·論著·

肝細(xì)胞癌病變肝臟血管鑄型標(biāo)本的制作及意義

張文輝,莫木瓊,聶釗銘,鐘覺(jué)民,羅燦嶠

(中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院,廣州510085)

摘要：目的制作有肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本，為科研和教學(xué)了解肝細(xì)胞癌的生長(zhǎng)提供形態(tài)學(xué)依據(jù)。方法將肝細(xì)胞癌患者手術(shù)切除的新鮮成人肝組織用10%醋酸生理鹽水插管沖洗，徹底去除肝臟血管內(nèi)的血液，分別用混合紅色、藍(lán)色和黃色油畫(huà)顏料的過(guò)氯乙烯-自凝牙托粉材料填充劑依次灌注肝固有動(dòng)脈、肝門(mén)靜脈和肝靜脈，通過(guò)聚合反應(yīng)塑化成型，經(jīng)插管→灌注→腐蝕→沖洗→修整→裝瓶密封,制成有肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本進(jìn)行觀察。結(jié)果肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本能清晰顯示肝門(mén)靜脈、肝動(dòng)脈、肝靜脈、肝腫瘤及其周?chē)芊植?。顯示的血管充盈飽滿，粗細(xì)、疏密合理，色澤鮮艷，立體感強(qiáng)，精致美觀。結(jié)論 肝細(xì)胞癌病變的肝臟可制成血管鑄型標(biāo)本，制成的標(biāo)本能直觀顯示肝細(xì)胞癌病變的肝臟內(nèi)血管、腫瘤區(qū)域及其周?chē)芊植肌?/p>

關(guān)鍵詞：肝腫瘤；血管；鑄型；標(biāo)本

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.45.001

中圖分類(lèi)號(hào)：R735.7文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)青年

作者簡(jiǎn)介：第一 張文輝(1980-)，男，技師，主要研究方向?yàn)椴±斫馄始夹g(shù)與組織模型制作。E-mail:448596761@qq.com

作者簡(jiǎn)介：通信羅燦嶠(1971-)，男，副主任技師，主要研究方向?yàn)椴±斫馄始夹g(shù)與組織模型制作。E-mail:13650832351@163.com

收稿日期：(2015-07-11)

Preparation of vascular corrosion casting mould specimen of liver

with tumor and its clinical significance

ZHANGWen-hui,MOMu-qiong,NIEZhao-ming,ZHONGJue-min,LUOCan-qiao

(TheFirstAffiliatedHospitalofSunYat-SenUniversity,Guangzhou510085,China)

Abstract:ObjectiveTo prepare the vascular corrosion casting mould specimen of liver with hepatocellular carcinoma and to provide reliable morphological evidence for clinical activity, teaching and scientific research of liver tumor. MethodsA fresh hepatocellular carcinoma specimen obtained by surgical resection was injected with 10% acetic acid saline to thoroughly remove blood within the liver. Then the hepatic artery, hepatic portal vein and hepatic vein were perfused with mixtures of perchlorovinyl resin and polymethyl methacrylate resin with red, blue and yellow coloring agent, respectively. Vascular corrosion casting mould specimen of the liver with primary tumor was obtained by intubation, perfusion, corrosion, flushing, trimming and sealing to the container. ResultsThe method could clearly showed the hepatic artery, hepatic portal vein and hepatic venous system and the distribution of blood vessels in and around the tumor area. The vessels were full filling, in reasonable size and density. Meanwhile, they had bright color, a great three-dimensional sense with delicacy. ConclusionThe specimen of hepatocellular carcinoma can be made into vascular corrosion casting mould and this method can display its blood vessel, tumor and peripheral vascular distribution.

