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鎮(zhèn)驚瀉火顆粒對小鼠的鎮(zhèn)靜催眠及抗抑郁作用

奚之駿1，許麗雯1，史秀峰1，祁雯1，陶建生2

(1.上海中醫(yī)藥大學附屬龍華醫(yī)院藥劑科，上海 200032；2.上海中醫(yī)藥大學藥物安全評價中心，上海 201203)

[關鍵詞]鎮(zhèn)驚瀉火顆粒；抗抑郁藥；催眠；小鼠

鎮(zhèn)驚瀉火方是上海市名老中醫(yī)胡建華教授(1924-2005年)所創(chuàng)，由甘麥大棗湯、百合知母湯、生鐵落飲等諸方加減而成，全方由甘草、淮小麥、大棗、鐵落、制天南星、丹參、大黃、知母、百合9味藥組成，臨床上用于治療抑郁癥、不眠、廣泛性焦慮、精神障礙等多種精神情志疾病，均具有顯著療效。由此方研發(fā)而來的鎮(zhèn)驚瀉火合劑亦在上海中醫(yī)藥大學附屬龍華醫(yī)院應用多年，療效好。將其開發(fā)成顆粒劑，利于攜帶和保存，以提高病人的用藥依從性。本研究初步觀察鎮(zhèn)驚瀉火顆?？挂钟艉痛呙咦饔谩?/p>

1材料和方法

1.1藥物鎮(zhèn)驚瀉火顆粒由本院制劑室自制，批號20111226。鎮(zhèn)驚瀉火合劑由本院制劑室自制，批號1307001。鹽酸氟西汀膠囊(批號2076A，禮來公司)。地西泮注射液(批號 AH121201)、氯化鈉注射液(批號WF130919)均為上海旭東海普藥業(yè)有限公司產(chǎn)品。注射用苯巴比妥鈉(批號120708，上海新亞藥業(yè)有限公司)，羧甲基纖維素鈉(CMC-Na，批號20111226，國藥集團化學試劑有限公司)。鎮(zhèn)驚瀉火顆粒、鎮(zhèn)驚瀉火合劑、鹽酸氟西汀、地西泮在臨用前用5%CMC-Na配成所需濃度。

1.2抗抑郁實驗普通級昆明種小鼠160只，體重25～30 g，雌雄各半(上海斯萊克實驗動物有限公司)，動物生產(chǎn)許可證號：SCXK(滬)2012-0002，采用完全隨機分組法分為16組，每組10只。

采用小鼠懸尾和小鼠強迫游泳兩種實驗，每種實驗均分成4組，即1個受試藥組(鎮(zhèn)驚瀉火顆粒)、2個陽性對照組(鎮(zhèn)驚瀉火合劑和鹽酸氟西汀)和1個陰性對照組。小鼠連續(xù)灌胃7 d，于末次灌胃1 h后進行實驗。

1.2.1懸尾實驗將小鼠尾端2 cm處固定于水平面上，使其呈倒掛狀態(tài)，頭部離臺面約30 cm，四周以板隔離動物視線，記錄小鼠在6 min內(nèi)的不動時間。

1.2.2強迫游泳實驗將小鼠放入長60 cm、寬40 cm，水深10 cm的水桶，水溫保持25 ℃，小鼠游泳2 min后，開始觀察，累計4 min內(nèi)小鼠在水中停止掙扎、呈漂浮狀態(tài)、

僅有

細小的肢體運動以保持頭部浮在水面的持續(xù)時間(不動時間)[1-3]。

1.3催眠實驗分為進行閾下劑量苯巴比妥鈉致小鼠入睡只數(shù)影響，和對閾上劑量苯巴比妥鈉致小鼠睡眠持續(xù)時間影響兩個實驗，每個實驗均隨機分成4組，1個受試藥組(鎮(zhèn)驚瀉火顆粒)、2個陽性對照組(鎮(zhèn)驚瀉火合劑和地西泮)和1個陰性對照組。小鼠連續(xù)灌胃7 d，于末次給藥前8 h禁食，前1 h禁水，灌胃給藥30 min后進行實驗。

1.3.1對閾下劑量苯巴比妥鈉致小鼠入睡只數(shù)的影響小鼠于末次灌胃給藥30 min后腹腔注射苯巴比妥鈉100 mg/kg，觀察并記錄發(fā)生睡眠小鼠的只數(shù)，以注射苯巴比妥鈉15 min內(nèi)翻正反射消失達1 min以上者確定為陽性[4,5]。

1.3.2對閾上劑量苯巴比妥鈉致小鼠睡眠持續(xù)時間的影響小鼠于末次灌胃給藥30 min后，腹腔注射苯巴比妥鈉125 mg/kg，觀察并記錄各組小鼠睡眠持續(xù)時間。

