雙烏鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)大鼠臟器系數(shù)的影響※

呂宏迪郝少君溫中華張正臣△

(中國(guó)人民解放軍第三七一醫(yī)院藥械科，河南新鄉(xiāng)453000)

【摘要】目的觀察雙烏鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)大鼠臟器系數(shù)的影響。方法取SD大鼠80只，按體質(zhì)量分層隨機(jī)分為4組，即正常對(duì)照組，雙烏鎮(zhèn)痛膠囊大、中、小劑量組，每組各20只。雙烏鎮(zhèn)痛膠囊大、中、小劑量(劑量分別為3.0、0.9、0.24 g/kg體質(zhì)量，分別相當(dāng)于生藥17.4、5.2、1.4 g/kg體質(zhì)量)組予相應(yīng)藥液10 mL/kg體質(zhì)量灌胃給藥，正常對(duì)照組予等容積0.9%氯化鈉注射液灌胃給藥，均每日1次，每周給藥6 d，連續(xù)3個(gè)月。給藥3個(gè)月后、停藥2周后各組大鼠分期處死，觀察各臟器系數(shù)變化。結(jié)果給藥3個(gè)月后、停藥2周后雙烏鎮(zhèn)痛膠囊大、中、小劑量組大鼠各臟器系數(shù)與正常對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，組織學(xué)檢查也均未發(fā)現(xiàn)異常。結(jié)論雙烏鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)大鼠未見(jiàn)明顯蓄積毒性，在臨床劑量下應(yīng)用是安全的。

【關(guān)鍵詞】川烏頭；草烏頭；藥物毒性；毒性試驗(yàn)，慢性；實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物；大鼠

doi：10.3969/j.issn.1002-2619.2015.01.026

【中圖分類(lèi)號(hào)】R285.5；R994.13；R283.65

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1002-2619(2015)01-0067-03

Abstract【】Objective To investigate the effects of Shuangwu Zhentong Capsule on the organ coefficient of rats.Methods 80 SD rats according to the body quality of stratification were divided into normal control group，Shuangwu Zhentong Capsule high-，middle-，low-dose group (3.0，0.9，0.24 g/kg body mass)，the oral route of administration were given for 1 times a day，according to the 10 mL/kg body weight administration with weekly administration of 6 days，the 3 consecutive months.The changes of the organ coefficient of the animal were observed after sacrificed.Results The organ coefficient compared with the control group showed no significant difference; 2 weeks after the withdrawal of the organ coefficient of 3 dose group compared with the control group showed no significant difference.Conclusion Shuangwu Zhentong Capsule has no obvious accumulation toxicity，clinical doses are safe.

通訊作者：△中國(guó)人民解放軍第三七一醫(yī)院藥械科，河南新鄉(xiāng)453000

作者簡(jiǎn)介：呂宏迪 (1964—)，男，副主任藥師，學(xué)士。研究方向：中藥制劑及藥理。

收稿日期：(2013-04-19)

Effect of Shuangwu Zhentong Capsule on the organ coefficient of ratsLVHongdi，HAOShaojun，WENZhonghua，etal.EquipmentsDepartment，No.371HospitalofPLA，Henan，Xinxiang453000

【Key words】 Aconitum; Aconitum head; Drug toxicity; Toxicity tests，Chronic; Experimental animals; Rats

※ 項(xiàng)目來(lái)源：河南省科學(xué)技術(shù)廳2009年科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)：092102310202)

雙烏鎮(zhèn)痛膠囊是由制川烏頭、制草烏頭、青風(fēng)藤、木瓜、獨(dú)活、當(dāng)歸、紅花、黨參組成的中藥復(fù)方制劑，具有散寒除濕、祛風(fēng)止痛、活血通絡(luò)的功效，用于因風(fēng)寒濕引起的頭寒、頭痛諸癥，尤其適用于偏頭痛、三叉神經(jīng)痛及肢體、肌肉、關(guān)節(jié)疼痛。為探究其毒副作用，我們進(jìn)行了雙烏鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)大鼠臟器系數(shù)影響的實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果如下。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠80只，體質(zhì)量200～220 g，雌雄各半。均由西安交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：陜動(dòng)證字08-004。

1.1.2主要儀器XSP-8CC 數(shù)碼型生物顯微鏡(上海巴拓儀器有限公司)。

1.1.3實(shí)驗(yàn)藥品雙烏鎮(zhèn)痛膠囊，由中國(guó)人民解放軍第三七一醫(yī)院提供，批號(hào)080321，0.2 g/粒，含生藥5.8 g。制作方法：取當(dāng)歸適量，粉碎過(guò)100目篩，收集1/3處方量細(xì)粉，備用。制川烏頭、制草烏頭、青風(fēng)藤、獨(dú)活加85%乙醇回流提取3次，第1次加5倍量回流1.5 h，第2次加4倍量回流1.5 h，第3次加4倍量回流1.5 h，合并3次濾液(棄藥渣)，減壓回收乙醇，溶液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.33~1.36(60 ℃)的清膏，減壓干燥(65 ℃)，粉碎，過(guò)80目篩，膏粉備用。木瓜、當(dāng)歸(2/3處方量)、紅花、黨參混合后加水煎煮2次，第1次加10倍量水煎煮1 h，第2次加10倍量水煎煮1 h，合并2次濾液(藥渣棄)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度1.33~1.36(60 ℃)，于70 ℃減壓干燥，粉碎并過(guò)80目成膏粉，與1/3處方量當(dāng)歸細(xì)粉、醇提膏粉混合均勻，裝入2粒膠囊，即得。