Key words: liver neoplasms; blood vessels; casting mould; specimen

血管鑄型法是通過(guò)向器官的某些血管灌注可塑材料,使其在血管腔內(nèi)塑化成型,然后用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或自然腐蝕等方法,將器官的其他組織除去,保留器官血管的形態(tài)和分布的器官模型制作方法。血管鑄型標(biāo)本在顯示器官內(nèi)部血管方面有獨(dú)到之處。肝臟血管鑄型標(biāo)本能清晰地顯示肝門(mén)靜脈、肝動(dòng)脈和肝靜脈的形態(tài)、位置及之間的相互關(guān)系。但目前尚無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道肝細(xì)胞癌病變肝臟血管鑄型標(biāo)本的制作。2013年6月～2015年6月，我們采用有肝細(xì)胞癌病變的肝臟制成血管鑄型標(biāo)本，了解肝內(nèi)血管和腫瘤區(qū)域及腫瘤周?chē)艿姆植记闆r，為臨床、科研和教學(xué)提供可靠的形態(tài)學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料手術(shù)切除的新鮮完整成人肝臟1個(gè)，CT定出腫瘤位置，細(xì)針穿刺活檢，病理學(xué)檢查證實(shí)為肝細(xì)胞癌。肝臟的使用經(jīng)中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者簽署知情同意書(shū)，對(duì)其手術(shù)切除的肝組織使用和用途無(wú)異議。乙酸乙酯、鄰苯二甲酸二丁酯購(gòu)自天津市富宇精細(xì)化工有限公司；過(guò)氯乙烯、鹽酸購(gòu)自廣州化學(xué)試劑一廠；自凝牙托粉、自凝牙托水購(gòu)自上海新世紀(jì)牙科材料有限公司；黃色、藍(lán)色和紅色油畫(huà)顏料購(gòu)自上海實(shí)業(yè)馬利有限公司。特制玻璃插管3支，止血鉗數(shù)把，手術(shù)剪刀數(shù)把，帶蓋塑料桶2個(gè)，搪瓷大托盤(pán)1個(gè)，特制密封有機(jī)玻璃容器1個(gè)。

參考文獻(xiàn)1.2肝動(dòng)脈、肝門(mén)靜脈及肝靜脈填充劑的調(diào)配[1]方法，將20 g過(guò)氯乙烯充分溶解于100 mL乙酸乙酯中，再加入3 mL增塑劑，充分混合，加入5 mL的紅色油畫(huà)顏料。將上述物質(zhì)均勻調(diào)和，充分溶解后備用作肝動(dòng)脈填充劑。將70 g自凝牙托粉溶于70 mL的自凝牙托水中，再加入25 mL鄰苯二甲酸二丁酯和5 mL的黃色油畫(huà)顏料，將上述物質(zhì)均勻調(diào)和，充分溶解后備用作肝門(mén)靜脈填充劑。將80 g自凝牙托粉溶于80 mL自凝牙托水中，再加入25 mL鄰苯二甲酸二丁酯和5 mL的藍(lán)色油畫(huà)顏料，將上述物質(zhì)均勻調(diào)和，充分溶解后備用做肝靜脈填充劑。

1.3肝動(dòng)脈、肝門(mén)靜脈及肝靜脈填充劑的灌注填充劑充分?jǐn)嚢杈鶆蚝罅⒓垂嘧?。根?jù)不同的臟器和灌注目的不同，選擇不同的灌注顏色和灌注量；灌注量的多少會(huì)影響臟器血管枝干的疏密。本實(shí)驗(yàn)肝動(dòng)脈填充紅色填充劑60 mL，肝靜脈填充藍(lán)色填充劑100 mL，肝門(mén)靜脈填充黃色填充劑90 mL。①插管：將肝臟的表面和大血管腔充分沖洗干凈,灌注前，徹底去除血管內(nèi)的血液和水分，保證鑄型效果。分離出肝門(mén)靜脈、肝動(dòng)脈和肝靜脈開(kāi)口，插上大小相適應(yīng)的與管腔相配的特制玻璃管，膽道不予插管。②灌注：插管固定后，將肝臟放入注滿水的塑料桶中，用紗布將肝托起，并將紗布固定于塑料桶邊緣，使肝臟漂浮于水中，借助水的浮力，防止肝臟受壓變形。然后用50 mL的注射器將調(diào)配好的黏稠度適宜的混有紅色油畫(huà)顏料的過(guò)氯乙烯-自凝牙托粉材料填充劑灌注到肝動(dòng)脈。灌注時(shí)，壓力要適中，保證填充劑在管道內(nèi)的移動(dòng)和滲透速度，隔4 h補(bǔ)注1次，共2次。同時(shí)用10%的中性甲醛水溶液灌注門(mén)靜脈、肝靜脈，直至肝臟由軟到硬、由紅褐色變?yōu)榛野咨珵橹埂? d后，再用混有藍(lán)色油畫(huà)顏料的過(guò)氯乙烯-自凝牙托粉材料的填充劑灌注肝靜脈，用混有黃色油畫(huà)顏料的過(guò)氯乙烯-自凝牙托粉材料的填充劑灌注門(mén)靜脈，灌注壓力足以讓肝臟表面飽滿即可。灌注完畢后，將肝臟放置清水中浸泡24 h以上，讓填充劑充分吸水反應(yīng)凝固。牙托粉凝固需1～2 h，過(guò)氯乙烯凝固則需24 h以上。

