髓部的粉末（過三號(hào)篩）約0.5g，進(jìn)行精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加入環(huán)己烷50ml，稱定重量，進(jìn)行超聲處理(功率為360W，頻率為40kHz)50分鐘，放冷，再稱定重量，用環(huán)己烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度線，搖勻、過濾即得。

2.2.3 供試品三個(gè)部位中異型南五味子丁素含量的測(cè)定分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品三個(gè)部位的供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定。按干燥品計(jì)算，供試品中所含的異型南五味子丁素(C27H30O8)不得少于0.050%。檢測(cè)結(jié)果顯示，滇雞血藤的韌皮部中異型南五味子丁素的含量為0.162%、其木質(zhì)部中異型南五味子丁素的含量為0.116%、其髓部中異型南五味子丁素的含量為0.083%。詳情見表1：

表1 供試品三個(gè)部位中異型南五味子丁素的含量分析

3 討論

從本研究獲得的薄層色譜圖中可以看出，在相同取樣量與點(diǎn)樣量的條件下，與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的供試品韌皮部斑點(diǎn)的顏色要深一些，幾乎和對(duì)照品斑點(diǎn)的顏色一樣深。而與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)的供試品木質(zhì)部斑點(diǎn)、髓部斑點(diǎn)的顏色逐漸變淺。這一現(xiàn)象在使用液相色譜法對(duì)供試品相應(yīng)部位進(jìn)行異型南五味子丁素的含量檢測(cè)時(shí)得到充分的印證。

本次試驗(yàn)的結(jié)果表明，采用薄層色譜法對(duì)滇雞血藤中所含的異型南五味子丁素進(jìn)行檢測(cè)可初步判斷其含量。在滇雞血藤的不同部位（韌皮部、木質(zhì)部、髓部）中，異型南五味子丁素的含量各不相同。在對(duì)滇雞血藤進(jìn)行異型南五味子丁素含量的檢測(cè)時(shí)應(yīng)保證其取樣部位的均一性，避免因取樣的部位不同而使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)誤差。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015:362.