2結果

2.1抗抑郁作用小鼠懸尾實驗結果見表1。受試藥組、陽性對照組的小鼠6 min內(nèi)不動時間顯著短于陰性對照組(P<0.01)，鎮(zhèn)驚瀉火顆粒組與鹽酸氟西汀組之間無顯著差異，與鎮(zhèn)驚瀉火合劑組有顯著差異(P<0.05)。小鼠強迫游泳實驗結果見表1。受試藥組、陽性對照組的小鼠4 min內(nèi)不動時間顯著短于陰性對照組(P<0.01)，受試藥組與陽性對照組之間無顯著差異。

2.2催眠作用對苯巴比妥鈉閾下劑量致小鼠入睡只數(shù)、閾上劑量致小鼠睡眠持續(xù)時間的影響結果見表2，受試藥組、陽性對照組的小鼠入睡只數(shù)多于陰性對照組，且小鼠的睡眠持續(xù)時間顯著長于陰性對照組(P<0.01)。

表1鎮(zhèn)驚瀉火顆粒對小鼠懸尾實驗和

小鼠強迫游泳實驗不動時間的影響

組別劑量懸尾實驗(t/s)強迫游泳實驗(t/s)鎮(zhèn)驚瀉火顆粒組58.5g/kg106.6±14.37**△70.0±15.61**鎮(zhèn)驚瀉火合劑組8ml/kg118.4±18.51**75.8±12.05**鹽酸氟西汀組0.02g/kg101.9±16.22**68.4±12.65**陰性對照組0168.8±15.0498.7±16.73

**P<0.01，與陰性對照組比較；△P<0.05，與鎮(zhèn)驚瀉火合劑組比較

表2鎮(zhèn)驚瀉火顆粒對苯巴比妥鈉致小鼠入睡

只數(shù)和睡眠持續(xù)時間的影響

組別劑量閾下劑量苯巴比妥鈉致小鼠入睡(只)閾上劑量苯巴比妥鈉致小鼠睡眠持續(xù)時間(t/min)鎮(zhèn)驚瀉火顆粒組58.5g/kg654.65±6.01**鎮(zhèn)驚瀉火合劑組8ml/kg7*52.71±2.87**地西泮組0.004g/kg7*70.98±5.82**陰性對照組0143.90±3.62

*P<0.05，**P<0.01，與陰性對照組比較

3討論

小鼠強迫游泳模型和懸尾模型都提供了一個無可回避的壓迫環(huán)境，實驗中小鼠所體現(xiàn)出來的不動狀態(tài)，體現(xiàn)了一種稱之為“行為絕望和扭曲”(behavioral despair and variant)或“對強壓環(huán)境適應的失敗”(failure to adapt to stress)的狀態(tài)[3,6]。這兩種行為絕望模型對絕大多數(shù)抗抑郁藥敏感， 操作簡單、 快捷， 被廣泛用于抗抑郁藥物的初篩。 作為判斷指

標，不動時間反映了小鼠的一種低落情緒和絕望狀態(tài)[7，8]。不動時間可以被臨床有效的抗抑郁藥及一系列抗抑郁治療方法減少，并且不受抗焦慮藥影響，而那些已知的能導致人抑郁的藥物則可以增加不動時間[6]。實驗結果經(jīng)方差分析顯示，鎮(zhèn)驚瀉火顆粒能顯著縮短懸尾及強迫游泳實驗中小鼠的不動時間，表明該藥具有良好的抗抑郁作用。而鎮(zhèn)驚瀉火顆粒劑組在懸尾實驗及強迫游泳實驗中的小鼠不動時間均短于鎮(zhèn)驚瀉火合劑組，體現(xiàn)其在抗抑郁作用程度上優(yōu)于鎮(zhèn)驚瀉火合劑，這與顆粒劑采用優(yōu)化后的生產(chǎn)工藝有關。

催眠作用方面，鎮(zhèn)驚瀉火顆粒能夠增加閾下劑量苯巴比妥鈉所致小鼠睡眠只數(shù)。采用Fisher精確概率法檢驗，顯示鎮(zhèn)驚瀉火顆粒組與陽性對照組間無顯著性差異，陽性對照組與陰性對照組間有顯著性差異(P<0.05)。鎮(zhèn)驚瀉火顆粒組的閾下劑量苯巴比妥鈉所致小鼠睡眠只數(shù)與陰性對照組相比未顯示顯著差異，但數(shù)量明顯多于陰性對照組。鎮(zhèn)驚瀉火顆?？娠@著延長閾上劑量苯巴比妥鈉所致小鼠睡眠持續(xù)時間。上述結果說明鎮(zhèn)驚瀉火顆粒及合劑具有催眠作用。

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[修回日期]2015-07-23

[本文編輯]吳銘權

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·經(jīng)驗交流·

[收稿日期]2014-11-14

作者簡介奚之駿(男)，主管藥師.E-mail:xizhijun@msn.com

基金項目上海市衛(wèi)生局中藥新藥及院內(nèi)制劑研發(fā)項目(2010Y013A)

DOI：10.5428/pcar20150610

[中圖分類號]R965

[文獻標志碼]B

[文章編號]1671-2838(2015)06-0431,458,480-03