1.4腐蝕、沖洗將灌注好的肝臟放入盛有足量25%鹽酸的塑料桶中加蓋腐蝕，1周后取出，自來(lái)水充分沖洗，徹底沖洗干凈黏附于血管枝上的殘余肝組織。沖洗時(shí)，按鑄型標(biāo)本血管支的粗細(xì)程度調(diào)節(jié)水壓，將黏附于血管枝上的殘余組織沖洗干凈。如果未腐蝕徹底，可將其重新浸入或更換新的鹽酸液再浸泡→腐蝕→沖洗，沖洗與腐蝕可交替進(jìn)行，徹底將其他組織腐蝕沖洗干凈。腐蝕和移動(dòng)的過(guò)程動(dòng)作要輕柔，以免將肝臟鑄型標(biāo)本的管腔枝扯斷。腐蝕、沖洗完畢后，用肥皂水浸泡鑄型標(biāo)本48 h以上，然后再用自來(lái)水充分泡洗，防止鑄型標(biāo)本變脆和變色。

1.5修整鑄型標(biāo)本沖洗完畢后要修整，用酒精燈燒熱鑷子或用剪刀剔除從破漏部位漏出的填充劑凝塊。鑄型標(biāo)本修整的好壞直接影響其外觀和質(zhì)量。

1.6封裝 修整完畢后，根據(jù)鑄型標(biāo)本的外形和尺寸大小，制作合適的有機(jī)玻璃容器，待標(biāo)本干燥固定成型后，移入有機(jī)玻璃容器中適當(dāng)固定，用10%的甲醛水(蒸餾水配制)溶液注滿容器，最后封口密封。

2結(jié)果

2.1肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本形態(tài) 制成的肝臟血管鑄型標(biāo)本血管充盈飽滿，粗細(xì)、疏密合理，色澤鮮艷，立體感強(qiáng)，精致美觀，可直觀顯示腫瘤病變的肝組織內(nèi)血管分布和肝腫瘤區(qū)域及腫瘤周?chē)艿姆植?。制成的有肝?xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本見(jiàn)圖1，圖中清晰可見(jiàn)肝靜脈、門(mén)靜脈、肝動(dòng)脈。肝右葉下段可見(jiàn)2 cm×2 cm×1 cm,右葉上段2 cm×1 cm×1 cm、左葉內(nèi)段1 cm×1 cm×1 cm大小紅色結(jié)節(jié)，是肝腫瘤病變區(qū)域；肝右葉下段可見(jiàn)兩粗大的肝靜脈吻合支，肝靜脈間在肝內(nèi)存在部分細(xì)小的交通支實(shí)屬正常，但本例如此粗大的交通支較罕見(jiàn)。

2.2肝腫瘤穿刺活檢、HE染色結(jié)果 CT定位，細(xì)針穿刺活檢，HE染色，400倍鏡下見(jiàn)肝細(xì)胞彌漫水樣變性，部分脂肪變性，部分肝細(xì)胞層次增多，細(xì)胞極具明顯的異型性，細(xì)胞核增大、深染。病理學(xué)檢查證實(shí)為肝細(xì)胞癌，見(jiàn)圖2。

圖1　有肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本

圖2　肝腫瘤穿刺活檢、HE染色結(jié)果(×400)

3討論

近年來(lái)，由于科學(xué)技術(shù)的高速發(fā)展,出現(xiàn)了數(shù)字減影血管造影技術(shù)及精確的腫瘤定位技術(shù)， 組織器官血管的三維立體重建技術(shù)水平不斷提高，人們對(duì)組織器官的血管分布及腫瘤的研究更加方便。但這些技術(shù)不可能完全取代組織及器官血管鑄型技術(shù)，組織及器官血管鑄型技術(shù)經(jīng)40多年發(fā)展,已臻完善和成熟,其可更加直觀地顯示有肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管和腫瘤區(qū)域及腫瘤周?chē)难?。為肝?xì)胞癌病變的教學(xué)和科學(xué)研究提供可靠的、直觀的形態(tài)學(xué)依據(jù)。血管鑄型標(biāo)本在顯示器官內(nèi)部血管方面有獨(dú)到之處[2]。