1.2實(shí)驗(yàn)方法[1-4]取SD大鼠80只，分組、劑量和給藥參照《中藥、天然藥物長(zhǎng)期毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》[1]有關(guān)“大白鼠長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)”的要求，按體質(zhì)量分層隨機(jī)分組，分為正常對(duì)照組，雙烏鎮(zhèn)痛膠囊大、中、小劑量組，每組各20只。模擬臨床口服法采用灌胃途徑給藥，雙烏鎮(zhèn)痛膠囊大、中、小劑量(劑量分別為3.0、0.9、0.24 g/kg體質(zhì)量，分別相當(dāng)于生藥17.4、5.2、1.4 g/kg體質(zhì)量，分別是臨床日劑量的100、30、8倍)組SD大鼠每日8：00～10：00予相應(yīng)藥液10 mL/kg體質(zhì)量灌胃給藥，正常對(duì)照組予等容積0.9%氯化鈉注射液灌胃給藥，均每日1次，每周給藥6 d，連續(xù)3個(gè)月。

1.3觀察項(xiàng)目及方法給藥3個(gè)月后各組分別取12只大鼠，停藥2周后各組分別取8只大鼠(均雌雄各半)進(jìn)行系統(tǒng)尸解，系統(tǒng)檢查全身各臟器，肉眼觀察，然后取心、肝、脾、肺、腎、腦、腎上腺、胸腺、胰腺、甲狀腺、胰腺、卵巢、子宮、睪丸、前列腺、附睪于濾紙上吸去血液，稱濕質(zhì)量，計(jì)算臟器系數(shù)[臟器系數(shù)=(臟器質(zhì)量/大鼠體質(zhì)量)×1000‰]。取心、肝、脾、肺、腎、氣管、食管、胃、十二指腸、回腸、結(jié)腸、胰腺、下頜下腺、腎上腺、甲狀腺、腦垂體、胸腺、淋巴結(jié)、膀胱、睪丸、附睪、前列腺、卵巢、子宮、大腦、小腦、脊髓、脊神經(jīng)節(jié)、胸骨及骨髓，用10% 甲醛固定，常規(guī)石臘包埋，切片，蘇木—伊紅(HE)染色，光學(xué)顯微鏡檢查。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，各組間比較采用單因素方差分析，方差檢驗(yàn)齊者用最小顯著差數(shù)(LSD)法，方差不齊者用Games-Howell法檢驗(yàn)，等級(jí)資料用Ridit檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1給藥3個(gè)月后各組小鼠臟器系數(shù)比較見(jiàn)表1。

表1　給藥3個(gè)月后各組小鼠臟器系數(shù)比較　‰， ± s

表1　給藥3個(gè)月后各組小鼠臟器系數(shù)比較　‰， ± s

臟 器n正常對(duì)照組雙烏鎮(zhèn)痛膠囊大劑量組雙烏鎮(zhèn)痛膠囊中劑量組雙烏鎮(zhèn)痛膠囊小劑量組心臟123.87±0.543.59±0.47*3.69±0.28*3.72±0.30*肝臟1228.28±4.2328.85±3.31*27.08±3.22*27.12±2.83*脾臟123.13±0.732.77±0.50*2.68±0.51*2.68±0.55*肺126.52±1.636.14±2.13*5.95±1.07*6.86±2.36*腎臟127.06±0.706.88±0.55*6.75±0.53*6.49±0.68*腦127.09±1.236.62±1.23*6.99±1.78*6.98±1.56*腎上腺120.23±0.120.21±0.08*0.22±0.09*0.27±0.08*胸腺121.28±0.471.09±0.36*1.18±0.35*1.24±0.42*甲狀腺120.12±0.070.08±0.04*0.09±0.41*0.13±0.09*胰腺122.11±1.403.44±1.92*2.66±0.77*2.07±0.65*卵巢60.94±0.090.84±0.37*0.74±0.25*1.05±0.31*子宮63.54±1.073.72±2.17*3.25±0.46*3.66±1.43*睪丸610.63±1.769.22±1.91*9.61±1.16*10.56±2.04*前列腺61.48±0.251.68±0.29*1.49±0.33*1.61±0.55*附睪64.35±0.814.47±1.14*5.06±1.12*4.57±0.83*

與正常對(duì)照組比較，*P>0.05

由表1可見(jiàn)，給藥3個(gè)月后雙烏鎮(zhèn)痛膠囊大、中、小劑量組各臟器系數(shù)與正常對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2組織學(xué)檢查給藥3個(gè)月后、停藥2周后各組SD大鼠系統(tǒng)尸解，肉眼觀察各臟器均未發(fā)現(xiàn)明顯異常，光學(xué)顯微鏡下均未見(jiàn)明顯充血、水腫、細(xì)胞變性及壞死等。