本實(shí)驗(yàn)利用過(guò)氯乙烯-自凝牙托材料填充劑快速成型灌注術(shù)，經(jīng)插管→灌注→腐蝕→沖洗→修整→裝瓶密封制成的有肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本，能清晰顯示肝靜脈、門(mén)靜脈、肝動(dòng)脈、肝細(xì)胞癌病變區(qū)域。肝細(xì)胞癌病變肝臟血管鑄型標(biāo)本的質(zhì)地、彈性、顏色、光澤度等均達(dá)到理想效果。過(guò)氯乙烯-自凝牙托材料填充劑為一次性快速成型鑄型劑，配制和灌注要及時(shí)快速，保證鑄型效果[3]。肝細(xì)胞癌血管分布稠密、管徑細(xì)小，彎曲成團(tuán)，灌注難度大，必須控制好填充劑的黏稠度和灌注量及填充時(shí)的灌注壓力，保證灌注效果。鑄型前，根據(jù)CT影像所示，用細(xì)針穿刺肝組織條進(jìn)行病理檢查，以明確腫瘤組織的性質(zhì)，并測(cè)量腫瘤大小。制成有肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本的右葉下段可見(jiàn)2 cm×2 cm×1 cm,右葉上段2 cm×1 cm×1 cm、左葉內(nèi)段1 cm×1 cm×1 cm大小的紅色球狀血管球，是肝腫瘤病變區(qū)域，與CT影像所示的結(jié)果相符。

近年來(lái)，鑄型標(biāo)本與教學(xué)、科研的結(jié)合越來(lái)越緊密，是分析和研究臨床影像學(xué)的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)，亦是介入和手術(shù)治療的形態(tài)學(xué)依據(jù)。利用有肝細(xì)胞癌病變的肝臟制成血管鑄型標(biāo)本可直觀顯示肝腫瘤病變區(qū)域，了解肝臟腫瘤旁的血管形態(tài)、位置及其關(guān)系，為基礎(chǔ)研究、模擬手術(shù)和手術(shù)創(chuàng)新提供直觀的形態(tài)學(xué)依據(jù)。血管鑄型標(biāo)本更能顯示器官內(nèi)部動(dòng)脈、靜脈管道的走向。為介入治療、手術(shù)切除腫瘤、血管疾病治療奠定形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)和解剖學(xué)基礎(chǔ)[4]。本實(shí)驗(yàn)突破制作血管鑄型標(biāo)本的器官必須是沒(méi)有經(jīng)過(guò)手術(shù)治療、沒(méi)有腫瘤包塊和潰瘍[5]的器官限制，填補(bǔ)了人體解剖學(xué)領(lǐng)域中經(jīng)過(guò)手術(shù)治療的、有腫瘤包塊或有潰瘍的病變器官血管鑄型標(biāo)本的空白。肝動(dòng)脈和腫瘤血管非常豐富，其分支管壁厚，管腔小，不易變形，在灌注時(shí)，必須選擇流動(dòng)性較好、凝結(jié)較慢的揮發(fā)性過(guò)氯乙烯填充劑，減少補(bǔ)注的次數(shù)；肝靜脈和門(mén)靜脈管壁薄、管腔大，易變形，宜選用凝結(jié)快、收縮率低、一次化學(xué)反應(yīng)成型的自凝牙托材料的填充劑,使肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本的制作取得良好效果[6]。在肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本的制作過(guò)程中，維持肝臟的自然形態(tài)和充分的硬固塑型和腐蝕,是制作優(yōu)質(zhì)肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本關(guān)鍵。