2.3停藥2周后各組小鼠臟器系數(shù)比較見(jiàn)表2。

由表2可見(jiàn)，停藥2周后雙烏鎮(zhèn)痛膠囊大、中、小劑量組各臟器系數(shù)與正常對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表2　停藥2周后各組小鼠臟器系數(shù)比較　‰， ± s

表2　停藥2周后各組小鼠臟器系數(shù)比較　‰， ± s

臟器n正常對(duì)照組雙烏鎮(zhèn)痛膠囊大劑量組雙烏鎮(zhèn)痛膠囊中劑量組雙烏鎮(zhèn)痛膠囊小劑量組心臟83.53±0.363.56±0.49*3.53±0.37*3.48±0.29*肝臟828.08±2.4628.03±2.21*27.35±2.35*27.09±1.28*脾臟83.11±1.362.54±0.52*2.76±0.68*2.66±0.26*肺85.97±1.076.92±2.13*6.32±1.51*6.64±0.93*腎臟87.08±1.086.57±0.67*6.73±0.72*6.67±0.59*腦87.26±1.727.63±1.31*7.35±1.14*7.22±1.23*腎上腺80.19±0.090.22±0.08*0.19±0.09*0.20±0.08*胸腺81.11±0.310.97±0.26*1.16±0.33*1.01±0.25*甲狀腺80.06±0.030.05±0.03*0.05±0.02*0.06±0.03*胰腺83.83±1.043.19±0.92*3.37±0.64*3.34±0.84*卵巢40.56±0.030.67±0.22*0.76±0.15*0.64±0.14*子宮43.54±1.133.00±1.54*3.06±1.10*3.64±2.17*睪丸411.16±1.879.66±2.01*9.38±3.54*11.61±2.00*前列腺41.26±0.221.59±0.66*1.44±0.23*1.29±0.95*附睪43.97±1.674.95±0.80*4.79±1.58*5.72±0.78*

與正常對(duì)照組比較，*P>0.05

3討論

偏頭痛、三叉神經(jīng)痛及肢體、肌肉、關(guān)節(jié)疼痛是臨床較為常見(jiàn)的疼痛性疾病，且反復(fù)發(fā)作，遷延難愈，疼痛劇烈，往往給患者帶來(lái)極大痛苦，嚴(yán)重影響其日常生活及工作?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)于這些病的治療多采用鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛藥物，療效不理想，且常有副作用發(fā)生，甚至成癮。而中醫(yī)藥在長(zhǎng)期的臨床醫(yī)療實(shí)踐中積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，顯示了明顯優(yōu)勢(shì)及廣闊前景。本研究雙烏鎮(zhèn)痛膠囊方中制川烏頭、制草烏頭燥濕化濁，散寒止痛，為君藥。青風(fēng)藤祛風(fēng)濕，通經(jīng)絡(luò)，利小便，擅治風(fēng)濕痹痛、關(guān)節(jié)腫脹；木瓜平肝疏筋，和胃化濕；獨(dú)活祛風(fēng)勝濕，散寒止痛；以上3味藥與君藥功能相近，結(jié)合后相互增強(qiáng)藥力，為臣藥。黨參健脾補(bǔ)肺，益氣生津；當(dāng)歸補(bǔ)血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)腸通便；紅花活血通經(jīng)，祛瘀止痛；以上3味藥佐助君、臣藥以增通絡(luò)止痛、活血祛瘀之力。諸藥相合，寒熱并用，虛實(shí)兼顧，散寒除濕，祛風(fēng)止痛，活血通絡(luò)，適用于偏頭痛、三叉神經(jīng)痛及肢體、肌肉、關(guān)節(jié)疼痛見(jiàn)上述癥狀者。

本實(shí)驗(yàn)主要觀察其毒副作用，雙烏鎮(zhèn)痛膠囊大、中、小劑量組給藥劑量分別是臨床日劑量的100、30和8倍，給藥3個(gè)月和停藥2周后對(duì)心、肝、脾、肺、腎、腦、腎上腺、胸腺、胰腺、卵巢、子宮、睪丸、前列腺、甲狀腺、胰腺、附睪的臟器系數(shù)除給藥期個(gè)別臟器有差異外，其余無(wú)明顯影響，綜合各項(xiàng)指標(biāo)分析該差異無(wú)病理意義。病理組織學(xué)檢查，心、肝、脾、肺、腎、氣管、食管、胃、十二指腸、回腸、結(jié)腸、胰腺、下頜下腺、腎上腺、甲狀腺、腦垂體、胸腺、淋巴結(jié)、膀胱、睪丸、附睪、前列腺、卵巢、子宮、大腦、小腦、脊髓、脊神經(jīng)節(jié)、胸骨及骨髓正常對(duì)照組和給藥組均未見(jiàn)明顯中毒性病理改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，雙烏鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)大鼠未見(jiàn)明顯蓄積毒性，在臨床劑量下是安全的，為臨床使用雙烏鎮(zhèn)痛膠囊提供了用藥安全的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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(本文編輯：曹志娟)

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