肝臟是實(shí)質(zhì)性器官，血管豐富而纖細(xì)，硬固塑型慢，灌注后，應(yīng)充分放置使填充劑硬固再腐蝕，避免肝臟血管鑄型標(biāo)本的血管由于纖細(xì)和硬固塑型不充分而柔軟無(wú)力，同時(shí),腐蝕的過(guò)程中產(chǎn)生的熱量亦會(huì)將未反應(yīng)硬化的血管枝軟化或腐蝕。因此，選用氯乙烯作填充劑，使血管末梢更具柔韌性，血管末梢不易折斷[7]。柔韌性差的自凝牙托材料，易造成細(xì)小血管枝折斷[8]。但在自凝牙托材料中加人鄰苯二甲酸二丁醋能增加其柔韌性, 使自凝牙托材料填充塑型效果更好,且一次灌注即可成型,成型后血管充盈飽滿,精細(xì)美觀[9]。肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本不僅提供三維立體構(gòu)筑的血管模型，還為肝腫瘤血管分布研究、三維手術(shù)等提供技術(shù)支持，具有極高的臨床應(yīng)用價(jià)值[10]。本實(shí)驗(yàn)制成的肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本中有三處紅色結(jié)節(jié)狀小血管團(tuán)，為腫瘤結(jié)節(jié)。肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本可全面顯示肝臟腫瘤病變的位置和大小，標(biāo)本顏色絢麗多彩，富立體感，血管枝干飽滿，粗細(xì)、疏密合理，各血管的結(jié)構(gòu)、層次，清晰可辨，能立體地、直觀地觀察到肝的腫瘤病變的部位和血管特征。肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本的血管枝是塑料材料構(gòu)成，標(biāo)本裝瓶密封后，經(jīng)多年10%甲醛水溶液浸泡保存亦能保持色彩鮮艷，不褪色，不變形。本實(shí)驗(yàn)制作的肝細(xì)胞癌病變的肝臟血管鑄型標(biāo)本制作技術(shù)適用于其他器官的血管鑄型標(biāo)本制作。肝細(xì)胞癌血管鑄型標(biāo)本為教學(xué)、科研和臨床研究肝臟管道結(jié)構(gòu)和肝臟解剖結(jié)構(gòu)提供依據(jù)，為肝臟外科學(xué)的發(fā)展提供巨大幫助，許多復(fù)雜性肝腫瘤患者獲得手術(shù)治療的機(jī)會(huì)[11]。

綜上所述，肝細(xì)胞癌病變的肝臟可制成血管鑄型標(biāo)本，制成的標(biāo)本能直觀顯示肝細(xì)胞癌病變的肝臟內(nèi)血管、腫瘤區(qū)域及其周?chē)芊植肌?/p>

參考文獻(xiàn)：

[1] 洪輝文,李澤宇,吳坤成,等.肝內(nèi)膽道鑄型的設(shè)計(jì)改進(jìn)[J].中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志,2007,25(1):109.

[2] 石瑾,李忠華.自凝牙托材料在管道鑄型中的應(yīng)用及其前景[J].中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志,2013,31(4):1-3.

[3] 劉信飛，石小田，張顯芳，等.快簡(jiǎn)有效研制全身骨關(guān)節(jié)血管鑄型[J].四川解剖學(xué)雜志，2013，21(3)：62-63.

[4] 洪輝文，石小田，李澤宇，等.局部堿腐蝕法制作肝段管道鑄型標(biāo)本[J].解剖學(xué)雜志，2007，30(4)：509-510.

[5] 劉寧，王可人，孫光，等.人體管道鑄型標(biāo)本制作技術(shù)的研究進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，31(2):317-318.

[6] 李澤宇,吳坤成,劉暢,等.過(guò)氯乙烯和牙托材料的混合填充劑在鑄型標(biāo)本中的應(yīng)用[J].解剖學(xué)雜志,2008,31(2):252-253.

[7] 黃海龍，陳勇，劉斌，等.嬰兒頭頸部動(dòng)脈鑄型標(biāo)本制作[J].解剖學(xué)雜志，2005,28(3):365.

[8] 郭興，易德保，張偉，等.人體全身動(dòng)脈血管鑄型標(biāo)本制作技術(shù)研究[J].解剖與臨床，2007，12(3)：212.

[9] 靳國(guó)華,馬新偉,戴波,等.用管道鑄型技術(shù)顯示灘羊肝臟的方法[J].中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志,2013,31(4):19-20.

[10] 黃海龍，楊海敏，楊廉柏，等.環(huán)保型人體管道鑄型填充劑的實(shí)驗(yàn)研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012，12(4)：652-655.

[11] 方馳華,鐘世鎮(zhèn),昊坤成,等.MRI,CT 三維重建肝臟管道系統(tǒng)的灌注和鑄型的建模[J].世界華人消化雜志,2004,12(1):216-217.